Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
22 мая 1985 г. N 3892-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТРИАДИМЕФОНА (БАЙЛЕТОНА) МЕТОДОМ
ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОДЕ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
1. Краткая
характеристика фунгицида
1-(4-хлор-фенокси),3,3-диметил-1(1н-1,2,4-триазолил-1)-2-бутанон.
Структурная формула Эмпирическая формула
---
Cl-// \\-O-CH-COC(CH ) C
H ClN O
\ ___ /
│ 3 3 14 16 3 2
---
N
/ \
││ N
││ ││
N---
Байлетон -
бесцветный порошок, не имеющий запаха. Общепринятое название
- триадимефон.
Молекулярная масса - 293,7. Температура плавления - 82,3 °С, растворим
в воде (0,026 г
действующего вещества на 100 г при 20 °С). Хорошо растворим
в большинстве
органических растворителей. При нормальных условиях стабилен:
в 0,1 н
растворах серной кислоты и щелочи не разлагается в течение 24 часов
при 20
°С. Байлетон выпускается в форме 5 и 25% смачивающегося
порошка.
Токсичность: ЛД для
крыс - 572 мг/кг. Препарат предназначен для борьбы с
50
мучнистой росой
и ржавчиной грибов, кроме
того эффективен
против других
возбудителей
болезней, как, например, Rhynochosporium secalis.
2. Методика
определения байлетона в воде методом
тонкослойной хроматографии
2.1. Принцип метода
Метод основан на экстракции фунгицида из
анализируемой пробы органическим растворителем и хроматографии на пластинке
"Силуфол".
2.2.
Метрологическая характеристика метода
Диапазон определяемых концентраций - 0,05
- 20 мг/л.
Предел обнаружения на хроматографии - 1
мкг, предел обнаружения в воде - 0,01 мг/л.
|
Анализируемый
объект
|
Экстрагент
|
Число
повтор.
|
Обнаружено
в %
|
Среднее
значение
опр. в %
|
Относит.
стандар.
отклон.,
%
|
Доверит.
интервал
среднего,
%, при
р = 0,95;
n = 5
|
|
Вода
|
н-Гексан
|
5
|
94
64
100
92
122
|
94,4 +/-
12,45
|
24,89
|
24,4
|
2.3. Реактивы и
растворы
Ацетон, хч,
ГОСТ 2603-79.
Бензол, хч,
ГОСТ 5955-75.
н-Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.
Спирт этиловый, ТУ 6-09-1710-77.
Натрий сернокислый безводный, ч, ГОСТ 4166-81.
Стандартный раствор байлетона
в этиловом спирте с содержанием 200 мкг/мл. Раствор устойчив в течение 3-х
месяцев при хранении на холоде.
Проявляющие реактивы
1. 0,4% ацетоновый раствор бромфенолового синего с 2% раствором азотнокислого серебра
в равных объемах. Для осветления фона пластинки после опрыскивания проявителем
1 готовят осветляющий раствор 2.
2. 2% водный раствор лимонной кислоты
(можно уксусной). Лимонная кислота, чда, ГОСТ
3652-74.
Смесь растворителей: гексан
и ацетон (72:28), изооктан:ацетон
(70:30), бензол и этилацетат (90:10).
2.4. Получение
химически чистого байлетона
Стандартный раствор содержит 200 мкг/мл.
Из торговой фирмы 25% смачивающегося
порошка байлетона готовят насыщенный раствор в
этиловом спирте, помещают его на водяную баню при 35 - 40 °С
и оставляют до полного растворения препарата, затем раствор отфильтровывают и
выпаривают до небольшого объема и оставляют в холодильнике до кристаллизации.
Выпавшие кристаллы отфильтровывают, промывают охлажденным этиловым спиртом и
высушивают на воздухе, затем растворяют в мерной колбе с притертой пробкой в
100 мл этилового спирта.
Дополнительным критерием степени чистоты
препарата служит хроматографическая индивидуальность,
при определении которой стандартные растворы, будучи нанесенными на пластинку в
количестве 5 - 10 мкг, не создают посторонних проявлений после хроматографирования.
2.5. Приборы и
посуда
Делительные воронки на 300 мл, ГОСТ
8613-75, мерные колбы на 100 мл, ГОСТ 22524-77, микропипетки, ГОСТ 20292-74,
колбы грушевидные на 25 мл, ГОСТ 10394-72, цилиндры мерные на 5, 10, 100 мл.
Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-75. Хроматографические пластинки "Силуфол",
производство ЧССР. Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок, ГОСТ
10391-74, водяная баня, ТУ 64-1-2850-76, электроплитка, аппарат для
встряхивания, ТУ 64-1-2451-78, колбы конические на 250 мл с притертыми
пробками, сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76.
2.6. Отбор,
хранение и доставка проб
Отбор проб воды проводится в соответствии
с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,
пищевых продуктов, окружающей среды для определения микроколичеств
пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного
санитарного врача СССР 21.08.79 за N 2051-79г. Отобранные пробы хранят в
стеклянной или полиэтиленовой таре в сухом и защищенном от света месте не более
2-х суток.
2.7. Проведение
определения
Пробу воды (100 - 200 мл) помещают в
колбу с притертой пробкой, добавляют н-гексан (10 -
20 мл) и оставляют на ночь или экстрагируют на аппарате для встряхивания в
течение 2-х часов. Затем пробу переносят в делительную воронку, добавляют еще
10 - 20 мл гексана, энергично встряхивают, дают
отстояться и отделяют гексан от воды. Объединенный
экстракт сушат сульфатом натрия (5 - 10 г) и упаривают на водяной бане при
температуре 35 - 40 °С. Выпаренный осадок растворяют в гексане
и проводят хроматографирование. На пластинку наносят
0,1 мл растворителя так, чтобы размеры пятен не превышали 5 - 6 мм. Слева и
справа от пробы наносят 3 - 5 мкг стандартного раствора.
Пластинку
высушивают и опускают
в хроматографическую камеру.
Приготовляют одну из подвижных фаз за 30 - 40 мин.,
наливают на дно камеры
и опускают пластинку. Готовую пластинку
оставляют на воздухе для просушки,
опрыскивают проявляющим
реактивом. Байлетон проявляется, как правило, в
виде двух синих пятен на желтом фоне с R - 0,22 и R
- 0,56 на пластинке
f1 f2
"Силуфол".
2.8. Обработка
результатов анализа
Полуколичественное определение проводится
путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы и
стандартных растворов.
Для определения количественного
содержания байлетона в воде используют следующую
формулу:
А х S
2
Х = ------,
Р х S
1
где:
Х - содержание байлетона
в мг/л;
А - количество стандартного раствора (в
мкг);
S -
площадь пятна стандартного раствора (в мкг);
1
S -
площадь пятна пробы (в мкг);
2
Р - количество
пробы, взятой для анализа (в мл и г).
3. Требования
безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила
безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими
веществами.
Литература
Бажанова Н.В., Аветисян
К.В., Папоян Ф.А.
Методические указания по определению
фунгицида байлетона методом ТХС в почве, корнях,
зеленых листьях, плодах томатов и огурцов.
Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и
внешней среде. М., 1981. С. 159 - 165.
Настоящие Методические указания
разработаны и апробированы Г.Н. Булычевой при изучении влияния байлетона на санитарный режим водоема и при выполнении
исследовательских работ по обоснованию ПДК байлетона
в воде водоемов на кафедре общей гигиены, Рязанский медицинский институт.