Утверждено
Минздравом СССР
12 мая 1983 г. N 2488-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОТРИЛА В ЛУКЕ ЗЕЛЕНОМ И РЕПЧАТОМ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны К.В. Криволуцким, С.В. Тулуповой
(ВНИИССОК).
Краткая
характеристика препарата. Тотрил -
4-гидрокси-3,5-
дийодбензонитрил.
Выпускается в форме 25-процентного концентрата эмульсии.
Брутто -
формула C H OI N. Молекулярная масса
370,9. Общепринятое
7 3 2
название - йоксинил.
Твердое воскообразное вещество
кремового цвета
с т. пл. 212 -
213,5 °C. Практически нерастворимо
в воде. Растворимость
(г/л): в ацетоне -
100, метаноле - 90, ксилоле - 500. Тотрил уничтожает
преимущественно
однолетние двудольные сорняки: щирицу, лебеду, марь белую,
пастушью сумку,
звездчатку и др. ДСД 0,04 мг/кг, МДУ в луке 0,1 мг/кг.
Принцип метода. Метод основан на
хроматографии в тонком слое после извлечения тотрила
из лука гексаном.
Метрологическая характеристика метода.
Пропорциональная зависимость между площадью пятна и массой тотрила
сохраняется в интервале 0,5 - 10 мкг. Предел определения 0,02 мг/кг. Среднее
значение определения 77%. Стандартное отклонение 6,6%. Доверительный интервал
(при p = 0,95, n = 9) 5,07.
Избирательность метода. Метод специфичен,
другие препараты в данных условиях хроматографирования
определению не мешают.
Реактивы и растворы.
н-Гексан ч. Пероксид
водорода х.ч. Сульфат натрия безводный. Кислота
уксусная 98-процентная, х.ч. Ксилол ч. Амиловый эфир
уксусной кислоты ч. Пластинки "Силуфол"
(связующее - крахмал). Аммиак водный ч.д.а. Железо
треххлористое х.ч. Стандартный раствор: 10 мг тотрила растворяют в мерной колбе на 100 мл в гексане. Раствор соответствует концентрации 100 мкг/мл.
Хранят в склянке с пришлифованной пробкой на холоде в течение 2 мес.
Проявляющие реагенты: 10-процентный раствор пероксида водорода, 5-процентный
раствор треххлористого железа.
Приборы и посуда. Ротационный испаритель.
Колбы: конические со шлифом на 100 мл; грушевидные на 250 мл. Воронки
делительные. Источник УФ-света (кварцевая лампа
мощностью 250 Вт). Воронки. Пробирки. Капилляры стеклянные. Микрокомпрессор
МК-Л.
Отбор проб. Пробу лука (100 - 200 г)
очищают, измельчают ножом или на мясорубке. Зеленый лук измельчают,
предварительно вымыв и просушив. Отбирают среднюю пробу массой 25 - 50 г.
Ход анализа. Экстракция и очистка
экстракта. Измельченную навеску 25 - 50 г помещают в коническую колбу, заливают
гексаном (25 - 50 мл) на ночь. Одновременно заливают
пробу контрольного лука, в которую вносят 10 мкл
стандартного раствора, что соответствует внесению 1 мкг препарата в контрольную
пробу.
Гексановый экстракт отделяют от массы фильтрованием через бумажный фильтр со
слоем безводного сульфата натрия (5 г). Колбу и фильтр трижды промывают гексаном порциями по 5 - 10 мл. Объединенный экстракт
упаривают на ротационном испарителе и досушивают струей воздуха. Сухой остаток
растворяют в смеси 10 мл муравьиной кислоты и 2 мл этанола, добавляют 3 мл
ксилола, взбалтывают, слой ксилола отделяют, упаривают до объема 0,5 мл. Затем хроматографируют. Аналогично обрабатывают контрольную
пробу.
Хроматографирование. Для каждой пробы вырезают отдельную пластинку "Силуфол" высотой 10 - 14 см, шириной 2 см. В ее нижней
части загибают бортик высотой 5 мм. Пробу объемом 0,5 мл вносят в углубление за
бортиком капилляром или микропипеткой порциями по 0,10 - 0,15 мл. Внесение
повторяют периодически по мере впитывания. Высота поднятия ксилольного
экстракта 6 - 7 см.
Основная
часть коэкстрактивных веществ остается на старте. Некоторая
часть коэкстрактивных веществ
по мере продвижения ксилольного экстракта
движется с
R 0,3 - 0,5. Тотрил
движется с фронтом ксилольного экстракта.
f
После нанесения пробы пластинки слегка
подсушивают в сушильном шкафу при температуре 80 - 100 °C в течение 1 - 2 мин.
Затем помещают в эксикатор над 25-процентным раствором аммиака. Выдерживают
пластинки в атмосфере аммиака в течение 5 - 10 мин.
Далее
пластинки облучают в УФ-свете в течение 30
мин. на расстоянии
350 мм от лампы
мощностью 250 Вт. Тотрил
под действием аммиака и УФ-света
образует
продукты распада, способные давать окрашенное пятно и перемещаться
с R 0,95 - 1,0 при развитии хроматограммы
водой.
f
Хроматографируют дистиллированной водой так, чтобы высота подъема воды на 5 - 10 мм
превышала высоту подъема экстракта. Нижний край пластинки (20 - 30 мм),
содержащий оставшуюся на старте основную массу коэкстрактивных
веществ, перед хроматографированием обрезают.
Оставшуюся часть пластинки высушивают в сушильном шкафу при 80 - 100 °C в
течение 3 - 5 мин. Хроматографирование и подсушивание
пластинки повторяют. Высота фронта растворителя (воды) в обоих случаях должна
быть одинаковой. Затем хроматограмму проявляют.
Рекомендуется не опрыскивать пластинку проявляющим реагентом, а осторожно
смачивать небольшими порциями (0,1 - 0,2 мл) 10-процентного раствора пероксида
водорода на расстоянии 20 - 30 мм от предполагаемого места концентрации тотрила.
Можно проявлять тотрил
раствором треххлористого железа. При наличии тотрила
в пробе появляется сине-фиолетовая полоска. Контрольная проба обрабатывается
параллельно в идентичных условиях.
Обработка результатов анализа. Площади и
интенсивность окраски пятен пробы и стандартных растворов сравнивают спустя 20
- 30 мин. после проявления. Содержание тотрила (X,
мг/кг) рассчитывают по формуле:
A
X = -,
P
где:
A - количество препарата, найденное в
анализируемой пробе, мкг;
P - масса пробы, г.
Требования безопасности. Следует
соблюдать правила безопасности, рекомендуемые при работе с органическими
растворителями.