Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
12 мая 1983 г. N 2781-83
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
СТОМПА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при
МСХ.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им.
Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном
санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
Стомп -
N-(1-этилпропил)-3,4-диметил-2,6-динитробензоламин.
Структурная формула:
NO
___/
2
/
\
CH _/
\_NH-CH-C H
3 \ О
/ │ 2 5
\___/ C H
/
\ 2 5
CH
NO
3
2
Эмпирическая формула C H N O
. М.м. 281,3.
13 19 3 4
В чистом виде стомп
представляет собой
оранжево-желтые кристаллы без
запаха. Растворимость
в воде 0,3 мкг/л при 20 °С.
Хорошо растворим в
органических растворителях. Т. пл. 56 - 57 °С, давление
насыщенного пара
-5
3 х 10 мм рт. ст.
при 25 °С. Устойчив в
кислой и щелочной
среде.
Выпускается в
форме концентрата эмульсии (330 г д.в. на 1 л препарата),
50% смачивающего
порошка и 33%
гранулированного препарата. Препарат
слабоядовит,
ЛД для белых крыс 2700 - 2930
мг/кг. При применении
может
50
находиться в
воздухе в виде аэрозоля.
I. Характеристика
метода
1. Определение основано на
хроматографировании стомпа на носителе с неподвижной фазой SE-30 с детектором
постоянной скорости рекомбинации (ГЖХ) и (или) в тонком слое пластинок типа
"Silufol" с последующим обнаружением зон локализации препарата по
естественной окраске пятна (ТСХ).
2. Отбор проб воздуха проводится с
концентрированием (бумажные обеззоленные фильтры "синяя лента").
3. Предел измерения в анализируемом
объеме пробы: ГЖХ - 0,25 нг, ТСХ - 0,5 мкг.
4. Предел измерения в воздухе (при отборе
1000 л): ГЖХ - 0,0005 мг/куб. м, ТСХ - 0,005 мг/куб. м.
5. Диапазон измеряемых концентраций: ГЖХ
- 0,0005 - 0,005 мг/куб. м, ТСХ - 0,005 - 0,04 г/куб. м.
6. Определению не мешают нитрофенольные
пестициды, наполнители технического препарата.
7. Граница суммарной погрешности
измерения: ГЖХ - +/- 8,5, ТСХ - +/- 15%.
8. Предельно допустимая концентрация
стомпа в воздухе не установлена.
II. Реактивы,
растворы, материалы
Стомп, х.ч.
н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
Бензол, ч.д.а., ГОСТ 5955-75.
Пластинки "Silufol" (Хемапол,
ЧССР), 15 х 15 см.
Хроматон N-AW-ДМCS (0,16 - 0,20 мм) с 5%
SE-30.
Азот газообразный особой чистоты, ГОСТ
9293-74 (в баллоне с редуктором).
Фильтры бумажные обеззоленные
("синяя лента"), диаметр 6 - 7 мм.
Стандартный раствор стомпа (основной),
содержащий 100 мкг/мм, готовят растворением 10 мг стомпа
в н-гексане в мерной колбе на 100 мл.
Стандартные растворы (рабочие),
содержащие 0,05 - 40 мкг/мл стомпа, готовят в градуированных приборах емкостью
10 мл соответствующим разбавлением н-гексаном основного стандартного раствора.
Растворы можно хранить длительное время в
склянках с пришлифованной пробкой в холодильнике.
III. Приборы и
посуда
Электроаспиратор для отбора проб воздуха,
ТУ 64-1-862-77.
Ротационный вакуумный испаритель, ИР-1М,
ТУ 25-11-917-74, или аналогичный прибор для отгонки растворителей под вакуумом.
Фильтродержатели.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-63.
Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ
10396-75.
Микрошприц на 10 мкл, ТУ 5Е 2.833.024.
Посуда лабораторная стеклянная мерная,
ГОСТ 1770-74.
Вата стеклянная.
Секундомер.
Измеритель.
Линейка.
Хроматограф "Цвет-106" с
детектором постоянной скорости рекомбинации электронов или аналогичный прибор.
IV. Условия отбора
проб воздуха
Воздух со скоростью 5 л/мин. протягивают
через бумажный обеззоленный фильтр ("синяя лента"), помещенный в
фильтродержатель. Для анализа отбирают 100 л воздуха. Срок хранения отобранных
проб - 5 суток.
V. Условия анализа
Фильтр помещают в стакан емкостью 100 мл,
заливают 15 - 20 мл н-гексана и оставляют на 10 - 15 мин. Гексановый экстракт
сливают в грушевидную колбу ротационного испарителя, тщательно отжимая фильтр
стеклянной палочкой. Эту операцию повторяют 3 - 4 раза. Растворитель испаряют
до объема 0,5 - 1,0 мл под вакуум, а затем при комнатной температуре досуха.
Сухой остаток растворяют в 1 мл н-гексана, колбу закрывают пришлифованной
пробкой, тщательно обмывают стенки колбы растворителем и анализируют методом
ГЖХ и (или) ТСХ.
Анализ методом ГЖХ
Хроматографическую колонку заполняют
хроматоном N-AW-ДМСS (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30 с применением вакуума, концы
колонки закрывают стекловатой и кондиционируют при скорости азота 60 мл/мин.
при температуре 230 °С в течение 6 часов без
подсоединения к детектору. Общую подготовку прибора проводят согласно
инструкции.
Условия определения
на хроматографе
Длина колонки - 1 м
Диаметр колонки - 3 мм
Твердый носитель хроматон N-AW-ДМСS
Жидкая фаза - SE-30 (5%)
Температура колонки - 210 °С
Температура испарителя - 200 °С
Температура детектора - 230 °С
Скорость потока азота для продувки
колонки - 60 мл/мин.
Скорость потока азота для продувки
детектора - 150 мл/мин.
Скорость диаграммной ленты самописца -
240 мм/час
-12
Рабочая шкала электрометра - 20 х 10 А
Объем вводимой пробы - 5 мкл.
Абсолютное время удерживания стомпа
составляет 3 мин. 8 сек.
Количественное определение препарата
проводят методом абсолютной калибровки по высоте пиков.
Для построения градуировочного графика в
хроматограф вводят последовательно по 5 мкл стандартных растворов стомпа с
концентрацией 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 мкг/мл (нг/мкл), измеряют высоту пиков и
вычисляют среднее арифметическое из 5-ти определений. После этого строят график
зависимости высоты пика от количества стомпа.
Концентрацию стомпа в мг/куб. м воздуха
(X) вычисляют по формуле:
G х V
1
X = -------,
V х V
20
где:
G - количество стомпа, найденное по
градуировочному графику, нг;
V -
общий объем раствора пробы, мл;
1
V - объем раствора пробы, введенный в хроматограф,
мкл;
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
20
условиям, л.
Анализ методом ТСХ
Пробу
в н-гексане, сконцентрированную до
объема 0,2 -
0,3 мл,
количественно наносят
при помощи капиллярной пипетки на стартовую линию
пластинки.
Рядом с
пробой наносят по 0,1 мл каждого рабочего стандартного
раствора стомпа,
чтобы получить шкалу с содержанием 0,5, 1,0, 2,0, 3,0,
4,0 мкг
стомпа в каждом
пятне. Пластинку помещают в хроматографическую
камеру, куда
за 10 -
15 мин. до
хроматографирования наливают
смесь
растворителей н-гексан:бензол (1:1)
в таком количестве,
чтобы глубина
погружения слоя
в растворитель составила
0,5 см. После подъема фронта
растворителя от
линии старта на
высоту 10 см
хроматографирование
прекращают. О
наличии стомпа в пробе воздуха свидетельствует появление на
хроматограмме
желтого пятна препарата с R 0,62 - 0,65.
f
Количество стомпа в пробе определяют по
площади пятна. Для этого вычисляют площадь пятна стомпа из пробы воздуха и
площадь пятна стандарта, близкого по интенсивности окраски к пятну из пробы.
Площадь пятен вычисляют аналогично вычислению площади прямоугольника, используя
в качестве сомножителей размеры пятна по вертикальной и горизонтальной оси.
Концентрацию стомпа в мг/куб. м воздуха
(X) вычисляют по формуле:
G х S
2
X = --------,
S х V
1 20
где:
G - количество стомпа
в пятне стандарта, близкого по
окраске к пятну
пробы, мкг;
S -
площадь пятна стандарта, кв. мм;
1
S -
площадь пятна пробы, кв. мм;
2
V -
объем пробы воздуха,
отобранный для анализа
и приведенной к
20
нормальным
условиям, л.
VI. Требования
безопасности
Необходимо сообщать требования
безопасности, рекомендуемые для работы с ядовитыми веществами, органическими
растворителями, сжатыми газами.
VII. Разработчики
ВНИИГИНТОКС, г. Киев.