Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
21 ноября 1985 г. N 4032-85
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТРИАЛЛАТА МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ В ВОДЕ, ПОЧВЕ И ЗЕРНЕ ПШЕНИЦЫ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им.
Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном
санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
1. Краткая
характеристика вещества
Название по номенклатуре СЭВ, ИСО:
триаллат.
Химическое название:
S-(2,3,3-трихлораллил)-N,N-диизопропилтиокарбамат.
Структурная формула:
(CH ) CH
3 2
\
N-CO-SCH CCl=CCl
/ 2
2
(CH ) CH
3 2
Эмпирическая формула: C H NOCl
S.
10 16 3
Молекулярная масса - 304,7.
Физико-химические свойства: светло-бурое
кристаллическое вещество с неприятным запахом. Температура плавления - 29 - 30 °С; Т кип. - 165° при 6 мм рт. ст. Растворимость в воде - 4
мг/л (при 20 °С); растворяется в органических растворителях (ацетон, бензол,
этанол и др.).
Применяется в качестве гербицида в
посевах пшеницы, ячменя для уничтожения овсюга и в посевах льна против плевела
льняного.
Малотоксичен для
теплокровных, ЛД для
крыс - 1340 мг/куб. м, не
50
опасен для пчел, токсичен
для гидробионтов, умеренно
стоек во внешней
среде, в
почве сохраняется 2 - 3 мес. Остатков в пищевых продуктах не
допускается.
2. Методика
определения триаллата в воде, почве и зерне
пшеницы методом газожидкостной хроматографии
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении триаллата из
воды и зерна пшеницы экстракцией органическими растворителями, из почвы -
отгонкой с водяным паром с последующей экстракцией из водного дистиллята
гексаном и газохроматографическом определении на приборе с детектором по
захвату электронов. Количественное определение проводят по методу сравнения со
стандартом.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Диапазон определяемых концентраций для
воды - 0,0001 - 0,4 мг/л, для почвы - 0,005 - 2 мг/кг, для зерна пшеницы - 0,0005
- 0,2 мг/кг.
Предел обнаружения - 0,0001 мкг.
Предел обнаружения: для воды - 0,0001
мг/л, для почвы - 0,005 мг/кг, для зерна пшеницы - 0,0005 мг/кг.
Среднее значение определения стандартных
количеств триаллата в воде - 92,0%, в почве - 84,0%, в зерне пшеницы - 89%.
Число параллельных определений П = 6.
Стандартное отклонение для воды - 4,73%,
для почвы - 6,36%, для зерна пшеницы - 5,5%.
Относительное стандартное отклонение для
воды - 0,05, для почвы - 0,075, для зерна пшеницы - 0,062.
Доверительный интервал среднего в % при Р = 0,95 и n - 10 составляет для воды - 92,0 +/- 4,96, для
почвы - 84,0 +/- 6,67; для зерна пшеницы - 89,0 +/- 5,8.
2.1.3. Избирательность метода
Определению не мешают пестициды ряда
феноксиалканкарбоновых кислот (2,4-Д; 2,4-ДП; 2М-4Х и др.) и тиокарбаматы.
2.2. Реактивы и
материалы
Триаллат с содержанием основного вещества
не менее 98,5%.
Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78.
Сульфат натрия безводный, хч, ГОСТ
4166-76.
Толуол, хч, ГОСТ 5789-78.
Ацетонитрил, ч, ТУ 6-09-3534-74.
Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.
Оксид алюминия L 40/250 щелочной для
колоночной хроматографии производства ЧССР.
Насадка для хроматографической колонки:
хроматон N-AW-DMCS (фр. 0,20 - 0,25 мм) с 5% SE-30 фирмы "Хемапол".
Азот особой чистоты газообразный, ГОСТ
9293-74, в баллоне с редуктором.
2.3. Приборы,
аппаратура и посуда
Хроматограф с детектором по захвату
электронов.
Колонка стеклянная длиной 150 см,
внутренним диаметром 8 мм.
Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Колбы мерные, цилиндры, мензурки, ГОСТ
1770-74.
Колбы грушевидные для отгонки
растворителя емкостью 100 мл.
Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74.
Воронка делительная емкостью 500 - 1000
мл, ГОСТ 8613-75.
Пробирки градуированные со шлифом, ГОСТ 16515-75.
Воронки конусообразные, ГОСТ 8615-75.
Установка для отгонки с водяным паром
(схема, см. рис. 1 - здесь и далее рисунки не приводятся).
Мельница лабораторная (кофемолка).
Микрошприц емкостью 10 мкл, ТУ 2-333-106.
2.4. Подготовка к
определению
Приготовление стандартных растворов.
Стандартный раствор триаллата N 1 с
концентрацией 1 мг/мл готовят растворением навески 0,01 г в 10 мл толуола.
Стандартный раствор триаллата N 2 с
концентрацией 1 нг/мкл готовят разбавлением 10 мкл раствора N 1 до 10 мл толуолом.
Стандартный раствор триаллата N 3 с
концентрацией 0,1 нг/мкл готовится разбавлением 1 мл стандартного раствора N 2
до 10 мл толуолом.
Срок хранения растворов 10 дней.
2.5. Отбор пробы
Отбор пробы проводится в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,
продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств
пестицидов", утвержденными Заместителем Главного государственного санитарного
врача СССР за N 2051-79 от 21 августа 1979 г.
2.6. Проведение
определения
Вода. Пробу воды (50 - 500 мл) помещают в
делительную воронку и экстрагируют дважды гексаном порциями по 50 мл.
Объединенные экстракты пропускают через коническую воронку с безводным
сульфатом натрия (5 г). Фильтрат собирают в грушевидную колбу для отгонки и
концентрируют с помощью ротационного испарителя (температура бани не выше 50°,
остаточное давление 70 - 100 мм рт. ст.) до объема 0,5 - 1 мл, затем в токе
воздуха - досуха. Остаток растворяют в 1 - 10 мл гексана и 2 мкл раствора
хроматографируют.
Почва. Навеску почвы (10 - 50 г) помещают
в круглодонную отгонную колбу, снабженную насадкой, добавляют 100 мл
дистиллированной воды. Колбу устанавливают на нагревательный прибор и соединяют
один отвод насадки с холодильником и далее с приемной колбой. Предварительно
нагревают воду в парообразователе до кипения, затем соединяют парообразователь
через водоотделитель с колбой для отгонки. Пар из парообразователя барботируют
через суспендированную в воде почву. Триаллат извлекается водяными парами,
которые конденсируются в холодильнике и поступают в приемник. Отгонку с паром
прекращают, когда объем дистиллята достигнет 100 мл. Дистиллят из приемника
переливают в делительную воронку и дальнейшую его обработку проводят так, как
это описано выше для воды. Сконцентрированный досуха гексановый экстракт
растворяют в 5 - 10 мл гексана и 2 мкл раствора хроматографируют.
Зерно пшеницы. Навеску зерна (10 - 20 г)
измельчают, муку помещают в коническую колбу с притертой пробкой, заливают 20
мл ацетонитрила, встряхивают в течение 0,5 часа и отфильтровывают под вакуумом.
Экстракцию повторяют свежей порцией ацетонитрила (20 мл). Экстракты после
фильтрации пропускают через бумажный фильтр и концентрируют до 0,5 - 1 мл на
ротационном испарителе при температуре бани не выше 50 °С,
остаточном давлении 70 - 100 мм рт. ст., затем до отсутствия ацетонитрила - в
токе воздуха. Маслянистый остаток очищают в стеклянной колонке диаметром 0,8
см, длиной 30 см, заполненной щелочным оксидом алюминия (высота слоя 10 см). До
внесения экстракта колонку с оксидом алюминия промывают гексаном (10 мл).
Остаток после концентрирования экстракта растворяют в 1 мл гексана и переносят
в колонку. Колбу обмывают 3 раза 1 мл гексана и смыв
также переносят в колонку. Растворитель отсасывают под вакуумом и пропускают 2
порции гексана со скоростью 100 - 120 кап./мин.: 80 мл отбрасывают, последующие 70 мл гексана собирают
в отгонную колбу, элюат концентрируют до 0,5 - 10 мл и 2 - 5 мкл раствора
хроматографируют.
Аликвоту полученных гексановых экстрактов
хроматографируют на приборе с детектором по захвату электронов при следующих
условиях:
-11
рабочая шкала электрометра - 9 х 10 А;
скорость протяжки картограммы - 200 мм/ч;
колонка
стеклянная длиной 150
см, диаметром 3
мм, заполненная
хроматоном
N-AW-DMCS (фр. 0,20 - 0,25 мм) с 5% SЕ-30;
температура термостата колонок - 170 °С, испарителя - 225 °С, детектора
- 220 °С;
расход
газа-носителя через колонку
- 40 мл/мин., через
продувочную
камеру детектора
- 60 мл/мин.;
объем, вводимый в
испаритель, - 2 мкл для почвы и воды, 2 - 5 мкл для
зерна;
линейность детектирования - 0,0001 - 0,004
мкг;
абсолютное время удерживания триаллата -
3,9 мин.
Хроматографирование каждого экстракта
проводят трижды, измеряют высоты пиков, вычисляют среднее значение высоты (рис.
2).
В этих же условиях хроматографируют 2 - 5
мкл (в зависимости от величины пика пробы) стандартного раствора триаллата N 3.
Хроматографирование проводят трижды, вычисляют среднее значение высоты пика.
2.7. Обработка
результатов анализа
Содержание триаллата в пробе (Х) в мг/кг
(или мг/л) вычисляют по формуле:
А х Н х V х
100
пр 2
Х =
------------------,
Н х V х
Р х R
ст 1
где:
А
- количество триаллата
в хроматографируемом объеме стандартного
раствора, нг;
Н ,
Н - средняя
высота пика на хроматограммах
растворов пробы и
пр ст
стандартного
соответственно, мм;
V -
объем аликвоты раствора пробы, вводимой в прибор, мкл;
1
V -
общий объем раствора пробы, мл;
2
Р - навеска пробы,
г, или объем (для воды), мл;
R
- среднее значение
определения стандартных количеств триаллата,
найденное предварительно, %.
3. Требование
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима
и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР N 2455-81 от 20.10.81.
4. Разработчики
Пиленкова Инна Иосифовна
Юркова Римма Григорьевна
Всесоюзный научно-исследовательский
технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений (ВНИТИГ), г.
Уфа.
5. Методические указания апробированы в
институте ВНИИГИНТОКС, г. Киев (Киселева Н.И.).