Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
12 мая 1983 г. N 2779-83
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
ДАКОНИЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при
МСХ.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
Физико-химические
свойства препарата
Даконил (хлортолонил, термил,
экзотермил, фортурф,
Браво-75, деконил 2787).
Cl CN
\____/
Cl_// \\_Cl
\____/
/----\
Cl
CN
C Cl N
М.м. 265,9.
8 4
2
2,4,5,6-Тетрахлоризофталонитрил - белое
кристаллическое вещество без запаха, т. пл. 250 - 251 °С,
т. кип. 350 °С при 760 мм рт. ст.
Давление паров 0,01 мм рт. ст. при 40 °С.
Растворимость в воде при 25 °С 0,6 мг/л, умеренно растворим в большинстве органических
растворителей: ацетоне (2%), бутаноле, диметилсульфоксиде
(2%), циклогексане (3%), диметилформамиде (3%),
ксилоле (8%) и др.
Препарат термостабилен, устойчив к
действию щелочей, водных растворов кислот, ультрафиолета.
Выпускается в виде 75-процентного с.п., 5 - 10-процентных гранул.
ЛД
для крыс - 5000 мг/кг.
50
Используется для борьбы с болезнями
картофеля и томатов, виноградной лозы, хмеля, перца, баклажан, для обработки
хлопчатника и других культур.
I. Характеристика
метода
1. Определение основано на хроматографировании анализируемого соединения на
неподвижной фазе SE-30 или смеси ОУ-17 и QF-1 с использованием детектора
постоянной скорости рекомбинации (ДПР), а также в тонком слое силикагеля (окиси
алюминия) с последующим применением для обнаружения зон локализации препарата
проявляющего реагента.
2. Отбор проб проводится с
концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента", фильтр
аналитический АФА-ХА-20).
3. Предел измерения в анализируемом
объеме пробы: ГЖХ - 0,2 мг; ТСХ - 0,2 мкг.
4. Предел измерения в воздухе (при отборе
30 л воздуха): ГЖХ - 0,01 мкг/куб. м; ТСХ - 0,01 мг/куб. м.
5. Диапазон измеряемых концентраций: ГЖХ
- 0,01 - 0,1 мкг/куб. м; ТСХ - 0,01 - 0,3 мг/куб. м.
6. Определению не мешают изомеры ГХЦГ, гексахлорбензол, 2,4'-4,4'-ДДТ, ДДД, ДДЭ.
7. Граница суммарной погрешности
измерения: ГЖХ - 10,25%, ТСХ - 15,30%.
II. Реактивы,
растворы, материалы
Даконил, 99,6%.
Ацетон, ч., ГОСТ 2603-79.
Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.
Натрий сернокислый безводный, ГОСТ
4166-76.
Фильтры бумажные обеззоленные
"синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.
Фильтры аналитические АФА-ХА-20.
Стандартный раствор даконила
в гексане (100 мкг/мл). Рабочий стандартный раствор
для ГЖХ с содержанием 0,01 мкг/мл готовят путем разведения основного. Хранят в
холодильнике не более 1 мес.
К методу ТСХ
Аммиак 25%-процентный водный, ГОСТ
3760-79.
Нитрат серебра, ГОСТ 1277-81.
Пластинки стандартные хроматографические
"Силуфол" и "Алюфол"
(ЧССР).
Проявляющий реагент: к раствору 0,5 г
азотнокислого серебра в 5 мл дистиллированной воды прибавляют 7 - 10 мл
25-процентного водного раствора аммиака, смесь разбавляют ацетоном до 100 мл,
хранят в темном месте.
К методу ГЖХ
Набивки для колонок:
SE-30 - 5% на хроматоне
N-AW DMDS (0,16 - 0,20 мм);
1,5% ОУ-17 + 1,95% QF-1 на хроматоне N-AW HMDS (0,125 - 0,160 мм).
Азот газообразный особой чистоты.
III. Приборы и
посуда
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Воронки химические диаметром 6 см, ГОСТ
8613-75.
Испаритель ротационный, МРТУ 42-2589-66.
Колбы конические емкостью 100 мл, ГОСТ
10394-72.
Колбы грушевидные, ГОСТ 10394-72.
Колбы мерные емкостью 100 мл, ГОСТ
1770-74.
Концентраторы (рис. 1 - не приводится).
Пипетки мерные, ГОСТ 20292-74.
Фильтродержатели.
Цилиндры мерные на 50 мл, ГОСТ 1770-74.
Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862-77.
К методу ТСХ
Камера хроматографическая.
Пульверизаторы стеклянные.
К методу ГЖХ
Хроматограф с детектором постоянной
скорости рекомбинации или детектором по захвату электронов (марки
"Цвет" или др.).
Микрошприцы на 10 мкл.
Колонки стеклянные с внутренним диаметром
3 мм длиной 1 и 2 м.
VI. Условия отбора
проб воздуха
Воздух со скоростью 1 л/мин. в течение 30
мин. аспирируют через двойной бумажный фильтр
"синяя лента" или фильтр АФА-ХА-20, закрепленный в фильтродержателе. Пробы хранят в холодильнике не более
суток.
V. Условия анализа
Измельченный бумажный фильтр помещают в
коническую колбу и заливают 20 мл ацетона, экстрагируют в течение 1 часа.
Растворитель декантируют, экстракцию повторяют, экстракты объединяют.
Объединенный экстракт, содержащий
пестицид, фильтруют в колбу для отгонки растворителя (рис. 1) через прокаленный
сернокислый натрий, помещенный в воронку, содержащую подложку из обезжиренной
ваты.
Ацетон отгоняют на ротационном испарителе
под вакуумом до объема 0,2 - 0,3 мл; оставшийся растворитель удаляют в токе
азота особой чистоты досуха; полученный "сухой" остаток немедленно
(!) растворяют в 0,5 мл гексана и анализируют методом
ГЖХ и ТСХ.
В случае использования для отбора проб
воздуха фильтров АФА-ХА-20 для экстракции используют н-гексан.
Растворитель декантируют, экстракцию повторяют. Объединенный экстракт фильтруют
через натрий сернокислый безводный в концентратор. Растворитель упаривают на
ротационном испарителе при 40 °С, затем в токе азота
особой чистоты до объема 0,5 мл и анализируют ГЖХ и ТСХ.
Определение методом
ГЖХ
Газохроматографическое определение даконила производят с детектором постоянной скорости
рекомбинации на хроматографе марки "Цвет" в условиях, приведенных в
таблице 1.
Таблица 1
УСЛОВИЯ ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ДАКОНИЛА
┌───────────────────────────────┬─────────────┬──────────────┬────────┬──────────┬───────┬───────┐
│ Характеристика │Скорость азо-│ Температура │Скорость│Шкала │Объем │Абсол. │
│ хроматографической
колонки │та (мл/мин.) │ (°С)
│диаграм-│чувствит. │аликво-│время │
├───┬─────┬─────────┬────┬──────┼────┬────────┼────┬────┬────┤мной │электро- │ты,
│удержи-│
│Ва-│Не- │
Тверд. │Дли-│Внутр.│че-
│на про- │ко- │де- │ис- │ленты │метра (а) │взятой │вания │
│ри-│подв.│ носит. │на │диам. │рез
│дувку │лон-│тек-│пар.│(мм/час)│ │для ГЖХ│(мин., │
│ант│фаза │ │(м) │ (мм) │кол.│детект.
│ки │тора│ │ │ │(мкл) │сек.)
│
├───┼─────┼─────────┼────┼──────┼────┼────────┼────┼────┼────┼────────┼──────────┼───────┼───────┤
│ │
│ │ │
│ │ │ │
│ │ │ -12│ │ │
│I │5%
│Хроматон │1 │3
│60 │160 │190 │230 │230 │240 │20 х 10 │5
│1 мин. │
│ │SE-30│N-AW │
│ │ │ │ │
│ │ │ │ │46 сек.│
│ │
│DMCS │ │
│ │ │ │
│ │ │ │ │ │
│ │ │(0,16 - │
│ │ │ │ │
│ │ │ │ │ │
│ │ │0,20 мм) │ │
│ │ │ │ │
│ │ │ │ │
│ │
│ │ │
│ │ │ │
│ │ │ -12│ │ │
│II
│1,5% │Хроматон │2 │3
│40 │160 │195 │230 │230 │240 │20 х 10 │5
│6 мин. │
│ │ОУ-17│N-AW │
│ │ │ │ │
│ │ │ │ │15 сек.│
│ │+
│HMDS │ │
│ │ │ │
│ │ │ │ │ │
│ │1,95%│(0,125
- │ │ │
│ │ │
│ │ │ │ │ │
│ │QF-1 │0,160
мм)│ │ │
│ │ │
│ │ │ │ │ │
└───┴─────┴─────────┴────┴──────┴────┴────────┴────┴────┴────┴────────┴──────────┴───────┴───────┘
Расчет концентрации препарата (мг/куб. м)
в воздухе производят по формуле:
а х V х Н
х
Х = -----------,
Н х v х V
20
где:
а - количество стандартного препарата,
введенное в хроматограф, мкг;
Н - высота пика стандартного раствора, мм;
Н -
высота пика препарата в исследуемой пробе, мм;
х
v - объем экстракта, введенный в хроматограф,
мл;
V - конечный объем анализируемого
экстракта, мл;
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным
20
условиям.
Определение методом
ТСХ
Пробу, сконцентрированную до объема 0,1 -
0,2 мл, количественно (микропипеткой или микрошприцом)
наносят на хроматографическую пластинку ("Силуфол" или "Алюфол").
Справа и слева от пробы наносят стандартные растворы даконила
(0,1, 1 и 5 мкг препарата).
Развитие хроматограмм
производят в смеси гексана с ацетоном в объемном
соотношении 4:1. После поднятия фронта растворителя на 10 см пластинку
проветривают на воздухе до полного испарения растворителя.
Подготовленные таким образом хроматографические
пластинки обрабатывают
при помощи
пульверизатора проявляющим реагентом и помещают на 7 - 10 мин. в
ультрафиолет. Зоны
локализации препарата проявляются в виде серо-черных
пятен на
белом фоне. Величина
R даконила на пластинках "Силуфол"
или
f
"Алюфол" соответственно равна 0,45 и 0,49.
Количественное определение даконила в пробе производят путем сравнения интенсивности
окраски к площади пятна пробы и стандартных растворов.
Концентрацию препарата (Х) в воздухе в
мг/куб. м вычисляют по формуле:
а х V
Х = -------,
v х V
20
где:
а - количество препарата, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;
V - общий объем пробы, мл;
v - объем пробы, взятый для хроматографирования, мл;
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным
20
условиям, л.
VI. Требования
безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила
безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими
веществами.
VII. Разработчики
ВНИИГИНТОКС, г. Киев.