Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
19 октября 1979 г. N 2094-79
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТАЧИГАРЕНА В ВОДЕ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим
средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского
и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
Настоящие Методические указания
распространяются на определение содержания тачигарена
в воде при санитарном контроле.
1. Краткая характеристика препарата
H┌┬───┬┐OH
││ ││
H C\
/N Молекулярная
масса 99,03.
3
\ /
C H O N.
О 4 5 2
Действующее начало препарата тачигарен (Ф-319) - 3-окси-5-метил-изоксазол. Чистое
вещество - бесцветные игольчатые кристаллы с температурой плавления 86 - 87 °С, стабильное к действию кислот и щелочей. Растворимость в
воде при 25 °С: 85 г в 100 мл. Хорошо растворим в
метаноле, этаноле, ацетоне. Препарат рекомендуется для протравливания семян
сахарной свеклы. Применяется в виде 70-процентного смачивающего порошка. ПДК тачигарена в воде в настоящее время не установлена.
2. Методика определения тачигарена в воде
2.1. Принцип метода. Метод основан на
экстракции тачигарена из воды органическим
растворителем с последующим определением с помощью тонкослойной хроматографии.
Минимально открываемое количество тачигарена на
тонкослойных хроматограммах 5 мкг.
2.2. Метрологическая характеристика
метода приведена в таблице.
Таблица
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ТАЧИГАРЕНА
В ВОДЕ С ПОМОЩЬЮ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Диапазон определяемых концентраций 0,1 - 1,0 мг/л
Анали-
зируемая
проба
|
Предел
обнаруже-
ния, мг/л
|
Число
параллельных
определений
|
Размах
варьиро-
вания, %
|
Среднее
значение
определе-
ния, %
|
Стандарт-
ное от-
клонение,
%
|
Относитель-
ное стан-
дартное от-
клонение, %
|
Вода
|
0,1
|
5
|
20,0
|
84,6
|
7,17
|
8,47
|
2.3. Реактивы и растворы
Ацетон, хч,
ГОСТ 2603-71.
Эфир для наркоза, Фармакопея СССР
(перегнанный).
н-Гексан, ч,
МРТУ 6-09-2937-66 (перегнанный).
Бензол, хч,
ГОСТ 5955-68.
Натрий сернокислый безводный, ч, ГОСТ 4166-66.
Натрий хлористый, хч,
ГОСТ 4233-66.
Крахмал картофельный растворимый для йодометрии, ГОСТ 10163-62.
Стандартный раствор тачигарена
в н-гексане с содержанием 0,5 мг/мл. Помещают 50 мг тачигарена в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки н-гексаном.
Азотнокислое серебро, чда,
ГОСТ 1277-63.
Бромфеноловый синий, чда, ТУ МГ УХП 271-59.
Проявляющий реактив: в мерную колбу на
100 мл помещают 0,05 г бромфенолового синего, 10 мл
ацетона и доводят до метки 0,5-процентным водно-ацетоновым раствором
азотнокислого серебра (0,5 г азотнокислого серебра растворяют в смеси 24 мл
ацетона и 76 мл дистиллированной воды).
Силикагель КСК, N 2, ГОСТ 3956-76, ТУ
6-09-2523-72. Для приготовления сорбционной массы для хроматографических
пластинок 1 г крахмала заваривают в 15 мл дистиллированной воды, прибавляют еще
110 мл воды, 40 г силикагеля, измельченного и просеянного через сито 100/120
меш, и тщательно перемешивают. Это количество сорбционной массы равномерно
наносят на 15 пластинок. Пластинки сушат на воздухе и хранят в эксикаторе.
2.4. Приборы и посуда
Делительные воронки на 1 л, ГОСТ 8613-75.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ
25-11-917-74.
Мерные колбы на 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Грушевидные колбы на 100 мл, ГОСТ
10394-72.
Водяная баня, ТУ 46-22-603-75.
Вакуумный водоструйный стеклянный насос,
ГОСТ 10696-75.
Стеклянный лабораторный холодильник, ХПТ,
ГОСТ 9499-70.
Камера хроматографическая,
150 х 200, 105 х 165 мм, ГОСТ 10565-63.
Эксикатор, ГОСТ 6371-73.
Микропипетки, ГОСТ 20292-74.
Медицинский шприц на 1 мл.
Стеклянные пластинки, 9 x 12 см.
Сито капроновое, 100/120 меш.
Пульверизатор стеклянный для обработки
пластинок.
Электроплитка, ТУ 92-275-76.
Сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76Е.
Камера для обработки пластинок, ТУ
25-11-430-70.
2.5. Проведение определения
Пробу
воды (250 - 750
мл) помещают в делительную воронку, добавляют
хлористый натрий
из расчета 3,3 г на 10 мл воды, энергично встряхивают до
полного растворения соли и экстрагируют тачигарен
диэтиловым эфиром (100,
50 и 50 мл). В случае объема пробы воды 250 мл объем экстрагента может быть
уменьшен (50, 25 и 25 мл). Объединенный экстракт сушат
безводным сульфатом
натрия (5 - 10 г) в течение 15 - 30 минут при
периодическом встряхивании и
упаривают растворитель на ротационном
испарителе (температура водяной бани
не выше
30 °С) до
небольшого объема (~
1 мл). Упаренный
экстракт
количественно наносят
на хроматографическую пластинку
с тонким слоем
силикагеля КСК, скрепленного крахмалом, с помощью медицинского
шприца на 1
мл. Слева
и справа от пробы наносят по два пятна (5 и 10 мкг)
стандарта
тачигарена в виде
раствора в н-гексане
и проводят хроматографирование в
системе растворителей
бензол - ацетон
(3:1). Для хроматографирования
используют насыщенную
камеру. Для насыщения
стенки камеры обкладывают
фильтровальной бумагой,
которая касается смеси
растворителей и
пропитывается. Через
два часа быстро открывают крышку камеры и помещают
пластинку для
развития хроматограммы. После
окончания процесса
хроматографирования
(подъем фронта растворителя
на 11,5 см) пластинку
извлекают из
камеры, сушат на воздухе в
вытяжном шкафу и
обрабатывают
проявляющим реактивом.
При наличии в
пробе тачигарена на
пластинке
появляется
светло-желтое пятно на синем фоне
с величиной R =
0,88 +/-
f
0,02. Оценку
качества тачигарена на хроматограмме
проводят путем
визуального
сравнения размера и интенсивности
окраски пятен стандарта
с
пятном пробы.
2.6. Обработка результатов анализа
Для определения содержания тачигарена в воде используют следующую формулу:
5
10 x А
Д = -------,
а x R
где:
Д - содержание тачигарена
в воде, мг/л;
А - количество тачигарена
в пробе, найденное визуальным сравнением со стандартным пятном, мг;
а - объем пробы, мл;
R - процент определения, найденный
предварительно, %.
3. Настоящие Методические указания
разработаны В.Д. Чмилем, Е.В. Безкровной
и А.С. Меженной (ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и
пластических масс, Киев).
4. Требования безопасности
Соблюдаются требования безопасности,
обычно рекомендуемые для работы с химическими реактивами.