Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
3 января 1985 г. N 3192-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
ТИОКАРБАМИНОВЫХ ПЕСТИЦИДОВ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
1. Краткая
характеристика препаратов
Краткая характеристика препаратов
приведена в таблице 1.
Таблица 1
┌─────────────────┬───────────┬───────────┬────────────┬───────────┬───────────┐
│
Название │Химическое │Температура│Раствори- │ Давление │Агрегатное │
│
пестицида, │
название │кипения, °C│мость в мг/л│насыщенных
│состояние в│
│ принятое в СССР │ │ │ │ паров, мм │воздухе
при│
│
(синонимы), │ │ │ │ рт. ст.
│применении │
│ формула,
│ │ │ │ (макс.
│ │
│
молекулярная │ │ │ │ возможн. │ │
│
масса │ │ │ │ кон-я) │ │
├─────────────────┼───────────┼───────────┼────────────┼───────────┼───────────┤
│
1 │ 2
│ 3 │ 4
│ 5 │
6 │
├─────────────────┼───────────┼───────────┼────────────┼───────────┼───────────┤
│
│ │ │ │ -3
│ │
│Эптам (ЭПТК) │S-Этил-N,N-│120 при 10 │Гексан, │35
x 10 │Аэрозоль, │
│C H
│ди-н-про- │мм рт. ст. │бензол, │при 25° │пары │
│ 3 7\
│пилтиокар- │ │ксилол, │(357 мг/ │ │
│ NCSC
H │бамат │ │метанол, │куб. м) │ │
│ / 2 5
│ │ │ацетон, │ │ │
│C H
│ │ │хлороформ, │ │ │
│ 3 7
│ │ │диэт.
эфир, │ │ │
│Мол. м.
189,32 │ │ │вода - 365 │ │ │
│
│ │ │(20 °C) │ │ │
│
│ │ │ │ │ │
│
│ │ │ │ -3│ │
│Вернолат (вернам)│N,N,S-Три- │140 при 20 │Гексан, │10,9
x 10 │Аэрозоль, │
│C H
│пропилтио- │мм рт. ст. │бензол, │при 25 °C │пары │
│ 3 7\ │карбамат │150 при 30 │метанол, │(119,4 мг/ │ │
│ NCSC
H │ │мм рт. ст. │ацетон, │куб. м) │ │
│ / ││
3 7 │ │ │хлороформ, │ │ │
│C H
O │ │ │ксилол, │ │ │
│ 3 7
│ │ │этанол, │ │ │
│Мол. м.
203,4 │ │ │вода - 90 │ │ │
│
│ │ │(20 °C) │ │ │
│
│ │ │ │ │ │
│
│ │ │ │ -3
│ │
│Молинат
(ялан, │N-Гексаме- │137 при 10 │Гексан, │5 x 10 │Аэрозоль, │
│ордрам) │тилен-S- │мм рт. ст. │ацетон, │при 25 °C │пары │
│CH CH CH │этилтио- │ │метанол, │(56 мг/ │ │
││ 2
2 2\NCSC H │карбамат │ │этанол, │куб. м) │ │
││
/ ││ 2 5│
│ │хлороформ, │ │ │
│CH CH CH O │ │ │вода - 880 │ │ │
│ 2 2
2 │ │ │(20 °C) │ │ │
│Мол. м.
187,30 │ │ │ │ │ │
│
│ │ │ │ │ │
│
│ │ │ │ -2
│ │
│Сутан (бутилат) │S-Этил-N,N-│138 при │Гексан, │3 x 10 │Аэрозоль, │
│ CH │диизобутил-│21,5
мм │этанол, │при 20 °C │пары │
│ │ 3 │тиокарбамат│рт.
ст. │метанол, │(152 мг/ │ │
│CH CHCH
│ │ │ацетон, │куб. м) │ │
│ 3 2\
│ │ │дихлорэтан, │ │ │
│
NCSC H │ │ │вода - 300 │ │ │
│CH CHCH / ││ 2 5 │ │ │ │ │ │
│ 3│ 2
O │ │ │ │ │ │
│ CH │ │ │ │ │ │
│
3 │ │ │ │ │ │
│Мол. м.
217,38 │ │ │ │ │ │
│
│ │ │ │ │ │
│
│ │ │ │ -3 │ │
│Тиллам (пебулат) │N-Бутил-
│142 при 20 │Бензол,
│4,8 x 10 │Аэрозоль, │
│C H │S-пропил-N-│мм рт. ст. │ксилол, │при 20 °C │пары │
│ 4 9\
│этилтио- │ │метанол, │
-2 │ │
│ NCSC
H │карбамат │ │ацетон, │1 x 10 │ │
│C H / ││ 3 7 │
│ │гексан, │при 25 °C │ │
│ 2 5 O
│ │ │хлороформ, │(109,4 мг/ │ │
│Мол. м.
203,18 │ │ │вода - 92 │куб. м) │ │
│
│ │ │ │ │ │
│
│ │ │ │ -3 │ │
│Циклоат (ронит) │S,N-Диэтил-│145 при 10 │Гексан, │6,2 x 10 │Аэрозоль, │
│ -- C H
│N-циклогек-│мм рт. ст. │бензол, │при 25 °C │пары │
│/ \ │2
5 │сил-тиокар-│ │ацетон, │(72,5) │ │
│\
/-NCSC H │бамат │ │метанол, │ │ │
│ -- ││ 2 5 │ │ │этанол, │ │ │
│
O │ │ │диэт.
эфир, │ │ │
│Мол. м.
215,36 │ │ │вода - 80 │ │ │
│
│ │ │(20 °C) │ │ │
└─────────────────┴───────────┴───────────┴────────────┴───────────┴───────────┘
ПДК тиокарбаминовых пестицидов в воздухе
рабочей зоны: вернолат - 5,0 мг/куб. м, молинат - 0,5 мг/куб. м, тиллам -
1,0 мг/куб. м, циклоат - 1,0 мг/куб. м, эптам - 2,0 мг/куб. м.
2. Методика
определения тиокарбаминовых пестицидов
в воздухе рабочей зоны
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на хроматографировании
смеси тиокарбаминовых пестицидов в тонком слое сорбента с последующим их
обнаружением одним из проявляющих реагентов (бромфеноловый
синий, орто-толидин, 2,6-дибром-N-оксихинонимин,2,6-дибром-N-хлорхинонимин).
Отбор проб с концентрированием.
2.1.2. Метрологическая характеристика
Предел измерения 0,5 - 5 мкг в
зависимости от проявляющего реагента (таблица 2).
Таблица 2
ПРЕДЕЛ ОБНАРУЖЕНИЯ ТИОКАРБАМИНОВЫХ ПЕСТИЦИДОВ
ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ РАЗЛИЧНЫХ ПРОЯВЛЯЮЩИХ
РЕАГЕНТОВ, МКГ
┌─────────────┬───────────────────────────────────────────────────────────┐
│ Название
│
Проявляющие реагенты
│
│ препарата
│
│
│ ├──────────────┬─────────────┬───────────────┬──────────────┤
│ │бромфеноловый
│орто-толидин │ 2,6-дибром-N- │2,6-дибром-N- │
│ │ синий
│ │ оксихинонимин │хлорхинонимин
│
├─────────────┼──────────────┼─────────────┼───────────────┼──────────────┤
│Вернолат │1 │3 │0,5 │0,5 │
│Молинат │1 │5 │1 │1 │
│Сутан │3 │3 │1 │1 │
│Тиллам │1 │3 │1 │1 │
│Циклоат │3 │5 │2 │2 │
│Эптам │3 │3 │1 │1 │
└─────────────┴──────────────┴─────────────┴───────────────┴──────────────┘
Предел измерения в воздухе при
использовании бромфенолового синего реагента: вернолат - 0,17 мг/куб. м, молинат
- 0,17 мг/куб. м, сутан - 0,5 мг/куб. м, тиллам -
0,17 мг/куб. м, циклоат - 0,5 мг/куб. м, эптам - 0,5 мг/куб. м при отборе 6 л воздуха.
Диапазон измеряемых концентраций при
отборе 6 л воздуха: вернолат 0,17 - 5,0 мг/куб. м, молинат 0,17 - 2,5 мг/куб. м, сутан 0,5 - 5,0 мг/куб. м, тиллам 0,17 - 2,5 мг/куб. м, циклоат
0,5 - 5,0 мг/куб. м, эптам 0,5 - 3,3 мг/куб. м.
Граница суммарной погрешности измерения: вернолат +/- 23%, молинат +/-
20%, сутан +/- 24%, тиллам +/- 23%, циклоат +/- 20%, эптам +/- 20%.
2.1.3. Избирательность метода
Определению вернама
и эптама могут мешать сутан и тиллам
соответственно в концентрациях 10 мкг и выше.
2.2. Реактивы,
растворы, материалы
Вернолат хч или 77,38-процентный концентрат эмульсии
(к.э.).
Молинат хч или 60% к.э.
Сутан хч или
78,2% к.э.
Тиллам хч или 76% к.э.
Циклоат хч или 72% к.э.
Эптам хч или 75% к.э.
Ацетон хч, ГОСТ
2603-79.
Хлороформ чда,
ГОСТ 20015-74.
н-Гексан ч, ТУ
6-09-3375-78.
Диэтиловый эфир хч, ГОСТ 6262-79.
Бензол хч, ГОСТ
5955-75.
Этилацетат хч,
ГОСТ 22300-76.
Бромфеноловый синий чда, ТУ
6-09-1058-76.
Серебро азотнокислое хч,
ГОСТ 1277-81, 1-процентный раствор в смеси вода - ацетон (3:1).
Калий иодистый хч, ГОСТ 4232-74.
Кислота лимонная хч,
ТУ 6-09-584-75, 2-процентный раствор.
Кислота серная хч,
ГОСТ 4204-77, 10-процентный раствор.
Кислота уксусная хч,
ГОСТ 18290-72, 5-процентный раствор.
Калий марганцовокислый хч, ГОСТ 20490-75.
Орто-толидин хч, ТУ 6-09-2232-75.
2,6-Дибром-N-оксихинонимин
хч.
2,6-Дибром-N-хлорхинонимин
хч.
Проявляющие реагенты:
N 1. Бромфеноловый
синий. 0,05 г бромфенолового синего растворяют в 10
мл ацетона. Полученный раствор разбавляют до 100 мл 1-процентным раствором
азотнокислого серебра. Хранят в темном прохладном месте 7 - 10 дней.
N 2. Орто-толидин.
0,16 г о-толидина растворяют в 30 мл ледяной уксусной
кислоты, доводят дистиллированной водой до 500 мл и прибавляют 1 г иодистого калия. Хранят в холодильнике в течение 2 недель.
N 3. 0,5-процентный раствор 2,6-дибром-N-оксихинонимина в н-гексане.
Хранят в холодильнике.
N 4. 0,5-процентный раствор 2,6-дибром-N-хлорхинонимина в н-гексане.
Хранят в холодильнике.
Хроматографические пластинки "Силуфол", размер 15 x
15 см.
Фильтры бумажные беззольные "синяя
лента", ТУ 6-09-1678-77.
Фильтры АФА-ХА-18.
Пенополиуретан эластичный бесцветный, ТУ 6-05-1688-79 или ОСТ 6-05-407-75, очищают
ацетоном в течение 12 ч и хлороформом 12 ч в аппарате Сокслета,
режут на кусочки размером 2 - 3 мм и 5 - 6 мм. Хранят в склянке с притертой
пробкой.
Подвижные фазы:
N 1. Гексан - диэтиловый эфир (4:1) для анализа смеси вернолат
+ сутан + циклоат + молинат
+ эптам (тиллам).
N 2. Гексан -
этилацетат (4:1) и N 3. Гексан - бензол - диэтиловый эфир (4:4:1) для анализа смеси вернолат + сутан.
N 4. Гексан -
эфир (1:1) для анализа смеси тиллам + циклоат + эптам.
Стандартные растворы тиокарбаминовых
пестицидов в ацетоне, хлороформе, н-гексане с
содержанием 1000 и 100 мкг/мл по действующему началу. Хранят в холодильнике в
течение 2 - 3 месяцев.
2.3. Приборы и
посуда
Аспирационное устройство.
Фильтродержатели.
Аппарат для встряхивания АВУ-6с, ТУ
64-1-2451-78.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ
25-11-917-76, с набором колб.
Денситометр БИАН-170.
Аппарат Сокслета.
Шкаф сушильный.
Посуда стеклянная мерная, ГОСТ 1770-74.
Пипетки, микропипетки, ГОСТ 20292-74.
Камера хроматографическая,
ГОСТ 10565-75.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74.
Поглотитель с пористой пластинкой N 2.
Поглотительные трубки для отбора пробы
воздуха (пары), стеклянные, гофрированные (диаметр шарика 10 мм), общей длиной
5 см. Наполняют кусочками пенополиуретана размером 2
- 3 мм, а по торцам 5 - 6 мм. Хранят закрытыми заглушками с обеих сторон.
Камера для хлорирования. На дно камеры
(можно использовать эксикатор) помещают чашку Петри с марганцовокислым калием
(5 г) и наливают в нее 12 - 16 мл концентрированной соляной кислоты. Камера
готова к использованию через 10 мин.
2.4. Отбор проб
Воздух, содержащий тиокарбаминовые
пестициды в виде аэрозоля и паров, со скоростью до 2 л/мин. протягивают через
комбинированный поглотитель, состоящий из фильтра ("синяя лента" или
АФА-ХА) и последовательно с ним соединенной поглотительной трубки с пенополиуретаном (или жидким поглотителем с 5 мл ацетона
или гексана). Для определения смеси тиокарбаминовых
пестицидов на уровне 1/2 ПДК следует отобрать 6 л воздуха. Пробу можно хранить
в холодильнике в склянке с притертой пробкой 2 - 3 дня.
2.5. Проведение
определения
2.5.1. Подготовка проб к анализу
Фильтр с пробой помещают в склянку с
притертой пробкой, заливают 10 мл ацетона (фильтр "синяя лента") или гексана (АФА-ХА) и оставляют на 60 мин. или встряхивают 15
- 20 мин. Затем растворитель сливают, пестициды экстрагируют еще дважды,
используя по 5 - 6 мл растворителя, в течение 15 минут (или встряхивают 5
мин.). Экстракты объединяют. Измеряют общий объем, если для анализа берут
аликвотную часть. Если же анализируют весь объем растворителя (экстракта), то
вносят его в колбу отгонного аппарата и отгоняют при небольшом вакууме до 0,2 -
0,3 мл.
Пенополиуретан из поглотительной трубки переносят в склянку с притертой пробкой,
заливают 15 мл хлороформа и оставляют на 15 мин. Затем тщательно отжимают на
стеклянной воронке. Промывают еще раз 5 - 6 мл хлороформа. Объединяют промывную
порцию с хлороформенным экстрактом. Хлороформ
отгоняют до объема раствора 0,2 - 0,3 мл.
2.5.2. Хроматографирование
Сконцентрированный экстракт пробы (0,2 -
0,3 мл) количественно наносят на хроматографическую
пластинку. Слева от пробы наносят смесь стандартных растворов исследуемых
пестицидов, содержащую по 5 мкг каждого пестицида, справа - индивидуальные
вещества, которые предположительно могут быть в смеси, в концентрации от 1 до
25 мкг. Зависимость интенсивности окрашивания пятен при использовании,
например, проявляющего реагента N 1 соблюдается в интервале концентраций: вернолат 1 - 30 мкг, сутан 3 - 30 мкг, тиллам
1 - 15 мкг, эптам 3 - 20 мкг, молинат
1 - 15 мкг, циклоат 3 - 30 мкг.
Помещают пластинку в хроматографическую
камеру, куда предварительно наливают одну из подвижных фаз (N 1, 2, 3, 4) за 15
- 20 мин. до хроматографирования. После того как
фронт растворителя достигнет высоты 10 см, пластинку извлекают и оставляют в
вытяжном шкафу для улетучивания следов подвижной фазы.
2.5.3. Проявление хроматограммы
1.
Пластинку опрыскивают проявляющим реагентом (ПР)
N 1, нагревают в
сушильном шкафу 15
мин. при температуре
65 - 80 °C. После
охлаждения
обрабатывают 2-процентным
раствором лимонной кислоты
или 5-процентным
раствором уксусной
кислоты. На желтом фоне проявляются пятна пестицида,
окрашенные в синий цвет. Величина R пестицидов в подвижной фазе N 1: сутан
f
- 0,87, вернолат -
0,82, циклоат
- 0,74, молинат
- 0,54,
эптам - 0,50,
тиллам - 0,47;
в подвижной фазе N 2: сутан - 0,87, вернолат - 0,82;
в подвижной фазе N 3: сутан - 0,69, вернолат - 0,62;
в подвижной фазе N 4: циклоат
- 0,57, эптам - 0,45, тиллам
- 0,40.
2. Пластинку помещают в камеру для
хлорирования на 15 с, затем выветривают до полного исчезновения запаха хлора
(при контрольной обработке уголка пластинки ПР N 2 фон
не должен синеть). Опрыскивают ПР N 2. На светлом фоне
проявляются синие пятна пестицидов.
3. Пластинку опрыскивают ПР N 3 или N 4 и помещают в термостат (сушильный шкаф) при
температуре 110 °C на 3 - 5 мин. Пестициды проявляются в виде желтых пятен на
белом фоне.
2.5.4. Обработка результатов анализа
На хроматограмме
пробы измеряют площади пятен пестицидов с помощью миллиметровой промасленной
бумаги или планиметра, а также площади тех пятен на хроматограмме
стандартов, которые по своей величине наиболее близки к пятнам пробы.
Концентрацию пестицидов в воздухе (X, мг/куб. м) рассчитывают по формуле:
C x V x S
X = -------------,
V x S x V
1 1
20
где:
C
- концентрация пестицида
в хроматографируемом объеме стандартного
раствора, мкг;
S -
площадь пятна пестицида на хроматограмме стандарта,
кв. мм;
1
S - площадь пятна пестицида на хроматограмме пробы, кв. мм;
V - общий объем анализируемого раствора,
мл;
V - хроматографируемый объем пробы, мл;
1
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
20
условиям, л.
Полученные
результаты при анализе
фильтра и поглотительной трубки
(поглотителя)
суммируются.
Концентрацию пестицидов в пробе можно
определить с помощью денситометра
БИАН-170. Для этого снимают электрофореграммы
стандартных растворов после
хроматографирования
и проявления индивидуальных
веществ, измеряют площади
пиков и строят градуировочные
графики зависимости "площадь - концентрация"
(см. выше
интервал концентраций). Затем
снимают электрофореграмму пробы,
идентифицируют индивидуальные вещества
по R и по графикам
определяют
f
концентрацию каждого
компонента смеси. Для каждого ПР устанавливают свой
светофильтр. Далее
по формуле рассчитывают
концентрацию пестицидов в
воздухе (X, мг/куб. м):
G x V
X = --------,
V x V
1 20
где:
G - количество пестицида, найденное по
графику, мкг;
V - общий объем анализируемого раствора,
мл;
V - хроматографируемый объем пробы, мл;
1
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
20
условиям, л.
3. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима
и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах
санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР, N 2455-81 от 20.10.81.