Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
19 октября 1979 г. N 2068-79
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФУНГИЦИДА БАЙЛЕТОНА МЕТОДОМ ТСХ В ПОЧВЕ,
КОРНЯХ, ЗЕЛЕНЫХ ЛИСТЬЯХ, ПЛОДАХ ТОМАТОВ
И ОГУРЦОВ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при
МСХ СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского
и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
1. Краткая характеристика препарата
Байлетон (синоним: триадимефон) - бесцветный
порошок, не имеющий запаха, эффективен против большого спектра грибов, особенно
мучнисторосяных.
Активное вещество байлетона:
1-(4-хлор-фенокси)3,3-диметил-1-(1Н-1,2,4-триазолил-1)-2-бутанон.
---
Cl-//
\\O-CH-CO-C(CH )
\ ___ / │ 3 3
---
N
/ \
/ \N
││ ││
N└───┘
Молекулярная масса 293,7. Температура плавления:
82,3 °С. Растворим в
воде (0,026 г
действующего вещества на 100 г
растворителя при 20 °С).
Хорошо
растворяется в большинстве органических растворителей. Стабильность:
не разлагается в
течение 24 часов при 20° в 0,1 н H SO и NaOH.
2 4
Байлетон, применяемый в
рекомендуемых нормах расхода, нетоксичен. ЛД
50
для крыс
при оральном введении
равно 2500 мг д.в./кг живого
веса.
Действующее
начало фунгицида безвредно для пчел.
<...>
Пластинки для хроматографии "силуфол" размером 50 х 150 мм производство
Чехословакии.
Пластинки стеклянные размером 50 х 150 мм
с тонким слоем силикагеля.
Пульверизаторы для опрыскивания
пластинок.
Ротационный испаритель ИР-1.
Сушильный шкаф.
Цилиндры мерные на 5, 10, 100 мл.
Часовое стекло.
2.4. Подготовка к определению
2.4.1. Получение химически чистого байлетона
Из торговой фирмы 25% смачивающегося
порошка байлетона готовят насыщенный раствор в
этиловом спирте, помещают его на водяную баню при 35 - 40 °С
и оставляют до полного растворения препарата. Затем раствор отфильтровывают и
упаривают до небольшого объема и оставляют в холодильнике для кристаллизации.
Выпавшие кристаллы отфильтровывают, промывают охлажденным этиловым спиртом и
высушивают на воздухе.
Дополнительным критерием степени чистоты
препарата служит хроматографическая индивидуальность,
при определении которой стандартные растворы, будучи нанесенными на пластинку в
количестве 5 - 10 мкг, не содержат посторонних пятен после хроматографирования.
2.4.2. Приготовление пластинок
Пластинки
тщательно моются хромовой
смесью, промываются проточной
водой, затем
дистиллированной и сушат.
Покрывают сорбционной смесью,
состоящей из 30 г силикагеля, 5 г сернокислого кальция
и 100 куб. см воды.
(Силикагель измельчают, пропускают
через сито и
промывают с соляной
кислотой, уксусной кислотой, дистиллированной водой до
нейтральной реакции
на метилоранж.
Один раз промывают метанолом, высушивают 2 часа на воздухе и
4 часа сушат в сушильном
шкафу при 120 °С. Получают силикагель с III
степенью активности
по Брокману.) Сушат
пластинки в горизонтальном
положении в
течение 18 - 20 час. при комнатной
температуре и хранят в
эксикаторе над CaCl .
2
2.5. Проведение определения
2.5.1. Экстракция
Почва. 100 г воздушно-сухой, просеянной
через сито с диаметром 1 - 2 мм почвы заливают ацетоном до покрытия пробы и
оставляют на ночь в колбе с притертой пробкой или экстрагируют на аппарате для
встряхивания в течение 2-х часов. Полученный раствор отфильтровывают. Остаток в
колбе и на фильтре промывают небольшими порциями растворителя. Общий экстракт
упаривают до небольшого объема и хроматографируют.
Сильно окрашенные растворы обесцвечивают путем добавления 5 - 10 г
активированного угля.
Растительный материал. 10 г листьев, 20 г
корней или побегов, 50 г плодов растирают с кварцевым песком и безводным
сернокислым натрием, заливают тем же растворителем (ацетоном) и обрабатывают
аналогично пробам почвы. После этого добавляют уголь, вытяжку для лучшего ее
обесцвечивания выдерживают 30 мин. на водяной бане при 35 - 40 °С, затем перемешивают на аппарате для встряхивания в
течение 1 часа. Раствор отфильтровывают, высушивают сульфатом натрия, упаривают
и хроматографируют.
Примечание: при работе с оводненными плодами после выпаривания ацетона довольно
часто на дне колбы остается вода, которая при 70 °С не
выпаривается. В таком случае надо:
1. Добавлять небольшие количества ацетона
(через б/в сернокислый натрий), взбалтывать и снова
выпаривать. Так 2 - 3 раза до окончательного объема 0,1 мл.
2. Вводный остаток с насыщенным раствором
поваренной соли (NaCl) добавить хлороформ, равный по
объему жидкости, и экстрагировать препарат в течение часа на аппарате для
встряхивания. Отделить хлороформ, пропустить его через
б/в сернокислый натрий, а к жидкости снова добавить
такое же количество хлороформа и еще раз поставить на качалку на 30 мин.
Экстракты объединить, выпарить и хроматографировать.
2.5.2. Хроматографирование
Сухие остатки растворяют в 0,1 мл (4 - 5
капель) ацетона и наносят на хроматограмму. Обмывают
колбу 3 - 4 раза по 0,1 мл растворителя и опять наносят так, чтобы размеры
пятен не превышали 5 - 6 мм. Слева и справа от пробы наносят 3 - 5 мкг
стандартного раствора. Пластинку высушивают и опускают в хроматографическую
камеру. Приготовляют одну из подвижных фаз, наливают на дно камеры и опускают
пластинку. Готовую пластинку оставляют на воздухе для просушки и опрыскивания
проявляющим реактивом.
Байлетон проявляется,
как правило, в виде двух синих
пятен на желтом
фоне пластинки
с R -
0,22 и R -
0,56 на пластинке "силуфол"; на
f1 f2
силикагеле соответственно - 0,16 и 0,44.
2.6. Обработка результатов анализа
Полуколичественное определение проводится
путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы и
стандартных растворов. Для получения количественных данных содержание байлетона определяют путем измерения площади пятен на хроматограмме с помощью кальки, протертой вазелиновым или
растительным маслом. Площадь пятна высчитывают методом наложения кальки на
миллиметровую бумагу.
Расчет результатов анализа производят по
формуле:
A х S
пробы
X = --------------,
B х S
стандарта
где:
X - содержание препарата в пробе в мкг/г или мг/кг веса;
A
- количество препарата,
найденное путем визуального
сравнения
размера и
интенсивности пятен пробы и стандартного раствора в мкг;
B - вес или объем исследуемой пробы;
S
- площадь пятна анализируемой пробы в кв. мм;
пробы
S
- площадь пятна стандартного раствора в кв. мм.
стандарта
2.7. Требования безопасности
Необходимо соблюдать требования
безопасности, обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями,
концентрированными кислотами.
Строго руководствоваться "Правилами
по технике безопасности в химических лабораториях".
Примечание. ДОК и ПДК байлетона
не установлены.
2.8. Литература
Specht W. Methode
zur gaschromatographischen Bestimming der Fungizide Fuberidazol, Fluotrimazol und Triadimefon in Pflanzen und Boden-Pflanzenschutz Nachr. Bayer, 1977, 30, 1: 55 - 71.
Настоящие Методические указания по
определению остаточных количеств фунгицида байлетона
в почве, корнях, зеленых листьях, плодах томатов и огурцов методом ТСХ
разработаны:
1) Бажановой Ниной Васильевной - ст.н.с. в
лаборатории биохимии растений и вредных организмов института защиты растений
МСХ Армянской ССР.
2) Аветисян Каринэ Вараздатовной - мл.н.с. в лаборатории биохимии
растений и вредных организмов института защиты растений МСХ Армянской ССР.
3) Папоян
Фрунзе Артаваздовичем - зав. отдела фитопатологии
института защиты растений МСХ Армянской ССР.