Утверждены
Минздравом СССР
24 августа 1983 г. N 2837-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ БЕТАНАЛА (ФЕНМЕДИФАМА) В ВОДЕ, ПОЧВЕ,
САХАРНОЙ СВЕКЛЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны
И.Ш. Кофманом, Г.Ф. Насыровой (ИФР АН УССР).
Краткая
характеристика препарата. Бетанал (фенмедифам) - гербицид,
предназначенный
для обработки сахарной
свеклы. Действующее вещество -
O-[3-(метоксикарбониламино)фенил]-N-(толил-3)карбамат.
Брутто-формула
C H N O
. Молекулярная масса
303,3. Белое кристаллическое вещество,
16 16 2 4
т. пл. 143 - 144
°C. Растворимость в воде 10 мг/л, в циклогексаноле -
20, в
метаноле - 5, в хлороформе - 2, в бензоле - 0,25, в гексане - 0,05%. В воде
ПДК 0,5 мг/л,
почве - 0,25 мг/кг. В сахарной свекле МДУ 0,2 мг/кг.
Принцип метода. Метод основан на
выделении фенмедифама из проб органическим
растворителем, очистке экстрактов перераспределением, получении производного
для ГЖХ путем гидролитического расщепления фенмедифама
в 3-метиланилин и бромировании последнего, хроматографическом определении с ДЭЗ.
Метрологическая характеристика метода.
Минимальное детектируемое количество 5 нг (по бромпроизводному). Пределы определения: в воде и почве
0,005 мг/кг, в корнеплодах сахарной свеклы 0,01 мг/кг. Среднее значение
определения 72,2%. Стандартное отклонение 4,4%.
Реактивы и растворы. Ацетон
ч.д.а. Гексан ч. Этилацетат
ч.д.а. Этиленгликоль ч. Толуол ч.д.а.
Гидроксид калия ч. Гидроксид натрия х.ч., 1 н и 10 н
водные растворы. Хлороводородная кислота ч., 1
н водный раствор. Серная кислота ч.д.а., 1 н водный
раствор. Сульфат натрия безводный х.ч. Сульфит натрия
безводный ч. Бромид калия х.ч., 20-процентный раствор
в 1 н растворе серной кислоты (хранить на холоде в темной посуде). Бромат калия х.ч., 1-процентный
водный раствор (хранить в темноте). 2,4,6-Триметиланилин ч., 0,2-процентный
раствор в 1 н растворе серной кислоты (хранить на холоде в темной посуде). Азот
особой чистоты или аргон ч. Хроматон N-AW-DMCS (0,16
- 0,20 мм) с 5% SE-30 или с 5% XE-60. Стандартный раствор фенмедифама
в ацетоне 1 - 10 мкг/мл (устойчив на холоде в темной посуде не более 2 недель).
Приборы и посуда. Хроматограф типа
"Цвет" с ДПР. Колонки стеклянные длиной 1 и 2 м, диаметром 3 мм.
Ротационный испаритель. Воронки делительные на 250 мл. Колбы: конические
плоскодонные на 250 мл; круглодонные на 250 мл. Холодильники с водяным
охлаждением. Микропипетки на 0,1 мл. Микрошприц на 10
мкл.
Ход анализа. Приготовление щелочного
этиленгликоля. Растворяют 1 г гранулированного гидроксида калия в 1 мл
дистиллированной воды и доводят объем до 25 мл этиленгликолем. Проверка
2,4,6-триметиланилина на чистоту: к 10 мл 0,2-процентного раствора
2,4,6-триметиланилина в 1 н водном растворе серной кислоты прибавляют 1 мл
20-процентного раствора бромида калия и 1 мл 1-процентного раствора бромата калия. Смесь ставят в темное место на 15 мин. По
окончании бромирования избыток брома удаляют небольшим
количеством сульфита натрия, раствор подщелачивают 10 н раствором едкого натра
(около 1,5 мл) и экстрагируют 5 мл толуола. При хроматографировании
5 мкл толуольного экстракта
не должно быть пиков, близких по параметрам удерживания к бромпроизводным
3-метиланилина. В противном случае 2,4,6-триметиланилин подвергают хроматографической очистке на колонке с основной окисью
алюминия.
Экстракция и очистка экстрактов. К 150 мл
анализируемой воды приливают 15 мл 1 н раствора гидроксида натрия и фенмедифам экстрагируют этилацетатом тремя порциями по 50
мл. Этилацетатные фракции объединяют, осушают
сульфатом натрия, добавляют 1 мл этиленгликоля и упаривают на ротационном
испарителе до минимального объема.
Пробу почвы (100 г) известной влажности
или измельченную растительную массу (10 - 25 г) помещают в колбу, заливают
таким количеством ацетона, чтобы она была полностью покрыта растворителем,
присоединяют обратный холодильник и в течение 1 ч выдерживают на водяной бане
при 70 - 75 °C. После этого охлаждают и отфильтровывают. Остаток в колбе и на
фильтре дважды промывают небольшими порциями ацетона. При анализе почвы к
ацетоновому экстракту добавляют 1 мл этиленгликоля и
ацетон упаривают до минимального объема. При анализе растительных проб
объединенный ацетоновый экстракт упаривают с помощью ротационного испарителя до
50 мл, прибавляют 150 мл 1 н раствора хлороводородной
кислоты и ацетоново-кислый раствор экстрагируют тремя
порциями по 25 мл гексана. Гексановые
фракции отбрасывают. Ацетоново-кислый слой 10 н
раствором гидроокиси натрия доводят до pH 10 - 11 и фенмедифам экстрагируют трижды по 50 мл этилацетата.
Фракции органического растворителя объединяют, сушат сульфатом натрия,
добавляют 1 мл этиленгликоля и упаривают на ротационном испарителе.
Гидролиз и получение производных для ГЖХ.
К остатку после концентрирования прибавляют 1 мл щелочного
этиленгликоля, закрывают колбы пришлифованными пробками и пробы помещают в
термостат с температурой 180 °C на 15 мин. К охлажденной пробе прибавляют 10 мл
1 н раствора серной кислоты, 0,5 мл 0,2-процентного раствора
2,4,6-триметиланилина, 20-процентный раствор бромида калия и в последнюю
очередь - 1-процентный раствор бромата калия.
Соотношение объемов этих двух растворов должно быть 1:1. Обычно добавляют по
0,2 мл этих растворов, но в случае большого содержания бромирующихся
веществ объемы можно довести до 1 мл. Содержимое колб тщательно перемешивают,
колбы закрывают и помещают в темноту на 15 мин. По окончании бромирования избыток брома удаляют небольшим количеством
сульфита натрия до обесцвечивания раствора. Раствор подщелачивают 10 н
раствором гидроксида натрия (около 1,5 мл) и экстрагируют 5 мл толуола.
Аликвотную часть (2 мкл) хроматографируют.
Условия хроматографирования
на различных фазах приведены в таблице 88.
Таблица 88
УСЛОВИЯ ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ
┌───────────────────────────────────────┬────────────────┬────────────────┐
│ Параметры │ SE-30
│ XE-60 │
├───────────────────────────────────────┼────────────────┼────────────────┤
│Размеры
колонки │1 м
x 3 мм │2 м x 3 мм │
│Расход
газа-носителя, мл/мин.: │ │ │
│ через колонку │40 │40 │
│ на продувку детектора │120 │150 │
│Температура,
°C: │ │ │
│ испарителя │210 │230 │
│ термостата колонок │160 │190 │
│ термостата детекторов │210 │230 │
│Время
удерживания, мин. │7 │5 │
│Линейность
детектирования, мкг │0,005
- 3,0 │0,005 - 3,0 │
└───────────────────────────────────────┴────────────────┴────────────────┘
Обработка результатов анализа. Для
расчета проводят хроматографирование ряда стандартных
растворов фенмедифама в виде производного. Содержание
пестицида в анализируемой пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:
AH V
2 2
X = -----,
H V P
1 1
где:
A
- количество пестицида в стандартном растворе в виде
производного,
введенного в
хроматограф, мкг;
H ,
H - высоты пиков соответственного
стандартного раствора пестицида
1
2
в виде
производного и в анализируемой пробе, мм;
V -
объем экстракта, введенный в хроматограф, мл;
1
V -
общий объем экстракта для хроматографирования, мл;
2
P - масса анализируемой пробы, г.
Требования безопасности. Соблюдаются
требования безопасности, рекомендуемые при работе с пестицидами, растворителями,
химическими реактивами.