Утверждены
Минздравом СССР
24 августа 1983 г. N 2842-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДАЛАПОНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, МОРКОВИ,
ВИНОГРАДЕ И СЕМЕНАХ ХЛОПЧАТНИКА МЕТОДОМ
ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны К.Б. Баратовым,
И.И. Бабаевым (Таджикский НИИ гигиены и эпидемиологии).
Краткая характеристика препарата. Далапон - натриевая соль альфа,альфа-
дихлорпропионовой
кислоты. Брутто-формула C H O Cl . Молекулярная масса
3
4 2 2
164,9. Далапон - белый
порошок с желтоватым оттенком. Т. пл. 174 - 176 °С.
Хорошо растворим
в воде, плохо - в органических растворителях. Водные
растворы далапона быстро гидролизуются.
ДСД 0,02 мг/кг, ПДК в воде водоемов
2 мг/л, в воздухе рабочей зоны - 3 мг/куб. м, в почве - 0,5 мг/кг. МДУ в
овощах, фруктах,
винограде - 1,0 мг/кг, в
хлопковом масле - 0,1 мг/кг, в
смородине, крыжовнике,
малине - не допускается, в чае - 0,2 мг/кг, семенах
хлопчатника -
0,2 мг/кг (временный норматив).
Принцип метода. Метод основан на переводе
натриевой соли альфа,альфа-дихлорпропионовой
кислоты в альфа,альфа-дихлорпропионовую кислоту путем
подкисления водного раствора и экстракции кислоты органическим растворителем (диэтиловый эфир) с последующим определением в тонком слое
силикагеля КСК, скрепленного гипсом. Подвижный растворитель - смесь этилового
спирта с диэтиловым эфиром (1:50). Зону локализации
гербицида обнаруживают, опрыскивая пластинки раствором нитрата серебра.
Метрологическая характеристика метода
приведена в таблице 66.
Таблица 66
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ДАЛАПОНА
┌─────────────────────────┬───────────────────────────────────────────────┐
│ Параметры │ Анализируемый объект │
│
├────────┬────────┬────────┬────────┬───────────┤
│ │ вода │
почва │морковь │виноград│ семена
│
│ │ │ │ │ │хлопчатника│
├─────────────────────────┼────────┼────────┼────────┼────────┼───────────┤
│Предел
определения, │0,6 │0,5 │0,5 │0,6 │0,2 │
│мг/л,
мг/кг │ │ │ │ │ │
│Среднее
значение │91,1 │90,0 │89,6 │88,4 │87,8 │
│определения
(n = 10), % │ │ │ │ │ │
│Стандартное
отклонение, %│+/- 1,64│+/- 2,38│+/- 3,23│+/- 2,89│+/-
3,35 │
│Доверительный
интервал │+/- 7,88│+/- 8,95│+/-
7,83│+/- 6,44│+/- 12,20 │
│среднего
│ │ │ │ │ │
│(p
= 0,95, n = 5) │ │ │ │ │ │
└─────────────────────────┴────────┴────────┴────────┴────────┴───────────┘
Избирательность метода. Метод специфичен
в присутствии в пробе трихлорацетата натрия.
Реактивы и растворы. Безводный сульфат
натрия ч.д.а. Диэтиловый
эфир х.ч., перегнанный. Этиловый спирт 96-процентный,
ректиф. Кислота серная х.ч.
Ацетон ч.д.а. Хлорид натрия х.ч.
Сульфат кальция ч.д.а., прокаленный при 225 °C в
течение 5 ч. Силикагель КСК, размолотый и просеянный через сито 100 меш. Нитрат
серебра х.ч. Аммиак х.ч.,
25-процентный водный раствор. Сорбционную массу для покрытия пластинок готовят
следующим образом. Смешивают 14 г силикагеля, 1 г сульфата кальция с 50 мл
дистиллированной воды, встряхивают в течение 10 - 15 мин. и равномерно наносят
на 10 - 12 пластинок. Пластинки сушат на воздухе при комнатной температуре в
течение суток, активируют под УФ-лампой 15 мин. и
хранят в эксикаторе.
Проявляющий реагент. В мерную колбу на
250 мл помещают 2,12 г нитрата серебра, добавляют 6,3 мл аммиака, 15 мл
дистиллированной воды, 5 капель пергидроля и объем раствора доводят до метки
ацетоном. Готовый раствор необходимо хранить в темной посуде в холодильнике при
температуре 6 - 10 °C не более 6 мес.
Стандартный раствор - альфа,альфа-дихлорпропионовая кислота (х.ч.)
в смеси этилового спирта и ацетона (1:9) концентрацией 100 мкг/мл.
Приборы и посуда. Делительные воронки на
250 и 500 мл. Аппарат для встряхивания жидкости в лабораторной посуде.
Ротационный вакуумный испаритель. Водяная баня. Мерные колбы на 100 и 250 мл.
Вакуумный (водоструйный) насос. Микропипетки на 0,1 мл с ценой деления 0,001
мл. Камера для хроматографирования. Стеклянные
пластинки размером 9 x 12 см (пластинки тщательно моют и протирают ватой,
смоченной спиртом). Сито капроновое (100 меш). Пульверизатор стеклянный. Миксер
или мясорубка.
Ход анализа. Экстракция. Из измельченных
проб моркови и винограда отбирают 50 - 100 г, заливают 100 мл теплой (35 - 40
°C) дистиллированной воды и встряхивают в течение 15 мин. Затем воду
отфильтровывают, а пробы на фильтре трижды промывают теплой дистиллированной
водой порциями по 25 мл. Объединенный водный экстракт подкисляют 10 мл
5-процентного раствора серной кислоты и прибавляют хлорид натрия из расчета 30
г на 100 мл раствора. Водный экстракт охлаждают до комнатной температуры и
переносят в делительную коронку. Экстракцию гербицида проводят трехкратно диэтиловым эфиром порциями по 50 мл. Объединенные экстракты
сушат 10 г безводного сульфата натрия, переносят в прибор для отгонки
растворителей и отгоняют до объема 0,2 - 0,3 мл. Остаток растворителя удаляют
током воздуха.
Пробу воды (100 мл) помещают в
делительную воронку вместимостью 250 мл, добавляют 30 г хлорида натрия и 10 мл
5-процентного раствора серной кислоты. Гербицид экстрагируют трижды диэтиловым эфиром порциями по 50 - 75 мл. Объединенный
экстракт сушат добавлением 10 г безводного сульфата натрия, фильтруют через
бумажный фильтр в круглодонную колбу на 250 мл. Растворитель испаряют под
вакуумом.
Пробу воздушно-сухой почвы (50 г),
просеянной через сито с отверстиями 0,5 мм, помещают в колбу на 500 мл,
заливают 100 мл теплой (35 - 40 °C) дистиллированной воды и встряхивают 15 мин.
Воду отфильтровывают, а пробу на фильтре трижды промывают теплой
дистиллированной водой порциями по 25 мл. Далее экстракцию проводят так же, как
экстракцию из моркови и ягод винограда.
Семена хлопчатника измельчают в ступке,
помещают в колбу, трехкратно экстрагируют теплой (35 - 40 °C) дистиллированной
водой порциями по 60 - 70 мл. Водный экстракт объединяют, переносят в
делительную воронку или колбу на 250 мл и ставят в морозильную камеру
холодильника. Спустя 40 мин. водную фракцию экстракта осторожно выпускают
(сливают) и жир, застывший на стенках делительной воронки или колбочки,
несколько раз промывают небольшими порциями (по 10 - 15 мл) охлажденной до 4 °C
воды. Экстракцию завершают так же, как экстракцию из моркови и винограда.
Хроматографирование и
проявление хроматограмм. Сухой остаток в колбе
трехкратно ополаскивают порциями
по 0,1 мл элюата
(этиловый спирт и
диэтиловый эфир в соотношении 1:4) и наносят на пластинку,
отступив 1 см от
нижнего края.
Рядом с пробой на линию старта также наносят стандартный
раствор далапона в
различных концентрациях (от 5 до 20 мкг). Пластинку с
нанесенными
пробами и стандартными растворами помещают в хроматографическую
камеру, в
которую налито 70 мл смеси этилового спирта и диэтилового
эфира
(1:50). Когда фронт растворителя поднимется на 10 см,
пластинку вынимают и
оставляют на
несколько минут на
воздухе для испарения
подвижного
растворителя.
Затем проводят активацию сорбента путем облучения УФ-светом в
течение 10 мин. После этого пластинку опрыскивают
проявляющим реагентом и
вновь подвергают
облучению. Зоны локализации альфа,альфа-дихлорпропионовой
кислоты обнаруживаются в
виде темных пятен,
интенсивность окраски
которых зависит
от концентрации препаратов
в пробе. Величина
R
f
альфа,альфа-дихлорпропионовой
кислоты составляет 0,75 - 0,8.
Обработка результатов анализа. Количество
гербицида определяют путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен
пробы и стандарта, площадь которого наиболее близка к площади пятна пробы.
Площадь пятен измеряют планиметром или с помощью промасленной миллиметровой
бумаги. Содержание препарата в анализируемой пробе (X, мг/л, мг/кг)
рассчитывают по формуле:
AS
2
X = ---,
PS
1
где:
A - содержание препарата в стандартном
растворе, мкг;
S и
S - площади пятен соответственно стандартного
раствора и пробы,
1
2
кв. мм;
P - масса анализируемой пробы, мг.
При определении концентрации натриевой
соли альфа,альфа-дихлорпропионовой
кислоты полученный результат необходимо умножить на 1,0509 (поправочный
коэффициент на натриевую соль).
Требования безопасности. Соблюдают
правила безопасности, рекомендуемые при работе с химическими реактивами.