Утверждены
Минздравом СССР
12 апреля 1985 г. N 3251-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ГИДРАЗИДА МАЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ В ТАБАКЕ
ФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ
Краткая
характеристика препарата. Гидразид малеиновой
кислоты
(ГМК) -
3-гидроксипиридазинон-6.
Брутто-формула C H N O .
4 4 2 2
Молекулярная масса 112,03. Белое кристаллическое вещество,
т. пл.
296 -
298 °C. Растворимость
в воде при 25
°C - 0,6%, в
диметилформамиде - 2,4%. Растворимость в 1 л воды: натриевой соли
- 200 г; калиевой - 400; диэтиламиновой - 700 г.
ДСД 0,03 мг/кг.
МДУ в табаке 8,0
мг/кг.
В зависимости от концентрации применяется
для борьбы с заразихой и для пасынкования табака.
Выпускается в виде натриевой, калиевой и диэтиламиновой
соли ГМК.
Принцип метода. Методика основана на
измерении оптической плотности продукта взаимодействия сернокислого гидразина с
п-диметиламинобензальдегидом при длине волны 455 нм после восстановления малеинового гидразида
до янтарного гидразида, его гидролиза и отгонки
освобожденного гидразина в раствор серной кислоты, очистки дистиллята
активированным углем и концентрирования.
Метрологическая характеристика метода.
Минимально определяемое количество ГМК при p = 0,95 равно 3,48 мкг. Метод
характеризуется среднеквадратичной ошибкой определения 3,18 - 5,14 мкг (p =
0,95, n = 24).
Реактивы и материалы. Пара-диметиламинобензальдегид (п-ДМАБА), 1,5-процентный раствор
в 1 н серной кислоты. Реактив устойчив в течение месяца при хранении в темноте,
в противном случае его необходимо готовить ежедневно.
Предварительно п-ДМАБА очищают по
следующей схеме: 20 г п-ДМАБА растворяют в 150 мл этанола, добавляют 4 г
активированного угля, перемешивают в течение 5 мин. и фильтруют под вакуумом
через воронку Бюхнера. К фильтрату постепенно, при
перемешивании добавляют 200 мл холодной (0 °C) дистиллированной воды и выпавшие
белые кристаллы отфильтровывают под вакуумом, промывают 50 мл холодной воды и
сушат в вакуум-эксикаторе над концентрированной серной
кислотой. Хранят реактив в темной склянке в защищенном от света месте.
Железо двухлористое х.ч.
Азотная кислота - 30-процентный раствор. Цинк металлический х.ч.,
стружка. Гидроксид натрия х.ч. 40-процентный раствор.
Активированный уголь марки ОУ-А.
Предварительно уголь очищают следующим
образом: к 200 г активированного угля приливают 1 л водного раствора хлороводородной кислоты (1:9), смесь нагревают до кипения и
фильтруют под вакуумом через бумажный фильтр. Уголь на фильтре промывают
дистиллированной водой до нейтральной реакции по индикаторной бумаге и сушат в
сушильном шкафу при 110 °C в течение 5 ч при перемешивании.
Для приготовления стандартных растворов
ГМК в мерной колбе на 500 мл растворяют 100 мг ГМК в 50 мл воды, содержащей 0,4
г гидроксида натрия. Раствор доводят до метки дистиллированной водой. В мерные
колбы на 200 мл отбирают по 10, 20, 30, 40 мл этого раствора и доводят до метки
водой. Эти растворы содержат соответственно 10, 20, 30, 40 мкг в 1 мл раствора.
Кристаллический гидразид малеиновой кислоты х.ч. Хлороводородная кислота х.ч. Серная кислота х.ч.,
концентрированная, 1 н. Этиловый спирт-ректиф. Ацетон
х.ч. Универсальная индикаторная бумага. Нитрат калия
ч. 53-процентный водный раствор. Нитрат натрия ч. 7-процентный водный раствор.
Нитрит натрия ч. 40-процентный водный раствор. Солевую баню готовят из
7-процентного нитрата натрия, 40-процентного нитрита натрия, 53-процентного
нитрата калия (т. пл. 142 °C).
Приборы, аппаратура, посуда.
Спектрофотометр СФ-16 или другой марки, позволяющий проводить измерения в
видимой области спектра. Установка для перегонки с водяным паром (рис. 11 - не
приводится). Колбы: плоскодонные на 250, 500, 2000 мл; мерные на 25, 50, 100,
200, 500 мл; Бунзена; длинногорлые круглодонные со шлифом на 500 мл;
круглодонные со шлифом на 100 мл. Стаканы химические на 250 мл. Термометр
ртутный на 200 °C. Мензурки на 100 мл. Цилиндр мерный на 100, 250, 1000 мл.
Пипетки на 1, 10 мл. Вакуум-эксикатор. Воронки Бюхнера;
химические диаметром 35, 75 мм. Электроплитки. Насадка склянки для промывания
газов СН 2-50. Ротационный вакуумный испаритель. Фильтры бумажные с синей
полосой. Баня водяная.
Построение градуировочного
графика. Способ построения градуировочного графика
зависит от наличия необработанного (контрольного) образца табака. При
отсутствии контрольного образца градуировочный график
строят следующим образом: к 4 - 5 навескам табака, содержащего на основании
предварительных определений наименьшее количество ГМК, приливают соответственно
по 1 мл раствора, содержащего 10, 20, 30, 40 мкг ГМК. Навески табака с
добавками ГМК, а также без добавки анализируют так же, как пробу.
На
основании полученных данных
в координатах Y aX строят
1
экспериментальный градуировочный график. После экстраполяции его
до пересечения с продолжением оси абсцисс
получают рабочий график
в координатах Y 0X. Отрезок 0а разбивают в том
же масштабе, что и
2
ось аХ. При
наличии контрольного образца
табака градуировочный
график строят в
координатах Y 0X (рис. 12 - не приводится).
2
Ход анализа. Исследуемый образец (1 г)
помещают в дистилляционную колбу установки для перегонки с водяным паром (см.
рис. 11), добавляют 50 мл раствора щелочи и погружают колбу в солевую баню,
нагретую до 165 °C. Содержимое колбы кипятят в течение 10 - 15 мин., охлаждают
5 мин., добавляют 0,5 г хлорида железа, 15 г цинковой стружки и присоединяют
колбу к установке для перегонки с водяным паром. Отгонку ведут при температуре
солевой бани 175 °C. Приемником служит мензурка, содержащая 4 мл 1 н раствора
серной кислоты. Подачу пара регулируют так, чтобы за 20 мин. в приемнике
собралось 100 мл дистиллята. К полученному дистилляту добавляют 2 г
активированного угля, перемешивают 1 мин. и фильтруют через складчатый фильтр.
Осадок на фильтре промывают водой (5 - 10 мл), выпаривают фильтрат на
ротационном вакуумном испарителе или электроплитке до 6 мл. Охлажденный
концентрат количественно переносят в мерную колбу на 25 мл, добавляют 6 мл
раствора п-ДМАБА, доводят водой до метки, тщательно перемешивают и оставляют в
темноте на 20 мин.
Экстракцию раствора измеряют на
спектрофотометре при 455 нм по отношению к раствору
п-ДМАБА, разбавленного водой до 25 мл. Количество ГМК определяют по градуировочному графику.
Обработка результатов анализа. Содержание
остаточных количеств ГМК в анализируемой пробе (X, мг/кг) вычисляют как среднее
из трех параллельных определений. Результаты анализа рассчитывают по формуле:
100A
X = -----------,
(100 - B) P
где:
A - количество ГМК, определенное по
калибровочному графику, мкг;
P - навеска табака или масса сгоревшего
табака, г;
B - влажность табака, %.
Требования безопасности. Необходимо
соблюдать правила безопасности при работе с органическими растворителями и
токсичными веществами; регулярно проверять дистилляционные колбы, так как из-за
использования концентрированного раствора щелочи срок их использования
ограничен. Каждый раз после окончания дистилляции необходимо содержимое колбы
выливать с остатками цинковой стружки в отдельный резервуар, а колбу трижды
промывать 30-процентным раствором азотной кислоты для полного удаления
каустических и цинковых остатков, а затем трижды водой.