Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
3 января 1985 г. N 3200-85
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СОНАЛЕНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И ЗЕЛЕНОЙ
МАССЕ СОИ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
1. Краткая
характеристика препарата
1.1. Сонален.
1.1.1. 2,6-динитро-4-трифторметил-N-этил-N-(2-метил-2-пропенил)-анилин.
1.2. Структурная формула:
CF
│ 3
/ \
│ O │ Мол. масса 333,26.
/ \ / \
O N
│ N O
2
│ 2
CH =C-CH -N-C H
2 │ 2 2 5
CH
3
1.3. Кристаллическое вещество желтого
цвета. Растворимость в воде - 0,2 мг/л при 25 °С. Хорошо растворимо в жирах,
органических растворителях, в том числе в ацетоне, ацетонитриле,
хлороформе, метаноле, метиленхлориде, ксилоле,
бензоле.
Малотоксичен для
теплокровных. ЛД - более 2000 мг/кг.
50
Применяется для борьбы с сорной
растительностью на посевах сои и хлопчатника.
ДОК и ПДК не установлены.
2. Методика
определения
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода.
Метод основан на извлечении соналена из воды и растительных проб гексаном,
а из почвы - смесью гексан - ацетон (2:1). Экстракты
обрабатывают концентрированной серной кислотой, в которую переходит сонален. При разведении кислоты водой в 30 раз и
последующей переходит в дистиллят, из которого его извлекают гексаном. Количественное определение проводят с помощью газовой
и/или тонкослойной хроматографии.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода.
Предел
обнаружения: в воде - 0,001 мг/л (ГЖХ); 0,005 мг/л (ТСХ)
в почве - 0,002 мг/кг
(ГЖХ); 0,01 мг/кг (ТСХ)
в зеленой массе - 0,01
мг/кг (ГЖХ); 0,05 мг/кг (ТСХ).
Р - размах варьирования, %
84,6 - 93,2 в воде
79,5 - 87,4 в
почве
_ 76,7 - 82,7 в
зеленой массе
с - среднее значение определения, %
89,0 - в воде
83,5 - в почве
79,7 - в зеленой
массе
S - стандартное
отклонение, %
4,4 - в воде
4,1 - в почве
3,0 - в зеленой массе
2.1.3. Метод специфичен в присутствии ДДТ
и линдана по времени удерживания и величине.
Определению мешает наличие в пробах трефлана.
2.2. Реактивы и
растворы
н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
Ацетон, ч.д.а.,
ГОСТ 2603-79.
Кислота серная, х.ч.,
удельный вес 1,84, ГОСТ 4204-76.
Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ
4166-76.
Стандартные растворы соналена
с концентрацией 0,2 - 2,0 мкг/мл.
2.3. Приборы и
посуда
Газовый хроматограф серии Цвет-100,
оснащенный детектором постоянной скорости рекомбинации, или аналог.
Пластинки для тонкослойной хроматографии
"Силуфол".
Колбы грушевидные на шлифах КШ 50 29-32
ТС, ГОСТ 10394-72.
Колбы конические на шлифах КШ 50 29-32
ТС, ГОСТ 10394-72.
Делительные воронки ВД-3-500, ГОСТ
8613-75.
Воронки конические, диаметр 5 см, ГОСТ
8613-81.
Колбы мерные 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ
64-1-1081-73.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ
25-11-917-74.
Хроматографические камеры, ГОСТ 10565-75.
Микропипетки, ГОСТ 1770-74.
Лампа кварцевая ПРК-4, ТУ 16-535-280-74.
Камеры для опрыскивания, ТУ 25-11-430-70.
Пульверизаторы, ГОСТ 10391-74.
Прибор для перегонки с водяным паром.
Микрошприцы МШ-10М, ТУ 2.833.106.
2.4. Подготовка к
определению
Органические растворители необходимо
перегнать, сульфат натрия безводный прокалить при температуре 300 °С.
2.4.1. Отбор проб.
Отбор проб для анализа проводят в
соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб
сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды
для определения микроколичеств пестицидов",
утвержденными Заместителем Главного государственного врача СССР, N 2051-79 от
21.08.79.
Для анализа отбирают 20 г растительной
пробы, 100 г почвы и 200 мл воды.
2.5. Ход определения
2.5.1. Вода.
200 мл воды в делительной воронке
экстрагируют трижды по 50 мл гексана. Собирают гексановый экстракт. Далее - по п. 2.5.4.
2.5.2. Почва.
100 г воздушно-сухой почвы растирают в
ступке и просеивают через сито. Пробу помещают в коническую колбу на 500 мл с
притертой пробкой и экстрагируют гербицид на аппарате для встряхивания в
течение 3 - 5 часов 200 мл смеси ацетон - гексан
(1:2). Растворитель отфильтровывают, колбу промывают трижды по 10 - 15 мл гексана. К объединенному экстракту прибавляют 200 мл воды и
верхний гексановый слой отделяют в делительной
воронке. Далее - по п. 2.5.4.
2.5.3. Зеленая масса сои.
20 г измельченной растительной пробы
экстрагируют гексаном на аппарате для встряхивания в
течение 3 - 5 часов в конической колбе с притертой пробкой, используя 100 - 150
мл растворителя. Растворитель отфильтровывают, колбу промывают трижды по 10 -
15 мл гексана и собирают гексановые
фракции. Далее - по п. 2.5.4.
2.5.4. Перераспределение с
концентрированной серной кислотой.
К объединенному гексановому
экстракту добавляют 5 мл концентрированной серной кислоты и в течение 1 мин.
встряхивают с осторожностью в делительной воронке. После этого нижнюю
сернокислотную фазу переносят в дистиллированную воду, объем которой 150 - 200
мл. Полученный таким образом кислый раствор присоединяют к прибору для
перегонки с водяным паром.
2.5.5. Перегонка с водяным паром.
Включают нагрев и собирают 50 - 70 мл
дистиллята. Препарат экстрагируют из дистиллята трижды по 10 мл гексана. Гексановую фазу
объединяют, осушают над безводным сульфатом натрия и упаривают на ротационном
испарителе при температуре не выше 35 °С до объема 3 -
5 мл.
2.5.6. Определение методом газовой
хроматографии.
Условия хроматографического
разделения:
- стеклянная колонка 2 м х 3 мм с 5% OV-225 на Хроматоне супер (0,16 -
0,20 мм);
- температура: термостата колонок - 190 °С
термостата детекторов - 250 °С
испарителя - 250 °С;
- расход газа-носителя (аргон ОСЧ или
высшего сорта) - 60 мл/мин. через
колонку и 180
мл/мин. - на поддувку;
-12
- рабочая шкала ИМТ-05 - 10 х 10 А;
- линейный динамический диапазон 0,04 - 4,0
нг;
- время удерживания - 3 мин.
2.5.7. Определение методом тонкослойной
хроматографии.
Очищенный экстракт, полученный по п. 2.5.5,
упаривают в токе воздуха до
0,5 -
1,0 мл и
количественно переносят на
пластинку "Силуфол".
Хроматографирование проводят
в системе гексан
- ацетон (4:1). Препарат
определяют
визуально по желтой окраске в соответствии с R
= 0,7.
f
2.6. Обработка
результатов анализа
Содержание препарата при использовании
метода ГЖХ вычисляется по формуле:
Н х V
Х = ----------,
К х V х Р
a
где:
Х - содержание гербицида, мг/кг или мг/л;
Н - высота пика, мм;
К - калибровочный коэффициент, мм/нг;
V - объем анализируемой пробы, мл;
V -
объем вводимой в хроматограф аликвоты,
мкл;
a
Р - навеска, г или
мл.
Содержание
препарата при использовании
метода ТСХ вычисляется
по
формуле:
m х S
2
Х = ------,
Р х S
1
где:
m - масса препарата, нанесенного на
пластинку из стандартного раствора,
мкг;
S -
площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;
2
S -
площадь пятна пробы, кв. мм;
1
Р - масса или
объем пробы, взятой на анализ, г или мл;
Х - содержание гербицида в анализируемой
пробе, мкг/г, мг/кг или мг/л.
3. Требования
безопасности
Необходимо соблюдать правила работы с
токсическими соединениями II класса токсичности (гербициды), ЛВЖ (органические
растворители) и с сжатыми газами (аргон под
давлением).
4. Разработчики
Настоящие Методические указания
подготовлены И.Ш. Кофманом и А.А. Дубровской,
Институт физиологии растений АН УССР, г. Киев.
5. Методика апробирована во ВНИИГИНТОКС
(Гиренко Д.Б.) и ВНИИ эфиромасличных культур (Баранов Ю.С., Хилик
Л.А.).