Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
28 мая 1986 г. N 4119-86
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДИМЕТИЛСУЛЬФОКСИДА И ЕГО МЕТАБОЛИТА
ДИМЕТИЛСУЛЬФОНА МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
В САХАРНОЙ СВЕКЛЕ, КАРТОФЕЛЕ И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
1. Краткая
характеристика веществ
1.1. Название по номенклатуре СЭВ, ИСО: диметилсульфоксид (метилсульфоксид).
Химическое название: диметилсульфоксид.
Структурная формула диметилсульфоксида:
CH -SO-CH .
3 3
Эмпирическая формула диметилсульфоксида:
C H SO.
2
6
Молекулярная масса диметилсульфоксида
78.
Синонимы: димексид.
Физико-химические свойства. Диметилсульфоксид - бесцветная жидкость или
кристаллы с
температурой плавления 18,5 °С, температура кипения - 189 °С
20 20
при 760
мм рт. ст.,
86 °С при
18 мм рт. ст., п - 1,4770, d -
Д 4
1,1014.
Смешивается с водой, спиртом, бензолом. ЛД
орально - 4 - 28 г/кг,
50
внутривенно -
2,4 - 4 г/кг. Токсичность диметилсульфоксида меньше,
чем у
растворов хлорида
натрия, лишен
тератогенной активности. МДУ в продуктах
растительного
происхождения (свекла, бобы, зерно и
др.) 1 -
8 мг/кг.
Применяется в
качестве стимулятора роста в дозе 10 кг/га.
1.2. Химическое название: диметилсульфон.
Структурная формула: CH -SO -CH .
3 2 3
Эмпирическая формула: C H SO .
2 6 2
Молекулярная масса 94.
Физико-химические свойства: белое
кристаллическое вещество с температурой плавления 238 °С,
растворим в воде, нитрометане, спирте. Является
метаболитом диметилсульфоксида в окружающей среде.
2. Методика
определения диметилсульфоксида
и диметилсульфона в
сахарной свекле, картофеле
и зеленой массе методом газожидкостной
хроматографии
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на экстракции диметилсульфоксида из анализируемых образцов хлороформом, а
диметилсульфона - нитрометаном,
концентрировании экстрактов и газохроматографическом определении диметилсульфоксида и диметилсульфона
с использованием пламенно-ионизационного детектора. Количественное определение
проводят по методу абсолютной калибровки с помощью калибровочного графика.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
┌─────────────────────────┬────────────────────────────────┬──────────────┐
│Наименование
показателей │ Диметилсульфоксид
│Диметилсульфон│
│ ├─────────────────┬──────────────┤ │
│ │свекла, картофель│ листья
│ │
├─────────────────────────┼─────────────────┼──────────────┼──────────────┤
│1.
Диапазон определяемых │2,0 - 50 мг/кг
│2,0 - 50 мг/кг│2,0 - 50 мг/кг│
│концентраций │ │ │ │
│2.
Предел обнаружения │0,02
мкг │0,02 мкг │0,02 мкг │
│3.
Предел обнаружения в │2,5
мг/кг │2,5 мг/кг │2,0 мг/кг │
│пробе │ │ │ │
│4.
Среднее значение │89,5% │93,5% │93,5% │
│определения
стандартных │ │ │ │
│количеств │ │ │ │
│5.
Число параллельных
│10 │11 │9 │
│определений,
n │ │ │ │
│6.
Стандартное отклоне-
│8,8 │7,9 │9,6 │
│ние, S
│ │ │ │
│7.
Доверительный интервал│89,5 +/- 5,9%
│93,5 +/- 5,7% │93,5 +/- 7,4% │
│среднего
при Р = 0,95 и │ │ │ │
│n
- 1 │ │ │ │
└─────────────────────────┴─────────────────┴──────────────┴──────────────┘
2.1.3. Избирательность метода
Определению не мешают гербициды,
применяемые в посевах сахарной свеклы и картофеля (ленацил,
2,4-Д, метоксихлор, эптам и
др.).
2.2. Реактивы и
материалы
Диметилсульфоксид, хч, ТУ 6-09-3818-77.
Диметилсульфон, ч, ТУ 6-09-4719-79.
Нитрометан, ч, ТУ 6-09-11-876-77.
Хлороформ, ГОСТ 215-74.
Натрия сульфат безводный, хч, ГОСТ 4166-76.
Натрия сульфит безводный, ГОСТ 195-77.
Стационарная жидкая фаза: карбовакс 20 М, нанесенный в количестве 5,0% на инертон AW (фр. 0,20 - 0,25 мм).
Азот газообразный, ГОСТ 9293-74, в
баллоне с редуктором.
Водород, ГОСТ 3022-70, в баллоне с
редуктором.
Силикагель КСК (фр. 0,20 - 0,25 мм), ГОСТ
3956-76.
2.3. Приборы,
аппаратура, посуда
Хроматограф серии "Цвет" с
пламенно-ионизационным детектором.
Колонка стеклянная длиной 1,30 м и
внутренним диаметром 3 мм.
Колбы мерные, мензурки, цилиндры, ГОСТ
1770-74.
Колбы конические со шлифом емкостью 100
мл, ГОСТ 10394-72.
Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74.
Воронки конусообразные, d 56, ГОСТ
6613-75.
Концентраторы или колбы для отгонки
растворителя, ГОСТ 10394-72.
Пробирки градуированные со шлифом, ГОСТ 10515-75.
Ступка с пестиком фарфоровая.
2.4. Подготовка к
определению
2.4.1. Приготовление стандартных и
калибровочных растворов
Стандартный раствор диметилсульфоксида
с концентрацией 5 мг/мл готовят растворением навески 0,0500 г в 10 мл
хлороформа.
Стандартный раствор диметилсульфона
с концентрацией 5 мг/мл готовят растворением навески 0,0500 г в 10 мл нитрометана.
Срок хранения растворов в холодильнике 1
месяц.
2.4.2. Построение калибровочных графиков
При построении калибровочных графиков для
определения диметилсульфоксида и диметилсульфона
готовят 2 набора искусственных смесей: в пробирки с притертыми пробками
помещают 5; 10; 15; 20; 30; 40; 50 мкл стандартных
растворов, что соответствует 25; 50; 75; 100; 150; 200; 250 мкг этих веществ.
Стандартные количества диметилсульфоксида растворяют
в 1 мл хлороформа и хроматографируют по 1 мкл каждый. Стандартные количества диметилсульфона
растворяют в 1 мл нитрометана и хроматографируют
по 1 мкл каждый. Хроматографирование
каждого раствора проводят трижды. На хроматограммах
измеряют высоту соответствующих пиков, вычисляют среднее арифметическое и
строят графики зависимости высоты пика вещества от его количества.
2.4.3. Кондиционирование хроматографической колонки
Инертон с нанесенной на него стационарной жидкой фазой засыпают в хроматографическую колонку, устанавливают ее в термостат
хроматографа и стабилизируют в токе азота в течение 8 - 10 час. при температуре
150 °С, не подключая к детектору.
2.5. Отбор проб
Отбор проводится в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,
продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем
Главного государственного санитарного врача СССР 21 августа 1979 г., N 2051-79.
2.6. Проведение
определения
2.6.1. Определение диметилсульфоксида
в свекле и картофеле
В 10 г измельченной на терке пробы
засыпают 13 г сульфита натрия безводного, заливают 15 - 20 мл хлороформа и
встряхивают в течение часа. После чего растворитель сливают в отгонную колбу,
экстракцию повторяют 10 мл свежего хлороформа. Экстракты объединяют и
выпаривают в токе воздуха до объема 1 мл. Хроматографируют
аликвоту 1 - 2 мкл.
2.6.2. Определение диметилсульфоксида
в зеленой массе
10 г нарезанных или натертых листьев
смешивают с 3 г силикагеля и 20 г безводного сульфата натрия и растирают в
ступке до полного измельчения листьев.
Растертую массу переносят в коническую
колбу, заливают 15 - 20 мл хлороформа и встряхивают в течение часа. Далее
проводят обработку пробы, как описано в п. 2.6.1.
2.6.3. Определение диметилсульфона
в свекле, картофеле и зеленой массе
10 г пробы измельчают и заливают 15 мл нитрометана, встряхивают пробу в течение часа и сливают
растворитель в отгонную колбу. Остаток заливают еще 5 мл нитрометана
и встряхивают 0,5 часа, после чего отфильтровывают экстракт в ту же отгонную
колбу. Отгонную колбу помещают в стакан с теплой водой
и экстракт концентрируют в токе воздуха до 1 мл. Хроматографируют
1 - 2 мкл.
Условия хроматографирования:
-12
- рабочая шкала электрометра 100 х 10 мА;
- скорость протяжки картограммы 200 мм/ч;
- колонка стеклянная размером 130 х 0,3 см, заполненная инертоном AW с
5% карбовакса 20 М;
- температура термостата
колонок для диметилсульфоксида (I) - 80°,
диметилсульфона (II) - 100 °С:
испаритель для I - 100
°С;
II - 150
°С;
- расход газа-носителя через колонку 40
мл/мин.;
- расход водорода 60 мл/мин.;
- расход воздуха 600 мл/мин.;
- объем, вводимый в испаритель, 1 - 2 мкл;
- линейность детектирования для I - 0,03 -
0,50 мкг;
II - 0,02 -
0,50 мкг;
- абсолютное время удерживания при данных
условиях для I - 4 мин. 12 с;
II - 8 мин.
Хроматографируют каждую пробу трижды, измеряют высоты пиков, вычисляют среднее
значение высоты и по калибровочному графику для соответствующего вещества
находят количество диметилсульфоксида или диметилсульфона в аликвоте
экстракта.
2.7. Обработка
результатов анализа
Содержание диметилсульфоксида
(диметилсульфона) в пробе (Х) в мг/кг вычисляют по
формуле:
100 х А х V
2
Х = ------------,
V х Р х R
1
где:
А
- количество I (или
II)
в аликвоте, найденное по калибровочному
графику, мкг;
V -
объем аликвоты, вводимой в
хроматограф, мл;
1
V -
общий объем экстракта, мл;
2
Р - навеска
анализируемой пробы, г;
R
- среднее значение
определения стандартных количеств, найденное
предварительно,
%.
3. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима
и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР N 2455 от 20.10.1981.
4. Разработчики
Пиленкова Инна Иосифовна, Фатьянова Анна Давыдовна.
Всесоюзный научно-исследовательский
технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений (ВНИТИГ), г.
Уфа.