Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
24 августа 1983 г. N 2872-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
БЕНЗОИЛПРОПЭТИЛА И ЭТИЛОВОГО ЭФИРА N-3,4-ДИХЛОРФЕНИЛАЛАНИНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при
МСХ.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
COC H
/
6 5
N
│\CH(CH
)COOC H М.м. 366,3.
│ 3
2 5
// \
│
││_
\\ /
Cl
│
Cl
Бензоилпропэтил (синоним - карахол) действующее начало - N-бензоил-N-(3,4-дихлорфенил) аланин-этиловый
эфир - белое кристаллическое вещество с Т. плавления 65 - 67 °С; растворимость
при 20 °С в % масс.: в этиловом спирте - 6, метиловом спирте - 16, толуоле -
15, хлороформе - 40, ацетоне - 26.
При производстве в воздухе рабочей зоны
может находиться в виде паров и аэрозоли.
NH-CH(CH )COOC H
│ 3
2 5
// \
│
││_ М.м. 262,0.
\\ /
Cl
│
Cl
Этиловый эфир N-3,4-дихлорфенилаланина -
белое кристаллическое вещество с т. плавления 36 - 38 °С;
при температуре выше 300 °С разлагается. Растворяется в спиртах, толуоле,
м-ксилоле. Является полупродуктом в производстве бензоилпропэтила.
В воздухе может находиться в виде паров и аэрозоли.
I. Характеристика
метода
1. Определение основано на хроматографическом разделении бензоилпропэтила
и этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина в тонком слое силикагеля с
последующим обнаружением зон локализации веществ с помощью раствора
марганцовокислого калия и реактива Драгендорфа.
2. Отбор проб проводится с концентрированием
(фильтр "синяя лента" и этиловый спирт).
3. Предел измерения в анализируемом
объеме пробы - 5 мкг (для обоих веществ).
4. Предел измерения в воздухе - 1 мг/куб.
м (при отборе 5 л воздуха).
5. Диапазон измеряемых концентраций - 1 -
8 мг/куб. м.
6. Определению не мешают все
сопутствующие в производстве вещества.
7. Граница суммарной погрешности
измерения для бензоилпропэтила - +/- 15%, для
этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина - +/- 10%.
8. Предельно допустимая концентрация в
воздухе рабочей зоны: бензоилпропэтила - 5 мг/куб. м,
этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина - 4 - 5 мг/куб. м (ориентировочная,
расчетная).
II. Реактивы,
растворы, материалы
Бензоилпропэтил, 99,5-процентный
Этиловый эфир N-3,4-дихлорфенилаланина,
99,5-процентный
Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78
Ацетон, х.ч.,
ГОСТ 2603-79
Аммиак, ч.д.а.,
ГОСТ 3760-79, 25-процентный водный раствор
Эфир диэтиловый,
х.ч., ГОСТ 6262-79
Спирт этиловый, ТУ 6-09-17-10-77,
96-процентный
Калий марганцовокислый, х.ч., ГОСТ 20490-75
Висмут азотнокислый основной, ч., ГОСТ
4110-75
Кислота серная, х.ч.,
ГОСТ 4204-77
Кислота уксусная ледяная, о.с.ч., ГОСТ 18270-72
Калий йодистый, х.ч.,
ГОСТ 4232-74
Кальций сернокислый, ГОСТ 3210-77, ч.д.а.
Силикагель марки КСК
Фильтры бумажные "синяя лента",
ТУ 6-09-1678-77
Подвижная фаза: гексан
- ацетон - водный аммиак (10:5:0,8)
Проявляющий реактив N 1: 0,5 г
марганцовокислого калия растворяют в 47,5 мл воды и добавляют 2,5 мл серной
кислоты. Реактив должен быть свежеприготовленным.
Проявляющий реактив N 2 (реактив Драгендорфа): к раствору 850 мг основного азотнокислого
висмута в 40 мл воды и 10 мл уксусной кислоты прибавляют раствор 8 г калия
йодистого в 20 мл воды. Этот раствор устойчив в течение 10 суток. Для
проявления хроматограммы 1 мл этого раствора
разбавляют 2 мл уксусной кислоты и 10 мл воды. Реактив должен быть
свежеприготовленным.
Стандартные растворы бензоилпропэтила
и этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина концентрации 1000 мкг/мл готовят
растворением соответствующих навесок (в пересчете на действующее начало) в 10
мл этилового спирта. Устойчивы в течение трех суток.
III. Приборы и
посуда
Аспирационное устройство
Фильтродержатели
Поглотительные приборы Рихтера, ТУ
25-21-1081-75
Ротационный испаритель ИР-IМ, ТУ 25-11-944-74
Камера стеклянная хроматографическая,
ГОСТ 10565-75
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74
Микропипетка или стеклянный капилляр
Микрошприц емкостью 10 мкл
Колбы грушевидные для отгонки
растворителя, ГОСТ 10894-72
Стаканы химические емкостью 50 мл, ТУ
25-11-917-74
Колбы мерные, цилиндры, мензурки, ГОСТ
1770-74
Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74
Пробирки с притертыми пробками емкостью 5
мл, ГОСТ 10515-75
Пластинки для хроматографии "Силуфол", 150 х 150 мм
Пластинки для хроматографии стеклянные,
90 х 120 мм.
Стеклянную пластинку, промытую содой,
хромовой смесью и дистиллированной водой сушат и протирают этиловым спиртом.
Компоненты сорбционной массы обрабатывают следующим образом. Сернокислый
кальций сушат при температуре 150 °С в течение 6 ч и
просеивают через сито 100 мкг. Хранят в банке с притертой пробкой. Силикагель
размалывают на шаровой мельнице. Суспензию 250 г измельченного силикагеля в 2,5
л дистиллированной воды помещают в химический стакан (h = 20 см, d = 14 см). Тщательно перемешивают содержимое стакана и оставляют на 16 мин.
После этого надосадочную жидкость переливают во
второй стакан такого же размера и доливают воду до уровня 19 см. В этом стакане
суспензию отстаивают 30 мин., надосадочную жидкость
сливают в третий стакан и оставляют на 60 мин., затем переливают в четвертый
стакан и отстаивают жидкость 120 мин. Надосадочную
жидкость выливают, осадок высушивают при 130 - 140 °С
в течение суток. Стеклянные пластинки покрывают сорбционной массой. Для
приготовления сорбционной массы на 8 - 9 пластинок смешивают 14 г силикагеля, 2
г сернокислого кальция, 60 мл дистиллированной воды и перемешивают до
образования однородной массы. 2 - 3 чайных ложки массы наливают по пластинку и,
покачивая, распределяют равномерно на поверхности. Пластинки сушат 12 ч в сухом
шкафу при 100 - 110 °С. Хранят пластинки в эксикаторе.
IV. Условия отбора
проб воздуха
Воздух со скоростью 1 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные фильтродержатель с бумажным фильтром и поглотительный
прибор, содержащий 15 мл этилового спирта. Для определения 1/2 ПДК отбирают не
более 5 л воздуха. Пробы можно хранить в течение трех суток.
V. Условия анализа
Бумажный
фильтр извлекают из патрона (фильтродержателя)
и помещают в
химический стаканчик.
Промывают бумажный фильтр тремя
порциями этилового
спирта по 5 мл, собирают смыв в отгонной колбе. Туда
же сливают содержимое
поглотительного прибора.
Этиловый спирт отгоняют (ротационный испаритель,
ток воздуха)
досуха. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл диэтилового
эфира,
тщательно обмывая
стенки колбы. На
стартовую линию хроматографической
пластинки количественно наносят пробу, слева и справа
от нее наносят смеси
стандартных растворов бензоилпропэтила и
этилового эфира
N-3,4-дихлорфенилаланина,
содержащие по 5; 10; 20; 40 мкг каждого вещества.
Размер пятна
должен быть не
более 1 см. Пластинку помещают в наклонном
положении в хроматографическую
камеру, в которую
за 30 мин. до
хроматографирования был налит подвижный растворитель - гексан:ацетон:водный
аммиак (10:5:0,8) в таком количестве, чтобы
пластинка погружалась не более
чем на
0,5 см. Когда фронт растворителя поднимается на 10
см, пластинку
вынимают из
камеры и подсушивают
на воздухе в
вытяжном шкафу. Затем
пластинку опрыскивают
проявляющим реактивом N 1,
при этом обнаруживают
желтые пятна
этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина (R
0,7). Для
f
количественного
определения измеряют площадь пятна пробы и соответствующего
ему по
размеру и интенсивности
окраски пятна стандартной шкалы.
Затем
пластинку опрыскивают
проявляющим реактивом N 2. При этом проявляются
коричневые пятна бензоилпропэтила
(R 0,6). Окраска
пятен устойчива в
f
течение нескольких
минут. Для количественного
определения также измеряют
площадь соответствующего по
размеру и интенсивности
окраски пятна
стандартной
шкалы.
Концентрацию бензоилпропэтила
или N-3,4-дихлорфенилаланина этилового эфира в воздухе (Х) в мг/куб. м
вычисляют по формуле:
G х S
ст пр
Х = ---------,
S х V
ст 20
где:
G - количество вещества в пятне стандарта,
мкг;
S -
площадь пятна пробы, кв. мм;
пр
S -
площадь пятна стандарта, кв. мм;
ст
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
20
условиям, л.
VI. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
техники безопасности при работе в химических лабораториях.
VII. Разработчики
Всесоюзный научно-исследовательский
технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений (ВНИТИГ), г.
Уфа.