Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
21 ноября 1985 г. N 4033-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДИФЕНАМИДА В ВОДЕ МЕТОДОМ
ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
1. Характеристика
анализируемого пестицида
Активное вещество дифенамида
(синонимы: димид, зарур, ридеон, энид) -
N,N,диметил-2,2-дифенилацетамид:
___
---
/ \
\\ //
--- O CH
\
|| / 3
CH-C-N
C H NO
___ / \
16 17
--- CH
/
\ 3
\\
//
---
Молекулярная масса дифенамида
- 239,26.
Дифенамид - белое кристаллическое вещество с темп. пл. 134,5 - 135,5 °С. Растворимость при 25 °С (г/л): в
ацетоне - 190, в ксилоле - 50, диметилформамиде -
160, в воде - 0,26.
Используется в виде 80-процентного с.п. ЛД для белых
крыс 2500 мг/кг,
50
для мышей 700
мг/кг, ПДК в воде - 1,2 мг/л.
Дифенамид активен против большого числа сорняков.
Применяется в качестве почвенного гербицида для борьбы с сорняками в посевах
томатов, перца, земляники, картофеля, табака и некоторых других культур.
2. Методика
определения дифенамида в воде
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на экстракции пестицида из
воды хлороформом, концентрировании экстракта и хроматографировании
его в тонком слое адсорбента.
Подвижным растворителем служит смесь н-гексана, ацетона и аммиака в соотношении 10:5:0,8.
Проявление хроматограмм
осуществляют 1-процентным раствором фосфорномолибденовой
кислоты в этаноле с последующим облучением УФ-светом.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Диапазон определяемых концентраций - 1 -
10 мкг.
Предел обнаружения - 1 мкг, для воды -
0,05 мг/л.
Размах варьирования - 15%.
Среднее значение определения стандартных
количеств пестицида - 74,5%.
Стандартное отклонение - 9,1%.
Доверительный интервал среднего при альфа = 0,95, n = 5, с = 74,5 +/- 6,4.
Определению дифенамида
могут мешать соединения, содержащие
аминогруппу
и имеющие
близкое значение величины R .
f
2.2. Реактивы и
растворы
Аммиак, 25-процентный, ГОСТ 3760-64.
Ацетон, х.ч.,
ГОСТ 2603-79.
н-Гексан, ч.,
ТУ 6-09-3375-78.
Сульфат натрия, безводный, ч., ГОСТ
4166-76.
Спирт этиловый ректификат, 96-процентный,
ТУ 6-09-1710-77.
Стандартный раствор дифенамида
(концентрация 500 мкг/мл).
Растворяют 0,025 г х.ч.
пестицида в 50 мл ацетона. Раствор устойчив в течение 1 месяца.
Пластинки "Силуфол"
(ЧССР), размер 140 х 140 мм.
Фосфорномолибденовая кислота, х.ч., ТУ 6-09-3540-78. Готовят
1-процентный раствор в этиловом спирте. Расход реактива - 1 мл на 1 пластинку.
Хлороформ, ч.д.а.,
ГОСТ 200-15-74.
2.3. Посуда и
приборы
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Воронка делительная емк. 250, 500 мл,
ГОСТ 10054-75.
Испаритель вакуумный ротационный ИР-1М,
ТУ 25-11-917-74.
Камера для опрыскивания пластинок, ТУ
25-11-430-70.
Камера для хроматографирования,
ГОСТ 10565-75.
Колбы круглодонные для отгонки
растворителя, ГОСТ 10394-72.
Колбы мерные емк. 50 - 100 мл, ГОСТ
1770-74.
Лампа кварцевая ПРК-4, ПРК-7, ТУ
16-535-280-74.
Микропипетка на 0,1 мл с ценой деления
0,01 мл, ГОСТ 1770-74.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, емк. 10,
25, 50, 250 мл.
2.4. Проведение
определения
2.4.1. Экстракция. 200 мл воды (рН = 7,5)
помещают в делительную воронку и трижды экстрагируют хлороформом порциями по 50
мл в течение 5 мин. каждый раз. Экстракты объединяют, пропускают через
химическую воронку, заполненную безводным сернокислым натрием, упаривают на
ротационном испарителе до 0,05 - 0,1 мл и количественно наносят на пластинку
"Силуфол".
2.4.2. Хроматографирование
Экстракты
с помощью пипетки
наносят на пластинку
для
хроматографирования,
рядом (на расстоянии
2 см) с
пробами наносят
стандартный
раствор дифенамида в количестве 3, 5, 10 мкг, что
соответствует
6, 10,
20 мкл. Производят
хроматографирование в
смеси растворителей
н-гексан, ацетон, аммиак
= 10:5:0,8. Когда
растворитель поднимется на
высоту 10
см, пластинку вынимают,
сушат и опрыскивают
1-процентным
раствором фосфорномолибденовой кислоты так, чтобы фон пластинки был
светло-
зеленый.
Тщательно сушат пластинку и
облучают УФ-светом 5 - 10 мин. При
наличии дифенамида в
анализируемой пробе появляется пятно синего цвета,
величина R которого равняется
0,35 - 0,37.
f
2.4.3. Обработка результатов анализа
Количественное определение производится
путем сравнения площади пятна пробы и того стандарта, площадь которого наиболее
близка по величине к площади пятна пробы. Измерение площадей осуществляется с
помощью промасленной миллиметровой бумаги. Пропорциональная зависимость между
площадью пятна и концентрацией препарата наблюдается в пределах от 1,0 до 10
мкг. При большем содержании препарата на пластинку наносят часть экстракта.
Содержание препарата в анализируемой
пробе в мг/л (Х) рассчитывают по формуле:
А х S
2
Х = ------,
Р х S
1
где:
А - количество, мкг, стандартного раствора
препарата;
S -
площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;
1
S -
площадь пятна пробы, кв. мм;
2
Р - количество,
мл, воды, взятой на анализ.
3. Требования
техники безопасности
Соблюдать требования техники
безопасности, обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями, УФ-светом.
4. Разработчики
Д.б.н. М.А. Клисенко,
к.х.н. Н.И. Киселева, С.И. Гнед (ВНИИГИНТОКС).