Утверждены
Минздравом СССР
24 августа 1983 г. N 2867-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЗООКУМАРИНА В ВОЗДУХЕ
РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая
характеристика препарата. Зоокумарин - 3-(альфа-
ацетонилбензил)-4-гидроксикумарин. Брутто-формула C
H O .
19 16 4
Молекулярная масса
308,33. Синоним - варфарин. Белое
кристаллическое вещество
с т. пл.
161 °C. Хорошо растворим в
ацетоне, диоксане; почти нерастворим в 95-процентном этиловом
спирте, эфире. Не
растворяется в воде, бензоле.
Малолетуч. В
воздухе может находиться в виде аэрозоля. В воздухе рабочей
зоны
ПДК 0,1 мг/куб.
м.
Принцип метода. Метод основан на хроматографировании зоокумарина в
тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зоны локализации препарата
путем использования реакции взаимодействия с диазотированной
сульфаниловой кислотой. Отбор проб проводят с концентрированием (фильтр
"синяя лента").
Метрологическая характеристика метода.
Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы 5 мкг; в воздухе - 0,05
мг/куб. м (при отборе 100 л воздуха). Диапазон измеряемых концентраций 0,05 -
0,4 мг/куб. м. Граница суммарной погрешности измерения +/- 13%.
Избирательность метода. Определению не
мешают другие гетероциклические соединения.
Реактивы, растворы, материалы. Зоокумарин 92-процентный. Диэтиловый
эфир х.ч. Ацетон х.ч. Этиловый
спирт 96-процентный. Бензол х.ч.
Сульфаниловая кислота ч.д.а. Гидроксид калия х.ч. Нитрит натрия ч.д.а. Хлороводородная кислота х.ч.
Карбонат натрия х.ч. Фильтры бумажные "синяя
лента". Подвижная фаза бензол - ацетон (2:1).
Проявляющий реагент: раствор 0,1 г диазотированной сульфаниловой кислоты в 20 мл
10-процентного раствора карбоната натрия. Реагент готовят непосредственно перед
анализом. Диазотированную сульфаниловую кислоту
получают следующим образом. Сульфаниловую кислоту (25 г) растворяют в 125 мл
10-процентного раствора гидроксида калия. После охлаждения раствора добавляют
100 мл 10-процентного раствора нитрита натрия. Затем полученный раствор по
каплям прибавляют к охлажденной льдом хлороводородной
кислоте (40 мл хлороводородной кислоты, уд. в. = 1,19 в 20 мл воды) так,
чтобы температура раствора не поднималась выше 8 °C. Полученную диазотированную сульфаниловую кислоту отфильтровывают,
промывают ледяной водой, этиловым спиртом, эфиром и сушат на воздухе. Реагент
хранят в темной склянке.
Стандартный раствор зоокумарина
в ацетоне концентрации 200 мкг/мл. Готовят, растворяя соответствующую навеску
препарата (с учетом действующего начала) в ацетоне в мерной колбе. Стандартный
раствор устойчив в течение месяца.
Приборы, посуда. Аспирационное устройство.
Фильтродержатели. Чашки фарфоровые диаметром 4 - 5
см. Микропипетки вместимостью 0,1; 0,2 мл с оттянутыми концами. Хроматографические пластинки "Силуфол"
размером 150 x 150 мм. Камера для хроматографирования.
Пульверизаторы стеклянные.
Условия отбора проб воздуха. Воздух со
скоростью 10 л/мин. аспирируют через фильтр
"синяя лента". Для определения 1/2 ПДК необходимо отобрать 100 л
воздуха. Срок хранения отобранных проб в сухом и темном месте неограничен.
Ход
анализа. Фильтр переносят в стаканчик, трижды промывают
небольшими порциями
ацетона (6 - 10 мл).
Фильтры отжимают
стеклянной палочкой.
Раствор сливают в
фарфоровую чашку и
упаривают на
водяной бане при температуре 50
°C до объема 0,1 -
0,2 мл,
который количественно наносят
на хроматографическую
пластинку. На
эту же пластинку наносят 0,025;
0,05; 0,1; 0,2 мл
стандартного
раствора зоокумарина, что соответствует 5, 10, 20, 40
мкг препарата.
Затем пластинку помещают
в хроматографическую
камеру, в
которую за 20 мин. до хроматографирования была налита
подвижная фаза
бензол - ацетон
(2:1). После подъема
фронта
подвижной фазы
на высоту 10 см пластинку вынимают из камеры,
оставляют на
воздухе до полного испарения
следов растворителя и
затем обрабатывают
проявляющим реагентом. При
наличии в пробе
зоокумарина на пластинке
проявляются желто-оранжевые пятна с
величиной R 0,86 +/- 0,1. Окраска пятен устойчива в
течение 24 ч.
f
Количество препарата
определяют путем измерения
площади пятен
стандартных
растворов и пробы.
Обработка результатов анализа.
Концентрацию зоокумарина в воздухе (X, мг/куб. м)
вычисляют по формуле:
GS
1
X = -----,
V S
20 2
где:
G - количество препарата, найденное в
пробе, мкг;
S ,
S - площади пятен пробы и
стандарта соответственно, кв.
1
2
мм;
V
- объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный
к
20
стандартным
условиям, л.
Требования безопасности. Соблюдать все
требования по технике безопасности при работе в химических лабораториях.