Утверждены
Минздравом СССР
12 апреля 1985 г. N 3253-85
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЛЕНТАГРАНА В КУКУРУЗЕ, ПОЧВЕ И ВОДЕ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая
характеристика препарата. Лентагран - S-октил-O-(3-
фенил-6-хлорпиридазинил-4)тиокарбонат. Брутто-формула
C H ClN O S.
Молекулярная масса 278,9.
Общепринятое название -
19 23
2 2
пиридат.
Химически чистое соединение
- белое кристаллическое
вещество с
т. пл. 27 °C.
Растворимость в воде 90 мг/л. Хорошо
растворяется в
большинстве органических растворителей. Выпускается
в форме
смачивающихся порошков,
содержащих различные количества
действующего
вещества. ДСД 0,08 <*> мг/кг; МДУ в кукурузе 0,05 <*>
мг/кг.
--------------------------------
<*> Временный норматив.
Принцип метода. Метод основан на
извлечении лентаграна из растительных проб, почвы и
воды органическим растворителем (ацетон, н-гексан),
очистке экстрактов путем перераспределения между двумя несмешивающимися
жидкостями. Количественно определяют методом ТСХ.
Метрологическая характеристика метода.
Минимально детектируемое количество 2 мкг. Нижний предел определения: вода -
0,01 мг/л; почва - 0,02 мг/кг; кукуруза - 0,05 мг/кг. Среднее значение
определения, %: в растениях - 78,6; почве - 87,5; воде
- 89,5. Стандартное отклонение, %: в растениях - +/-
9,0; почве - +/- 8,7; воде - +/- 7,9. Доверительный интервал среднего при p =
0,95 и n = 5%: для растений - +/- 9,0; почвы - +/- 8,7; воды - +/- 7,9.
Избирательность метода. Метод специфичен,
другие соединения в данных условиях хроматографирования
определению не мешают.
Реактивы и растворы. Ацетон
х.ч. Аммиак ч.д.а. Ацетонитрил ч. Нитрат висмута ч.д.а.
Иодид калия х.ч. н-Гексан.
Сульфат натрия безводный ч.д.а. Хлорид натрия ч.д.а. Силикагель для хроматографии ЛС 5/40. Сульфат
кальция ч.д.а. Серная кислота х.ч.
Дистиллированная вода. Стандартный раствор лентаграна
в ацетоне концентрацией 100 мкг/мл. Нитрат серебра ч. Проявляющие реагенты: N 1
- реактив Драгендорфа. Растворяют 1,5 г нитрата
висмута и 7,5 г иодида калия в 100 мл 2-процентной серной кислоты; N 2 - 0,5 г
нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, добавляют 7 мл аммиака
и доводят ацетоном до 100 мл.
Приборы и посуда. Аппарат для
встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель. Прибор для облучения УФ-светом с лампой ПРК-4. Пульверизатор стеклянный. Камера
для опрыскивания. Камера хроматографическая. Воронки
химические: делительные на 250 - 500 мл. Колбы: конические со шлифом и пробками
на 250 - 500 мл; круглодонные со шлифом на 100 - 250 мл. Пипетки на 0,1 мл.
Цилиндры мерные на 50, 100 мл.
Приготовление хроматографических
пластинок. Стеклянные пластинки размером 9 x 12 см тщательно моют. В ступке
смешивают 3,5 г силикагеля с 1,5 г сульфата кальция, добавляют 30 мл
дистиллированной воды, хорошо перемешивают и равномерно наносят на 5 пластинок.
Сушат их 17 - 18 ч при комнатной температуре, затем в сушильном шкафу 20 мин.
при температуре 170 - 180 °C и хранят в эксикаторе над слоем осушителя.
Ход анализа. Экстракция и очистка
экстрактов. Пробу воды (200 мл) помещают в делительную воронку и добавляют 10 -
15 г хлорида натрия. Лентагран экстрагируют тремя
порциями н-гексана по 50 мл каждый раз в течение 5
мин. Объединенный экстракт фильтруют над слоем безводного сульфата натрия.
Растворитель отгоняют на ротационном испарителе до 0,2 - 0,3 мл при температуре
воды в бане около 50 °C. Остаток удаляют в токе воздуха.
Навеску измельченной почвы (100 г)
помещают в коническую колбу с притертой пробкой, заливают 200 мл водного
ацетона (1:1) или 80 мл ацетона. Экстракцию пиридата
проводят путем энергичного встряхивания в течение 1 ч. Раствор фильтруют и
переносят в делительную воронку, добавляют 200 мл дистиллированной воды (в
случае экстракции водным ацетоном) и трижды экстрагируют гексаном
порциями по 50 мл. Растворитель объединяют, сушат над безводным сульфатом
натрия, концентрируют по 0,2 - 0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.
Ацетоновый экстракт отгоняют на ротационном испарителе.
Измельченную зеленую массу кукурузы (40
г) помещают в коническую колбу с притертой пробкой, заливают до покрытия
поверхности н-гексаном или этилацетатом. Экстракцию
проводят путем энергичного встряхивания в течение 1 ч. Экстракт отфильтровывают
через складчатый фильтр со слоем безводного сульфата натрия. Растворитель
отгоняют на ротационном испарителе до объема 0,2 - 0,3 мл. Остаток удаляют в
токе воздуха.
Сухой остаток растворяют в 5 мл ацетонитрила, добавляют 100 мл воды и отфильтровывают через
складчатый фильтр. Лентагран экстрагируют 3 порциями
н-гексана по 70 мл в течение 5 мин. Экстракты
объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия и отгоняют на ротационном
испарителе до 0,3 мл.
Идентификация и количественное определение
лентаграна. Пробу, концентрированную до 0,3 мл,
количественно переносят на пластинку с сорбентом. Параллельно наносят серию
стандартных растворов с содержанием 3, 5, 10 мкг д.в.
лентаграна. При необходимости используют двумерную
хроматографию, используя в качестве первой подвижной фазы хлороформ. Затем
пластинку помещают в камеру с системой подвижных растворителей н-гексан - ацетон (4:1 по объему).
После
обработки стеклянных пластинок
реактивом Драгендорфа
лентагран проявляется в виде красных пятен с величиной
R 0,65 +/-
f
0,05. После
обработки хроматограмм
раствором нитрата серебра их
помещают под
источник УФ-света до
четкого появления пятен
препарата.
Содержание
лентаграна в исследуемой пробе (X, мг/кг или
мг/л)
вычисляют по
формуле:
A
X = -,
P
где:
A - количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;
P - навеска или объем воды, г или мл.
Требования безопасности. Необходимо
соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими
растворителями и токсичными веществами.