Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
21 ноября 1985 г. N 4017-85
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ДОЗАНЕКСА,
3-ХЛОР-4-МЕТОКСИАНИЛИНА, 3-ХЛОР-4-МЕТОКСИНИТРОБЕНЗОЛА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических указаний
устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
Cl
\ ---
CH
O-// \\-HCON(CH
) М.м. 228,68.
3 \ ___ / 3 2
---
Дозанекс, синоним: метоксурон (действующее начало
N'-(3-хлор-4-метоксифенил)-N,N-диметилмочевина) -
белое кристаллическое вещество, температура плавления - 126 - 127 °С. Растворим
в органических растворителях. Растворимость в воде - 678 мг/л.
Применяется в качестве гербицида на
овощных и зерновых культурах.
Агрегатное состояние в воздухе -
аэрозоль, пары.
ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1 мг/куб.
м.
Cl
\ ---
CH O-//
\\-NH М.м. 157,6.
3
\ ___ / 2
---
3-хлор-4-метоксианилин -
кристаллическое вещество светло-коричневого
цвета, температура
плавления - 62
°С. Хорошо растворим в органических
растворителях.
Практически не растворим
в воде. На
воздухе быстро
-3
окисляется. Давление
пара - 3,38 х 10 мм рт. ст. при
20 °С. Летучесть -
29,9 мг/куб. м.
Применяется при производстве дозанекса, а также является его возможным продуктом
разрушения.
Агрегатное состояние в воздухе -
аэрозоль, пары.
Предельно допустимая концентрация в
воздухе рабочей зоны не установлена.
Cl
\ ---
CH O-//
\\-NO М.м. 187,6.
3
\ ___ / 2
---
3-хлор-4-метоксинитробензол -
кристаллическое вещество светлого цвета, температура плавления - 97 - 98 °С.
Растворим в органических растворителях, практически не растворим в воде.
Применяется при производстве дозанекса.
Агрегатное состояние в воздухе -
аэрозоль, пары.
Предельно допустимая концентрация в
воздухе рабочей зоны не установлена.
I. Характеристика
метода
1. Определение основано на хроматографировании веществ в тонком слое силикагеля
(пластинки "Силуфол") в подвижной фазе на
основе ацетона с последующим обнаружением зон локализации по реакции азосочетания либо с помощью нингидринового
реагента.
2. Отбор проб с концентрированием
(фильтры АФА-ХП, АФА-ХА, этанол).
3. Метрологическая характеристика метода
дана в таблице.
Таблица
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
┌───┬──────────────────────────────┬──────────────────────────────────────┐
│
N │ Наименование
характеристик │ Вещества │
│п/п│ ├────────────┬────────────┬────────────┤
│ │ │ дозанекс │3-хлор-4-ме-│3-хлор-4-ме-│
│ │ │ │токсианилин │токсинитро- │
│ │ │ │ │бензол │
├───┼──────────────────────────────┼────────────┼────────────┼────────────┤
│
1 │ 2 │ 3
│ 4 │ 5
│
├───┼──────────────────────────────┼────────────┼────────────┼────────────┤
│1.
│Диапазон определяемых │0,5 - 10,0 │0,5 - 10,0 │0,5 - 10,0 │
│ │концентраций,
мг/куб. м (пары,│ │ │ │
│ │аэрозоль) │ │ │ │
│2.
│Предел обнаружения в воздухе │0,5 │0,5 │0,5 │
│ │(при отборе 60 л воздуха), │ │ │ │
│ │мг/куб. м │ │ │ │
│3.
│Предел обнаружения в │2 │2 │2 │
│ │анализируемом объеме,
мкг │ │ │ │
│4.
│Среднее значение определения │81,0 │83,1 │80,2 │
│ │стандартных количеств, % │ │ │ │
│5.
│Число параллельных определений│9 │9 │9 │
│6.
│Стандартное отклонение, S, % │5,9 │5,5 │5,8 │
│7.
│Относительное стандартное │0,07 │0,07 │0,07 │
│ │отклонение │ │ │ │
│8.
│Доверительный интервал средне-│81,0 +/- 4,5│83,1 +/- 4,0│80,2
+/- 4,5│
│ │го при Р = 0,95 и n = 1, %
│ │ │ │
└───┴──────────────────────────────┴────────────┴────────────┴────────────┘
4. Определению не мешают вещества,
используемые в синтезе дозанекса, другие замещенные
анилина и нитробензола, а также гербициды, относящиеся к производным фенилмочевин. Анализируемые вещества (дозанекс,
3-хлор-4-метоксианилин и 3-хлор-4-метоксинитробензол) определению друг друга не
мешают.
II. Реактивы,
растворы, материалы
Дозанекс 98-процентный.
3-Хлор-4-метоксианилин 98-процентный.
3-Хлор-4-метоксинитробензол
98-процентный.
Спирт этиловый технический, ГОСТ
18300-72.
Гексан, ТУ 6-09-3375-78.
Ацетон, ГОСТ 2603-79.
Хлороформ, ГОСТ 215-74.
Кислота соляная, ч,
ГОСТ 3118-77.
Олово двухлористое, ч,
ГОСТ 36-78.
Натрий азотистокислый,
хч, ГОСТ 4197-74.
Калий гидроксид, ГОСТ 6-01-301-74.
1-Нафтол, чда,
ГОСТ 5838-79.
Нингидрин, чда, ТУ 6-09-2737-73.
Бутанол, ТУ 6006-78.
Кислота уксусная ледяная, ГОСТ 18290-72.
Фильтры аэрозольные АФА-ХП-20 или
АФА-ХА-20.
Пластинки для хроматографии "Силуфол", размер 150 х 150 мм.
Приготовление стандартных растворов
Стандартный раствор дозанекса
с содержанием 1 мг/мл готовят растворением навески 0,051021 г в 50 мл этилового
спирта. Раствор устойчив в течение недели.
Стандартный раствор смеси
3-хлор-4-метиланилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола с содержанием 1 мг/мл
готовят растворением навески каждого компонента 0,051021 г в колбе и 50 мл
этилового спирта.
Рабочие стандартные растворы с
содержанием дозанекса 10 - 120 мкг/мл и смеси
3-хлор-4-метиланилина с 3-хлор-4-метоксинитробензолом до 10 - 120 мкг/мл
каждого компонента готовят для построения градуировочной
шкалы на пластинках "Силуфол".
III. Приборы и
посуда
Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.
Поглотительные приборы Рыхтера (средняя модель), ТУ 25-11-1081-75.
Фильтродержатели.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ
25-11-917-74.
Камеры хроматографические
стеклянные, ГОСТ 10565-75.
Камеры для опрыскивания пластинок, ТУ
25-11-430-70.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74.
Микрошприцы МШ-10, ТУ 2-833-106.
Микропипетки емкостью 0,1 мл, ГОСТ
20292-74.
Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74.
Цилиндры, мензурки, ГОСТ 1770-74.
Пробирки градуированные с притертыми пробками емкостью 5 мл, ГОСТ 10515-75.
Колбы грушевидные для отгонки
растворителя, ГОСТ 10394-72.
Химические стаканы емкостью 100 мл, ГОСТ
10394-72.
Воронки химические, ГОСТ 8613-75.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Баня со льдом (для отбора проб воздуха).
Сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76.
Приготовление подвижных фаз
Подвижная фаза N 1 (для хроматографирования дозанекса):
смешивают хлороформ и ацетон в соотношении 18:3.
Подвижная фаза N 2 (для хроматографирования 3-хлор-4-метоксианилина и
3-хлор-4-метоксинитробензола): смешивают гексан и
ацетон в соотношении 20:6.
Подвижные фазы готовят непосредственно в хроматографических камерах за 30 мин. до хроматографирования. Высота слоя растворителя не должна
превышать 0,5 см.
Приготовление проявляющих реагентов
Проявляющий реагент N 1: к смеси 46 мл
воды и 4 мл концентрированной хлористоводородной кислоты добавляют 1 г азотистокислого натрия. Раствор готовят перед
употреблением.
Проявляющий реагент N 2: к раствору 2,8 г
гидроксида калия в 50 мл воды добавляют 0,1 г 1-нафтола. Реактив готовят перед
употреблением.
Проявляющий реагент N 3 (нингидриновый): 0,3 г нингидрина
растворяют в 100 мл н-бутанола и прибавляют 3 мл ледяной уксусной кислоты.
Реактив устойчив в течение двух недель.
Проявляющий реагент N 4
(восстанавливающий): 10-процентный раствор двухлористого олова в
концентрированной хлористоводородной кислоте. Раствор устойчив в течение
месяца.
Подготовка шкалы стандартных пятен
Растворы для стандартных пятен дозанекса: в шесть градуированных пробирок с помощью микрошприца или микропипетки вносят 0; 0,03; 0,06; 0,12;
0,24; 0,36 мл стандартного раствора дозанекса и
доводят объем в каждой пробирке этиловым спиртом точно до 3 мл.
Растворы для стандартных пятен
3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола: в шесть градуированных
пробирок вносят 0; 0,03; 0,06; 0,12; 0,24; 0,36 мл стандартного раствора смеси
этих веществ и доводят объем в каждой пробирке этиловым спиртом точно до 3 мл.
На двух пластинках "Силуфол" на расстоянии 15 мм от края намечают на линию
старта.
На линию старта пластинки N 1 справа и
слева от середины на расстоянии 15 мм друг от друга наносят по 0,2 мл раствора
из пробирок с растворами для стандартных пятен дозанекса
в виде отдельных пятен диаметром не более 10 - 12 мл. Эти пятна соответствуют
0; 2; 4; 8; 16; 24 мкг дозанекса.
На линию старта пластинки N 2 справа и
слева от середины на расстоянии 15 мм друг от друга наносят по 0,2 мм раствора
из пробирок с растворами для стандартных пятен смеси 3-хлор-4-метоксианилина и
3-хлор-4-метоксинитробензола в виде пятен диаметром не более 10 - 12 мм. Эти
пятна соответствуют 0; 2; 4; 8; 16; 24 мкг каждого из компонентов смеси.
IV. Условия отбора
проб воздуха
Воздух со скоростью
1 - 2 л/мин. аспирируют через последовательно
соединенные аэрозольный фильтр, укрепленный в фильтродержателе,
и поглотительный прибор Рыхтера, установленный в
ледяную баню и заполненный 10 мл этилового спирта в качестве поглотительного
раствора. Для определения 1/2 ОБУВ достаточно
отобрать 60 л воздуха. Пробы можно хранить в течение недели.
V. Условия анализа
Аэрозольный фильтр извлекают из фильтродержателя, помещают в химический стакан и
экстрагируют этиловым спиртом четырьмя порциями по 10 мл, выдерживая каждый раз
по 3 - 4 мин. Экстракты сливают в грушевидную колбу. В эту же колбу сливают
этиловый спирт из поглотительного прибора. Прибор обмывают дважды этиловым
спиртом порциями по 3 - 5 мл, смывы также сливают в грушевидную колбу. Отгоняют
растворитель на ротационном испарителе до объема 2,5 мл. Этот раствор переносят
в градуированную пробирку и доводят объем этиловым спиртом точно до 3 мл.
По 0,2 мл полученного раствора наносят на
середину линий старта пластинок N 1 и N 2, на которые предварительно были
нанесены соответствующие стандартные пятна (см. раздел III). Диаметр пятен не
более 10 - 12 мм.
Пластину N 1 помещают в хроматографическую камеру с подвижной фазой N 1; пластину N
2 - в камеру с подвижной фазой N 2.
Хроматограммы развивают на высоту 10 см, вынимают из камер, подсушивают на воздухе
в вытяжном шкафу.
Зоны локализации дозанекса
на пластинке N 1 обнаруживают одним из двух способов:
а) нагревают пластину в сушильном шкафу
при температуре 120 °С в течение 3 - 5 мин., охлаждают
до комнатной температуры и обрабатывают из пульверизатора сначала проявляющим
реагентом N 1, а затем проявляющим реагентом N 2. Дозанекс
обнаруживают в виде светло-коричневого пятна на сером фоне;
б) обрабатывают пластинку проявляющим
реагентом 3, а затем нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 5 - 10 мин. Дозанекс
обнаруживают в виде сиреневого пятна на светлом фоне.
Значение R
дозанекса - 0,40. Окраска пятен устойчива.
f
Зоны
локализации
3-хлор-4-метоксинитробензола
и
3-хлор-4-метоксианилина на
пластинке N 2 обнаруживают
следующим образом:
пластинку с
помощью пульверизатора орошают проявляющим реагентом N 4, затем
нагревают в
сушильном шкафу при
температуре 120
°С в течение 20 мин.,
охлаждают до
комнатной температуры и орошают последовательно проявляющими
реагентами N 1 и N 2. 3-хлор-4-метоксианилин и
3-хлор-4-метоксинитробензол
(восстановленный
до соответствующего амина)
обнаруживают в виде
красновато-коричневых пятен с R
= 0,20 и 0,40
соответственно. Окраска
f
пятен устойчива.
Для количественных расчетов из
стандартных пятен на пластинах N 1 и N 2 выбирают пятна, близкие пятнам
соответственно дозанекса, 3-хлор-4-метоксианилина,
3-хлор-4-метоксинитробензола по интенсивности окраски и размерам. Измеряют с
помощью прозрачной миллиметровой бумаги или другим способом площади этих пятен
и пятен пробы.
Концентрацию дозанекса,
3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола (Х) в мг/куб. м
вычисляют по формуле:
G х S х V
пр 1
Х = -------------,
S х V х V
ст 20
где:
G - количество вещества в стандартном
растворе, мкг;
S -
площадь пятна на хроматограмме пробы, кв. мм;
пр
S -
площадь пятна на хроматограмме стандарта, кв. мм;
ст
V -
общий объем пробы, мл;
1
V - объем хроматографируемой
пробы, мл;
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
20
условиям.
VI. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима
и личной гигиены при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических
учреждений системы Минздрава СССР (N 2455-81, 20.10.81).
VII. Разработчики
Пиленкова И.И., Юркова Р.Г., Фатьянова А.Д.
(Всесоюзный НИ технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений
- ВНИТИГ, г. Уфа).