Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

27 апреля 1984 г. N 2993-84

 

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПАНОРАМА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И ЗЕРНЕ

МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

1. Краткая характеристика препарата

 

Действующее вещество - фенфурам: 2-метил-N-фенил-3-фуранкарбоксамид.

 

         O

       /   \  CH                        C  H  NO .

      /     \/  3                        12 11  2

      \\   //

       \\ //         ---                Мол. масса 201,2.

        ----- C-NH-//   \\

              ││   \ ___ /

              O      ---

 

Белое кристаллическое вещество. Точка плавления 110 °C. Растворимость при 20 °C: в воде - 0,1 г/л, в метаноле - 145 г/л, в ацетоне - 300 г/л. Обладает высокой термостойкостью, устойчив при нейтральных значениях pH, но гидролизуется в сильнощелочных или кислотных условиях.

    Панорам   малотоксичен   для  теплокровных  животных,  острая  оральная

токсичность ЛД   для крыс 12900 мг/кг.

              50

Панорам - протравитель семян зерновых культур в борьбе с кормовыми гнилями, пыльной и твердой головней. МДУ и ПДК панорама не установлены.

 

2. Методика определения

 

2.1. Основные положения

 

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на гидролитическом расщеплении панорама раствором серной кислоты (1:4), ацилировании ангидридом полифторкарбоновой кислоты и определении образующегося производного методом ГЖХ с электронозахватным детектором.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода (n = 5) приведена в таблице.

 

Таблица

 

┌─────────────┬─────────────┬─────────────┬────────┬───────────┬──────────┐

│Анализируемая│  Диапазон   │   Предел    │Среднее │Стандартное│Довери-   │

│    проба    │определяемых │ обнаружения │значение│отклонение,│тельный   │

│             │концентраций │(мг/л, мг/кг)│опреде- │     %     │интервал, │

│             │(мг/л, мг/кг)│             │ления, %│           │%         │

├─────────────┼─────────────┼─────────────┼────────┼───────────┼──────────┤

│Вода         │0,001 - 0,01 │0,0005       │82      │6,0        │82 +/- 7  │

│Зерно        │             │             │        │           │          │

│Почва        │0,01 - 0,1   │0,005        │80      │2,0        │80 +/- 2,5│

└─────────────┴─────────────┴─────────────┴────────┴───────────┴──────────┘

 

2.2. Реактивы и растворы

 

Ацетон осч, ТУ 6-09-3513-75.

Хлороформ фарм., ГОСТ 20015-74, перегнанный.

Спирт этиловый ректификованный, ГОСТ 5962-67.

Серная кислота концентрированная ч, ГОСТ 4203-77.

Натрий гидроокись хч, ГОСТ 4328-77, 15% раствор.

Натрий сернокислый безводный, ГОСТ 4166-76.

Кальций хлористый ч, ГОСТ 4460-77, 1% раствор.

    3-Трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовый                  ангидрид

(CF OCF CF CO) O,  Т   кип. =  112 - 114 °C, или гептафтормасляный ангидрид

   3   2  2   2

(CF CF CF CO) O, Т кип. 107 - 108 °С.

   3  2  2   2

    Азот осч, ГОСТ 9293-74, или аргон ч, высший сорт, содержание O  0,002%.

                                                                  2

Газ для отдувки (воздух, азот, гелий, аргон).

Хроматон N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм) с 5% XE-60 (ЧССР) или

Хроматон N-Супер (0,16 - 0,20 мм) с 3% OV-17 (ЧССР).

Стандартный раствор N 1 панорама в этиловом спирте с концентрацией 100 мкг/мл.

Стандартные растворы панорама с концентрациями 1,0; 2,0; 4,0 мкг/мл готовят разбавлением стандартного раствора N 1 дистиллированной водой.

 

2.3. Приборы и посуда

 

Хлороформ "Цвет-106" (или любой другой с детектором по захвату электронов).

Колонка стеклянная 1 м x 3 мм.

Ротационный испаритель вакуумный любого типа.

Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73.

Баня водяная или масляная.

Термометры электроконтактные до 100° и 150°, ГОСТ 9871-75.

Воронки делительные емкостью 100 мл, тип УШ, ГОСТ 8613-75.

Колбы круглодонные емкостью 100 мл, тип КККШ, ГОСТ 10394-72.

Колбы плоскодонные конические емкостью 100 мл и 25 мл, тип КН, ГОСТ 10394-72.

Холодильники с водяным охлаждением, тип ХПТ-КШ, ГОСТ 9499-70.

Воронки фильтрующие диаметром 20 мм, тип ВФ, ГОСТ 9775-69.

Воронки, тип 1а, ГОСТ 8613-75.

Пробирки градуированные со шлифом на 10 мл, тип ПГКШ, ГОСТ 10515-75.

Колбы мерные емкостью 50 мл, тип 1а, ГОСТ 1770-74.

Пипетки емкостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Микрошприцы на 10 мкл, МШ-10.

Индикаторная бумага универсальная, ТУ 6-09-1181-71.

Фильтры бумажные.

 

2.4. Проведение определения

 

2.4.1. Экстракция

Вода. Пробу воды объемом 100 мл дважды экстрагируют в делительной воронке хлороформом порциями по 20 мл и 10 мл при встряхивании в течение двух минут. Экстракты объединяют и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C.

Почва. Анализируемую навеску (10 г) помещают в плоскодонную коническую колбу емкостью 100 мл и приливают 30 мл экстрагента (смесь разных объемов ацетона и 1% водного раствора хлористого кальция). Встряхивают колбу на аппарате для встряхивания 30 мин., отфильтровывают экстракт через бумажный фильтр. Операцию повторяют и смывают колбу и фильтр 10 мл экстрагента. Из объединенного экстракта отгоняют ацетон на ротационном испарителе при 50 °C. Водный остаток переносят в делительную воронку, в колбу для отгонки приливают 10 мл хлороформа, энергично встряхивают несколько раз и переносят хлороформ в делительную воронку. Панорам экстрагируют в делительной воронке этим хлороформом и еще два раза порциями по 5 мл при встряхивании в течение двух минут. Экстракты объединяют и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C до 1 - 2 капель. Остаток растворителя удаляют в токе воздуха.

Зерно. Анализируемую навеску (10 г) помещают в плоскодонную коническую колбу емкостью 100 мл и приливают 15 мл этанола. Встряхивают колбу на аппарате для встряхивания 30 мин., отфильтровывают экстракт через бумажный фильтр. Промывают осадок на фильтре 5 мл этанола. Экстракт разбавляют дистиллированной водой до объема 100 мл. Водный раствор переносят в делительную воронку, приливают 20 мл хлороформа и энергично встряхивают. Хлороформ пропускают через 0,5 см слой безводного сульфата натрия. Операцию повторяют дважды, используя по 10 мл хлороформа. Экстракты объединяют и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C до 1 - 2 капель. Остаток растворителя удаляют в токе воздуха.

2.4.2. Гидролиз, получение производных для ГЖХ и количественное определение

Приливают в колбы 4,0 мл воды и 1,0 мл концентрированной серной кислоты и выдерживают 30 - 40 мин. при 120 °C с обратным холодильником. Охлаждают, смывают стенки и шлиф холодильника 5 мл воды, приливают в колбу 5 мл бензола, а затем нейтрализуют при охлаждении 15% раствором гидроокиси натрия до pH 10, контролируя по универсальной индикаторной бумаге. Закрывают колбу притертой пробкой и энергично встряхивают в течение минуты, затем переливают содержимое колбы в делительную воронку. Отделяют бензольный слой и фильтруют его через 0,5 см слой безводного сульфата натрия, засыпанного в фильтрующую воронку. Из фильтрата пипеткой отбирают 0,5 мл раствора, переносят в градуированную пробирку и прикапывают микрошприцем 2 мкл реагента-ангидрида 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовой или гептафтормасляной кислоты. Через 5 мин. помещают пробирку в стаканчик с водой комнатной температуры, растворитель и избыток реагента отдувают черев стеклянный капилляр в токе воздуха или инертного газа, не допуская сильного вспенивания, до 1 - 2 капель раствора. К остатку приливают гексан до общего объема 0,5 мл, встряхивают и вводят 5 мкл раствора в хроматограф.

 

2.5. Условия хроматографирования

 

Газ-носитель - аргон ч или азот осч.

При использовании азота осч чувствительность детектирования в 4 - 5 раз выше.

Скорость газа-носителя на продувку детектора - 150 мл/мин.

Скорость газа-носителя через колонку - 45 мл/мин.

Температура испарителя - 250 °C, термостата детектора - 250 °C, термостата колонки (XE-60) - 160 °C.

                                       -12                            -10

    Рабочая  шкала электрометра 20 x 10    А при работе с аргоном и 10    А

при работе с азотом осч.

Время удерживания (XE-60): абсолютное - 1 мин. 20 с, относительное (относительно гексахлорбензола) - 0,38.

Линейный динамический диапазон детектирования (по панораму) 0,02 - 2,0 нг.

 

2.6. Обработка результатов анализа

 

Количественное определение проводят по калибровочному графику. Для построения калибровочного графика вносят по 0,5 мл стандартного раствора, содержащего 1,0, 2,0, 4,0 мкг панорама, приливают 3,5 мл воды и 1,0 мл серной кислоты и проводят гидролиз, ацилирование, ГЖХ-анализ так, как описано выше.

Строят график зависимости H = f(C), где:

H - высота пика, мм;

C - содержание панорама в стандартном растворе, мкг.

Содержание панорама в анализируемой пробе рассчитывают по уравнению:

 

                                      A

                                  X = -,

                                      P

 

где:

X - содержание препарата в анализируемой пробе, мг/кг (мг/л);

A - количество препарата, найденное по калибровочному графику, мкг;

P - количество анализируемой пробы, г (мл).

 

3. Требования безопасности

 

Соблюдаются обычные требования по технике безопасности, применяемые при работе с органическими растворителями, кислотами и щелочами.

Работа с фторированным ангидридом проводится в вытяжном шкафу.