Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
21 ноября 1985 г. N 4019-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ
ФОЗАЛОНА И ПОЛУПРОДУКТОВ ЕГО ПРОИЗВОДСТВА БЕНЗОКСАЗОЛОНА
И 3-ОКСИМЕТИЛ-6-ХЛОРБЕНЗОКСАЗОЛОНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
Таблица 1
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВЕЩЕСТВ
┌─────────────────┬─────────────────────────┬──────────┬───────────┬───────────┐
│
Вещество │ Структурная формула │Молекуляр-│Раствори- │Температура│
│ химическое │ │ная масса │мость │ плавления,│
│
название │ │ │ │ °С │
├─────────────────┼─────────────────────────┼──────────┼───────────┼───────────┤
│
│ S
│ │ │ │
│Фозалон │ //\
││ │367,8 │В воде
- │48 │
│S-(6-хлорбензок- │ // \
--N-CH SP(OC H ) │ │10 мг/л. │ │
│сазолинон-2-ил)- │ │
││ │ 2
2 5 2│ │Хорошо
- │ │
│3-метил-0,0-ди- │
│ ││ │ │ │в ацетоне, │ │
│этилдитиофосфат │ /\\
/\ /\\ │ │спиртах, │ │
│
│Cl \\/
O O │ │гексане, │ │
│
│ │ │хлороформе,│ │
│
│ │ │бензоле
и │ │
│
│ │ │др. │ │
│
│ │ │ │ │
│Бензоксазолон │ //\ │135,0 │-"- │138 - 140 │
│
│// \ --NH │ │ │ │
│ ││ ││ │ │ │ │ │
│
││ ││ │ │ │ │ │
│
│\\ /\ /\\ │ │ │ │
│
│ \\/ O O │ │ │ │
│
│ │ │ │ │
│3-Оксиметил-6-
│ //\ │165,0 │-"- │128 - 137 │
│хлорбензоксазолон│ // \
--N-CH OH │ │ │с разложе-
│
│
│ │ ││ │
2 │ │ │нием │
│
│ │ ││ │ │ │ │ │
│
│ /\\ /\ /
│ │ │ │
│
│Cl \\/
O │ │ │ │
└─────────────────┴─────────────────────────┴──────────┴───────────┴───────────┘
Вещества не летучи, в воздухе могут
находиться в виде аэрозоля.
I. Характеристика
метода
1. Определение основано на хроматографировании фозалона, бензоксазолона и 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона в тонком
слое силикагеля (пластинки "Силуфол") с
последующим обнаружением зон локализации фозалона бромфеноловым реагентом, бензоксазолона
и 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона орто-толидиновым
реагентом после хлорирования веществ на пластинке.
2. Отбор проб проводится с
концентрированием на пористом фильтре.
3. Предел измерения в анализируемом
объеме:
фозалона 0,4 мкг;
бензоксазолона 0,4 мкг;
3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона 4 мкг.
4. Предел измерения в воздухе:
фозалона 0,25 мг/куб. м (при отборе 160 л воздуха);
бензоксазолона и 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона 0,5 мг/куб. м (при отборе 80 л
воздуха).
5. Диапазон измеряемых концентраций
<*>:
фозалона 0,25 - 3,13 мг/куб. м;
бензоксазолона 0,5 - 4,0 мг/куб. м;
3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона 0,5 -
6,25 мг/куб. м.
6. Определению не мешают полупродукты и
растворители производства фозалона, в том числе:
0,0-диэтиловый эфир дитиофосфорной кислоты,
хлорбензол, хлористый метилен, о-нитробензол,
о-нитрофенол и др.
7. Границы суммарной погрешности для
каждого компонента +/- 15%.
8. Предельно допустимая концентрация фозалона 0,5 мг/куб. м, бензоксазолона
- 1 мг/куб. м, 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона не установлена.
II. Реактивы,
растворы, материалы
Ацетон, осч,
ГОСТ 2603-79.
Хлороформ, чда,
ГОСТ 20015-74.
Уксусная кислота, чда,
ГОСТ 18270-72, конц. и 5-процентный раствор.
Бромфеноловый синий, чда, ТУ
6-09-1058-76.
AgNO , чда, ГОСТ 1277-75.
3
Проявляющий реагент 1. В 10 мл ацетона
растворяют 0,05 г бромфенолового
синего и доводят
до 100 мл 1-процентным раствором AgNO в смеси ацетон:вода
3
(3:1).
Проявитель хранят в темноте.
Соляная кислота, ч,
ГОСТ 3118-77.
KMnO , чда, ГОСТ 20490-75.
4
о-Толидин, ч.
KJ, чда, ГОСТ
4232-74.
Проявляющий реагент 2. Растворяют в 30 мл
уксусной кислоты 0,16 г о-толидина, доводят до 500 мл
дистиллированной водой и добавляют 1 г KJ. Проявитель хранят в темноте.
Стандартные растворы фозалона
и бензоксазолона с содержанием 100 мкг/мл и
3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона с содержанием 1000 мкг/мл в ацетоне.
Стандартные растворы фозалона и бензоксазолона
готовят растворением 10 мг вещества в мерных колбах на 100 мл в ацетоне, а
3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона 0,1 г - в тех же условиях. Стандартные
растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев.
III. Приборы и
посуда
Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.
Стеклянные пористые фильтры, ЛХУ-1, пор
160, диаметром 5 см.
Камера хроматографическая
с притертой крышкой, ГОСТ 10565-75.
Камера для хлорирования с притертой
крышкой.
Источник УФ-света
широкого диапазона волн.
Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.
Пробирки градуированные, ГОСТ 1770-74, с
пробками на шлифах, на 10 мл.
Пипетки, ГОСТ 1770-74, на 1 и 10 мл.
Микрошприц на 0,1 мл или микропипетка на 0,1 мл.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74.
Мерные цилиндры, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.
IV. Условия отбора
проб воздуха
Воздух со скоростью 10 л/мин. аспирируют через стеклянный пористый фильтр. Для
определения 1/2 ПДК фозалона достаточно отобрать 160
л, а 1/2 ПДК бензоксазолона - 80 л воздуха. Пробы,
отобранные на фильтр, длительному хранению не подлежат и должны быть
проанализированы в течение трех суток.
V. Условия анализа
С пористого фильтра вещества смывают 10
мл ацетона в пробирку емкостью 10 мл. Доводят содержимое пробирки до метки (10
мл) ацетоном. Пробирку закрывают пробкой на шлифе и ее содержимое перемешивают.
Аликвотную часть раствора 0,1 мл для фозалона и бензоксазолона и 1 мл для 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона
при помощи микрошприца или микропипетки наносят на хроматографическую пластинку силуфол.
Параллельно на пластинку наносят с помощью микрошприца
или микропипетки серию стандартов с содержанием 0,4; 0,6; 0,8; 1; 2...5 мкг при
определении фозалона или бензоксазолона
и 4, 6, 8, 10, 20...50 мкг - при определении 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона.
Серии стандартов готовят согласно таблице 2 и таблице 3.
Таблица 2
ШКАЛА СТАНДАРТОВ ФОЗАЛОНА И БЕНЗОКСАЗОЛОНА
┌──────────────────────────────────────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┐
│ N стандарта │ 1 │ 2
│ 3 │ 4 │ 5
│... │ 6 │
├──────────────────────────────────────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┤
│Стандартный
раствор фозалона или │0,4 │0,6 │0,8 │1,0
│2,0 │... │5,0 │
│бензоксазолона, содержащий 100 мкг/мл │ │
│ │ │
│ │ │
│Ацетон,
мл │9,6 │9,4
│9,2 │9 │8 │... │5 │
│Содержание
фозалона или бензоксазолона│0,4 │0,6 │0,8
│1 │2 │... │5 │
│в
0,1 мл, мкг │ │
│ │ │
│ │ │
└──────────────────────────────────────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┘
Таблица 3
ШКАЛА СТАНДАРТОВ 3-ОКСИМЕТИЛ-6-ХЛОРБЕНЗОКСАЗОЛОНА
┌─────────────────────────────────────────────┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬───┐
│ N стандарта │ 1 │ 2 │
3 │ 4 │ 5 │...│ 6 │
├─────────────────────────────────────────────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼───┤
│Стандартный
раствор 3-оксиметил-6- │0,4│0,6│0,8│1 │2
│...│5 │
│хлорбензоксазолона, содержащий 1000 мкг/мл │
│ │ │
│ │ │
│
│Ацетон │9,6│9,4│9,2│9 │8
│...│5 │
│Содержание
3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона в│4
│6 │8 │10 │20 │...│50 │
│0,1
мл, мкг │ │
│ │ │
│ │ │
└─────────────────────────────────────────────┴───┴───┴───┴───┴───┴───┴───┘
При
определении фозалона пластинку
помещают в хроматографическую
камеру, в
которую за 30
мин. до начала хроматографирования
был налит
подвижный растворитель
бензол. После высушивания
хроматограмму сначала
обрабатывают из
пульверизатора бромфеноловым
проявляющим реагентом 1, а
затем, для
снятия фона, - 5-процентным раствором
уксусной кислоты. Фозалон
на хроматограммах проявляется в виде голубых пятен на
лимонно-желтом фоне с
R 0,5 +/-
0,05. Пятна стабильны
в течение 8
- 10 мин.
Линейность
f
детектирования -
0,4 - 5 мкг.
При
определении бензоксазолона и
3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона
пластинку помещают
в камеру, в
которую за 30
мин. до начала
хроматографирования налит подвижный растворитель хлороформ:уксусная кислота
(20:1). После
развития пластинку сразу
же помещают в
камеру для
хлорирования и
выдерживают там пластинку 5 - 10 мин. Хлорирующую камеру
готовят ежедневно,
для чего в
камеру помещают чашку
Петри с 10 г
марганцовокислого калия и осторожно приливают 10 мл конц. соляной кислоты.
После хлорирования
пластинку извлекают из камеры и выдерживают на воздухе
до полного
улетучивания следов хлора (примерно 20 - 30 мин.). Опрыскивают
из пульверизатора
орто-толидиновым проявляющим реагентом (N 2) и
сразу же
влажную помещают
под УФ-свет на
10 - 20
с. Бензоксазолон и
3-оксиметил-6-хлорбензоксазолон проявляются
в виде темно-серых пятен на
белом фоне
с R =
0,50 +/- 0,05
и 0,40 +/-
0,02 соответственно.
f
Хроматограммы стабильны в течение 10 мин., а затем фон темнеет. Линейность
детектирования бензоксазолона -
0,4 - 4
мкг, 3-оксиметил-
6-хлорбензоксазолона
- 4 - 50 мкг.
Количественное определение
проводят путем сравнения
площади и
интенсивности
окраски пятен пробы и стандартных растворов.
Концентрацию вещества (Х) в воздухе в
мг/куб. м вычисляют по формуле:
G х V
1
Х = -------,
V х V
20
где:
G - количество вещества, найденное в
анализируемой пробе, мкг;
V - общий
объем пробы, мл;
1
V - хроматографируемый
объем пробы, мл;
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
20
условиям, л.
VI. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима
и личной гигиены при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических
учреждений системы Минздрава СССР (N 2455-81, 20.10.81).
VII. Разработчики
Мельцер Ф.Р., Новикова К.Ф. (ВНИИ химических средств защиты растений с
опытным заводом, г. Москва).