Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

27 апреля 1984 г. N 2998-84

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ РАМРОДА, ЛАССО И ДУАЛА В ВОДЕ, ПОЧВЕ

И РАСТИТЕЛЬНЫХ ПРОБАХ ХРОМАТОГРАФИЕЙ В ТОНКОМ СЛОЕ

 

1. Краткая характеристика препаратов

 

1.1. Рамрод

1.1.1. N-изопропил-2-хлорацетанилид - пропахлор.

1.1.2. Структурная формула (не приводится).

Мол. масса 211,69.

1.1.3. Синонимы: пропахлор, нитицид, ацилид.

1.1.4. Белое кристаллическое вещество, трудно растворимое в воде, хорошо - в бензоле, ацетоне, хлороформе, спирте, эфире, гексане. Температура плавления - 70 - 72 °C.

    Рамрод  малотоксичен  для  теплокровных. ЛД   при оральном введении для

                                               50

крыс - 1200 мг/кг, кроликов - 710 мг/кг.

Разрешен к применению в виде 65% смачивающегося порошка на капусте, луке, чесноке, брюкве, турнепсе.

МДУ в капусте и других овощах (кроме картофеля) - 0,2 мг/кг, растительных пищевых продуктах - 0,05 мг/кг. ПДК в воде - 0,01 мг/л.

1.2. Лассо

1.2.1. 2-Хлор-2',6'-диэтил-N-метоксиметилацетанилид - алахлор.

1.2.2. Структурная формула (не приводится).

Мол. масса 269,77.

1.2.3. Синонимы: алахлор, лассо, худор.

1.2.4. Белый кристаллический порошок с температурой плавления 40 - 41 °C. Трудно растворим в воде, хорошо - в ацетоне, бензоле, спирте этиловом, хлороформе, этилацетате.

Разрушается в сильных кислотах и щелочах.

    Относится  к  малотоксичным  соединениям.  ЛД    для крыс - 1200 - 1500

                                                 50

мг/кг при оральном введении.

Выпускается в виде концентрата эмульсии и гранулятов.

ПДК и МДУ не установлены.

1.3. Дуал

1.3.1. 2-Этил-6-метил-N-(1-метил-2'-метоксиэтил)-хлорацетанилидметолахлор.

1.3.2. Структурная формула (не приводится).

Мол. масса 283,80.

1.3.3. Синоним: ЦГА 24705.

1.3.4. Бесцветная жидкость с температурой кипения 100 °C. Растворимость в воде - 5 мг/л (20 °C). Хорошо растворим в большинстве органических растворителей.

Разрушается в сильных кислотах и щелочах.

    Малотоксичен для  теплокровных животных. ЛД   при оральном введении для

                                               50

крыс - 3170 мг/кг.

Разрешен для опытно-производственного применения в виде 50% концентрата эмульсии на посевах свеклы, сои, клещевины.

ПДК и МДУ не установлены.

 

2. Методика определения

 

2.1. Основные положения

 

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении гербицидов из растительных проб, почвы и воды органическим растворителем, очистке экстрактов осаждением коэкстрактивных веществ и перераспределением в системе двух несмешивающихся фаз. Количественное определение производят методом хроматографии в тонком слое. Минимально детектируемое количество - 2 - 4 мкг препаратов в анализируемой пробе. Нижний предел определения 0,02 - 0,<...> мг/кг почвы и растений, 0,02 мг/л воды.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

    P - размах варьирования, %

                        рамрод           лассо            дуал

        растения        84,6 - 92,3      89,5 - 93,7      86,0 - 91,5

        почва           93,7 - 97,3      90,1 - 96,7      92,5 - 97,5

        вода            94,5 - 98,7      92,6 - 97,8      95,5 - 99,7

 

    _

    C - среднее значение определения, %

                        рамрод           лассо            дуал

        растения        88,4             91,6             85,5

        почва           94,6             92,3             95,0

        вода            96,7             94,8             97,7

 

    _

    S - стандартное отклонение, %

                        рамрод           лассо            дуал

        растения        3,7              3,2              2,5

        почва           3,4              2,6              2,5

        вода            2,7              2,8              2,4

 

    Доверительный интервал при P = 0,95 и n = 5

                        рамрод           лассо            дуал

        растения        88,4 +/- 3,7     91,6 +/- 3,2     85,5 +/- 2,5

        почва           94,6 +/- 3,4     92,3 +/- 2,6     95,0 +/- 2,5

        вода            96,7 +/- 2,7     94,8 +/- 2,8     97,7 +/- 2,4

 

    Метод специфичен в присутствии ДДТ и линдана по R .

                                                     f

 

2.2. Реактивы и растворы

 

Хлороформ хч, ТУ 6-09-4263-76.

н-Гексан хч, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетон чда, ГОСТ 2603-79.

Бензол чда, ГОСТ 5955-75.

Натрий сернокислый безводный ч, ГОСТ 4166-76.

Аммоний хлористый хч, ГОСТ 3773-75.

Кислота ортофосфорная ч, ГОСТ 6552-78.

Пластинки "Силуфол", "Хемапол", ЧССР.

Аммиак водный 25%, ГОСТ 3760-74.

Кальций сернокислый чда, ГОСТ 3210-76.

Серебро азотнокислое хч, ГОСТ 1277-75.

Четыреххлористый углерод, ТУ 6-09-2663-77.

Стандартные растворы гербицидов в хлороформе с содержанием по д.в. 100 мкг/мл.

Коагулирующий раствор. 5 г хлористого аммония растворяют в 10 мл дистиллированной воды, приливают 10 мл 85-процентной ортофосфорной кислоты и доводят до 1 л дистиллированной водой.

Проявляющий реактив. 0,5 г азотнокислого серебра, 5 мл дистиллированной воды и 2 мл 25-процентного водного аммиака доводят в мерной колбе на 100 мл.

 

2.3. Приборы и посуда

 

Колбы конические на шлифах КШ-500 29/32 ТС, ГОСТ 10394-72.

Колбы грушевидные ОКТ-14/23 ТС, ГОСТ 10394-72.

Делительные воронки ВД-3-800, ГОСТ 8613-75.

Воронки конические, диаметр 5 см.

Колбы мерные 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.

Ротационный испаритель ИР-1M, ТУ 25-11-917-74.

Хроматографические камеры, ГОСТ 10565-74.

Микропипетки, ГОСТ 1770-74.

Лампа кварцевая ПРК-4.

Камера для опрыскивания, ГОСТ 11413-70.

Пульверизаторы, ГОСТ 10391-74.

 

2.4. Подготовка к определению

 

2.4.1. Подготовка реактивов

Органические растворители необходимо перегнать, сульфат натрия прокалить при температуре 300 - 400 °C.

2.4.2. Отбор проб

Отбор проб для анализа проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, N 2051-79 от 21.08.79.

На анализ отбирают 25 - 30 г растительной пробы, 100 г почвы и 20 мл воды.

 

2.5. Ход определения

 

2.5.1. Вода

200 мл воды в делительной воронке экстрагируют трижды по 80, 60, 50 мл хлороформом. Объединенный хлороформенный экстракт осушают сульфатом натрия б/в и отгоняют хлороформ на ротационном испарителе при температуре не выше 50 °C.

2.5.2. Почва

100 г воздушно-сухой почвы растирают в ступке и просеивают через сито. Пробу помещают в коническую колбу на 500 мл с притертой пробкой и экстрагируют гербицид на аппарате для встряхивания в течение 2 часов 100 мл хлороформа. Растворитель отфильтровывают через складчатый фильтр слоем безводного сульфата натрия. Колбу и фильтр трижды промывают хлороформом порциями по 10 - 15 мл. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе досуха при температуре не выше 50 °C.

2.5.3. Растительный материал

25 - 50 г измельченной растительной пробы экстрагируют хлороформом в течение 2 часов на аппарате для встряхивания. Экстракт отфильтровывают через слой безводного сульфата натрия. Колбу и фильтр трижды промывают хлороформом порциями по 10 - 15 мл. Объединенный экстракт отгоняют досуха на ротационном испарителе при температуре 50 °C. Сухой остаток растворяют в 3 мл охлажденного ацетона и прибавляют 25 - 30 мл охлажденной коагулирующей смеси. Колбу помещают на 30 - 40 мин. в холодильник, после чего содержимое отфильтровывают через плотный бумажный фильтр в делительную воронку. Препараты экстрагируют трижды н-гексаном порциями по 30 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сернокислым натрием и упаривают досуха при температуре не выше 50 °C.

2.5.4. Хроматографирование

К сухому остатку прибавляют 0,1 - 0,2 мл хлороформа и наносят образцы на хроматографическую пластинку "Силуфол". Стенки колбы ополаскивают несколькими каплями растворителя и наносят в центр пятна.

    Хроматографирование  проводят в системе четыреххлористый углерод - эфир

(3:2).  После этого пластинка высушивается от растворителей и опрыскивается

проявляющим реактивом. После облучения под УФ-лампой в течение 10 - 15 мин.

препараты проявляются в виде темно-серых пятен. R  рамрода - 0,42 +/- 0,03;

                                                 f

R  дуала - 0,50 +/- 0,03; R  лассо - 0,61 +/- 0,04.

 f                         f

Для дополнительной очистки можно использовать двумерную хроматографию. В качестве первой системы подвижных растворителей используется четыреххлористый углерод, а второй - смесь четыреххлористого углерода - эфира (3:2).

 

2.6. Обработка результатов анализа

 

Количественное определение производится путем сравнения интенсивности окраски и площадей пятен проб и стандартных растворов.

Содержание препаратов вычисляется по формуле:

 

                              m x S

                                   2

                          X = ------ мг/кг, мг/л,

                              A x S

                                   1

 

    где:

    m - масса препарата, нанесенного на пластинку из стандартного раствора,

мкг;

    S  - площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;

     1

    S  - площадь пятна пробы, кв. мм;

     2

    A - масса или объем пробы, взятой на анализ, г или мл.

 

2.7. Требования безопасности

 

Соблюдать правила работы с токсическими соединениями II класса опасности (гербициды), ЛВЖ (органические растворители) и УФ-светом.

2.8. При необходимости дополнительной идентификации и определения содержания лассо в количествах, меньших 0,02 - 0,04 мг/кг, используют "Временные методические указания по определению микроколичеств лассо в почве и зеленой массе кукурузы методом хроматографии в тонком слое" N 2997-84, принцип определения которых основан на гидролитическом расщеплении лассо до 2,6-диэтиланилина и детектировании последнего по реакции азосочетания с 1-нафтолом в тонком слое силикагеля.