Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
1 июля 1986 г. N 4120-86
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ
ПЕСТИЦИДОВ И ПРОДУКТОВ ИХ РАЗЛОЖЕНИЯ
(ГАММА-ИЗОМЕРА ГХЦГ,
АЛЬФА-ИЗОМЕРА ГХЦГ, ГЕПТАХЛОРА,
АЛЬДРИНА, КЕЛЬТАНА, ДДЭ,
ДДД, ДДТ) В ВОДЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
1. КРАТКАЯ
ХАРАКТЕРИСТИКА ПРЕПАРАТОВ
Альдрин. C H Cl . Молекулярная
масса 364,94.
12 8 6
1,2,3,4,10,10-Гексахлор-1,4,4а,5,8,8а-гексагидро-1,4-эндо-экзо-5,8-
диметанонафталин
- белое кристаллическое вещество
с Т пл. 105 - 104,5 °С.
-5
Растворимость
при 20° в 100 мл растворителя: воде - 2
х 10 г, этиловом
спирте - 9
г, ацетоне - 159 г,
бензоле - 350 г, н-гексане -
98 г,
четыреххлористом
углероде - 105 г. Стабилен к действию щелочей. Термически
-4
устойчив.
Упругость паров при 25 °С - 8 х 10 Па.
Выпускается в форме 50-процентного смачивающегося порошка. Применяется
за рубежом (в
СССР применение запрещено) в качестве инсектицида для борьбы
с саранчевыми и почвообитающими вредителями,
а также с
вредителями
хлопчатника и в
качестве протравителя семян. ЛД - 55
мг/кг. ПДК в воде
50
водоемов - 0,002
мг/л.
Гамма-изомер гексахлорциклогексана (линдан). C H Cl . Молекулярная
6 6 6
масса 290,86.
1,2,3,4,5,6-Гексахлорциклогексан -
белое кристаллическое вещество без
запаха. Т
пл. - 111,0
- 112,2 °С.
Растворимость при 20° в
100 мл
-4
растворителя в
воде 7 х 10 г,
ацетоне - 43,5 г, бензоле - 28,9
г,
этиловом спирте - 6,4 г, диэтиловом эфире -
20,8 г, петролейном эфире - 3,5
г. Стабилен к действию сильных кислот. Под действием щелочей
превращается в
-4
трихлорбензол. Упругость паров - 12 х 10 Па.
Выпускается
в форме смачивающегося порошка,
концентрата эмульсии и
гранулированного
препарата. Применяется в качестве инсектицида комплексного
действия.
ЛД - 125 мг/кг. ПДК в воде - 0,02 мг/л.
50
Альфа-изомер гексахлорциклогексана (альфа-бензолгексахлорид) -
1,2,3,4,5,6-гексахлорциклогексан (альфа-изомер) -
белое кристаллическое
вещество с Т пл. - 157 -
158,5 °С (при 288 °С разлагается). Практически не
растворим в
воде. Растворим в
бензоле, хлороформе, этиловом
спирте,
этиловом эфире. ЛД - 500
мг/кг.
50
Гептахлор. C H Cl . Молекулярная масса 373,35.
10 5 17
1,4,5,6,7,7-Гептахлор-4,7-эндометилен-3а,7,7а-тетрагидроиндан -
белое
кристаллическое вещество
со слабым камфорным запахом. Т пл. - 95 - 96 °С.
Практически не
растворим в воде.
Хорошо растворим в бензоле,
ксилоле,
толуоле,
этиловом спирте. Стабилен при
воздействии влаги, света, высокой
-4
температуры.
Упругость пара при 20 °С - 533,2 х 10 Па.
Выпускается
в виде 25%
концентрата эмульсии. Применяется в качестве
инсектицида при
обработке семян. ЛД - 90 мг/кг. ПДК в
воде - 0,05 мг/л.
50
Кельтан. C H OCl .
Молекулярная масса 370,43.
14 9 5
1,1-Бис-(п-хлорфенил)-2,2,2-трихлорэтанол - бесцветное кристаллическое
вещество. Т пл. - 78,5 - 79 °С. Практически не
растворим в воде. Растворим
в бензоле,
метиловом и этиловом спиртах, н-гексане. В щелочной среде при
нагревании
разлагается. Устойчив к
действию концентрированной серной
кислоты.
Выпускается
в виде 20%
концентрата эмульсии и
18,5-процентного
смачивающегося
порошка. Применяется в качестве контактного акарицида. ЛД
50
- 575 мг/кг. ПДК
в воде - 0,02 мг/л.
ДДТ. C
H Cl . Молекулярная масса 354,5.
14 9
5
4,4-Дихлордифенилтрихлорэтан - белое кристаллическое вещество. Т пл. -
-6
108,5 -
109 °С. Давление паров при 20 °С - 19 х 10 Па. Практически не
растворим в воде. Растворимость при 24 °С в 100 мл растворителя: в ацетоне
- 40,3
г, бензоле -
44 г, диэтиловом
эфире - 27,5 г, четыреххлористом
углероде -
18 г, н-гексане - 97 г, этиловом спирте - 2,2 г. Стабилен в
кислой среде,
разрушается под действием
щелочей. ЛД - 250 - 400 мг/кг.
50
ПДК в воде -
0,002 мг/л.
ДДД. C
H Cl .
Молекулярная масса 329,0.
14 10
4
4,4-Дихлордифенилдихлорэтан -
белое кристаллическое вещество
без
запаха. Т пл. -
112 °С. Практически не растворим в воде, хорошо растворим в
бензоле,
ацетоне, метаноле, н-гексане, ЛД -
3400 мг/кг. ПДК в воде -
50
0,002 мг/л.
ДДЭ. C
H Cl . Молекулярная масса 318,0.
14 9
4
4,4-Дихлордифенилдихлорэтилен - белое кристаллическое вещество с Т пл.
- 88
°С. Растворимость в воде -
0,014 мг/100 мл. Хорошо растворим
в
ацетоне, н-гексане, бензоле. ПДК в
воде - 0,002 мг/л.
2. МЕТОДИКА
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ
И ПРОДУКТОВ ИХ РАЗЛОЖЕНИЯ
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении определяемых
соединений из воды н-гексаном,
очистке полученного
экстракта концентрированной серной
кислотой с
последующим определением с
помощью последовательного сочетания
газожидкостной и
тонкослойной хроматографии. Последовательное сочетание
хроматографических
методов используется для
повышения надежности
идентификации определяемых соединений
в результате анализа
аликвоты
конечного экстракта
пробы сначала с
помощью газожидкостной, а затем с
помощью тонкослойной
хроматографии. Кроме того, для
повышения надежности
идентификации при
определении с помощью
газожидкостной хроматографии
используется анализ
на двух неподвижных
фазах различной полярности.
Повышение надежности
идентификации при определении с помощью тонкослойной
хроматографии достигается
хроматографированием в
следующих системах
подвижных растворителей: 1) н-гексан; 2) гексан -
ацетон (6:1);
3) 1-процентный
раствор ацетона в н-гексане и при
использовании различных
проявляющих реактивов
для обнаружения соединений
на хроматограммах
(азотнокислое
серебро, о-толуидин). Совпадение объемов удерживания
и
величин R определяемых
соединений с этими же величинами для
стандартных
f
соединений позволяет
значительно повысить достоверность
идентификации.
Условия разделения
как в случае
газожидкостной, так
и в случае
тонкослойной хроматографии
позволяют провести раздельное определение 8-ми
соединений при
их нахождении в смеси в одной анализируемой пробе.
Для повышения представительности анализа
и снижения пределов обнаружения (при определении хлорорганических пестицидов в
подземных водах, водоемах рыбохозяйственного
назначения и т.п.) концентрирование анализируемых соединений осуществляется с
помощью экстракционного извлечения из 5 - 10 л воды бензолом, находящимся в
сополимере стирола с 2% дивинилбензола, помещенном в стеклянную колонку.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Минимально детектируемые количества
анализируемых соединений с помощью газожидкостной хроматографии составляют:
альфа-изомер ГХЦГ, гамма-изомер ГХЦГ, гептахлор, альдрин - 0,01 нг, кельтан, 4,4'-ДДТ, 4,4'-ДДД, 4,4'-ДДЭ - 0,02 нг. Линейный динамический диапазон детектирования находится
в пределах 0,01 - 1,7 нг.
Минимально открываемые количества
анализируемых соединений на пластинках с окисью алюминия 0,5 - 1,0 мкг, на
пластинках "Силуфол" - 0,2 - 0,5 мкг.
Пределы обнаружения, средние значения определения, стандартные отклонения и
доверительные интервалы приведены в таблице 1 и таблице 2.
Таблица 1
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ С ПОМОЩЬЮ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ (n = 4, Р
= 0,95)
┌──────────┬────────────┬────────────┬───────────┬─────────────┬─────────────┐
│Соединение│ Предел
│ Среднее │Стандартное│Относительное│Доверительный│
│ │обнаружения,│ значение
│отклонение,│ стандартное │ интервал, % │
│ │ мг/л
│определения,│
% │отклонение, %│ │
│ │ │ %
│ │ │ │
├──────────┼────────────┼────────────┼───────────┼─────────────┼─────────────┤
│Гамма-ГХЦГ│0,00008 │97,2 │2,13 │2,19 │3,39 │
│Гептахлор │0,00008 │96,9 │4,37 │4,51 │6,95 │
│Альдрин │0,00008 │94,8 │3,97 │4,19 │6,32 │
│Кельтан │0,0002 │94,4 │4,51 │4,78 │7,17 │
│ДДЭ │0,0002 │94,0 │2,56 │2,72 │4,07 │
│ДДД │0,0002 │95,8 │3,90 │4,07 │6,20 │
│ДДТ │0,0002 │96,0 │4,72 │4,92 │7,51 │
└──────────┴────────────┴────────────┴───────────┴─────────────┴─────────────┘
Таблица 2
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ С ПОМОЩЬЮ
ТОНКОСЛОЙНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ (n = 7, Р
= 0,95)
|
Предел обнару-
жения, мг/л
|
Среднее значение
определения, %
|
Стандартное
отклонение, %
|
Относительное
стандартное
отклонение, %
|
Доверительный
интервал, %
|
|
0,005
|
93,0
|
10,0
|
10,7
|
7,7
|
2.2. Реактивы и
растворы
Ацетон, чда, ТУ
6-09-3513-75.
Аммиак водный, чда,
ГОСТ 3780-74.
Алюминия окись для хроматографии 2 ст.
активности, ч, ТУ 6-09-5296-78.
Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74.
Кальций сернокислый, чда,
ГОСТ 3210-77.
Кислота серная, ч,
ГОСТ 4204-77.
Натрий сернокислый безводный, ч, ГОСТ 4106-76.
н-Гексан, ч, ТУ
6-09-3375-78.
Пластинки для тонкослойной хроматографии
"Силуфол" UV-254 (ЧССР).
Силикагель ЛС 5/40 м для тонкослойной
хроматографии с 13% гипса (ЧССР, Хемапол).
Силикагель КСК N 2, ГОСТ 3956-76.
Сополимер стирола с 2% дивинилбензола,
размер гранул 0,5 - 1 мл (полупродукт при производстве ионообменных сорбентов).
Для отмывки сополимера от мономеров, не
вошедших в реакцию сополимеризации, 20 г сополимера
помещают в делительную воронку на 250 мл, заливают бензолом и оставляют на 2
часа, периодически встряхивая. Затем сливают бензол и сополимер, заливают новой
порцией растворителя. Отмывку продолжают до тех пор, пока в остатке после
упаривания слитого бензола не будет характерного запаха мономеров.
Кислота соляная, ч,
ГОСТ 3118-77, водный раствор (1:1).
Кислота азотная, ч,
ГОСТ 4461-77, водный раствор (1:1).
Хроматон N, 0,16 - 0,20 мм, промытый кислотой и силанизированный
ДМХС с 5% SЕ-30 (ЧССР, Хемапол).
Хромосорб W, 80 - 100 меш, промытый кислотой и силанизированный
ДМХС с 3% OV-17.
Серебро азотнокислое, хч,
ГОСТ 1277-75.
2-Феноксиэтанол, хч,
ТУ 6-09-9398-77.
о-Толуидин, ч,
ТУ 6-09-66-75.
Этиловый спирт, 96-процентный, ТУ
6-09-1710-77.
Перекись водорода, хч
(30% водный раствор), ГОСТ 10929-76.
Проявляющий реактив N 1. 0,5 г
азотнокислого серебра помещают в мерную колбу на 100 мл, приливают 5 мл
дистиллированной воды, 7 мл аммиака и доводят до метки ацетоном. В готовый
раствор можно добавить 0,2 мл перекиси водорода. Раствор следует хранить в
колбе с притертой пробкой в темном месте. Годен для
использования в течение 3-х дней. Для обнаружения определяемых соединений на
пластинке 9 х 12 см расходуется 8 - 10 мл раствора.
Проявляющий реактив N 2. 0,25 г
азотнокислого серебра помещают в мерную колбу на 100 мл, приливают 2,5 мл
дистиллированной воды, 5 мл 2-феноксиэтанола, доводят до метки ацетоном и
добавляют 3 капли 30-процентного раствора перекиси водорода.
Проявляющий реактив N 3. 0,5 г о-толуидина помещают в мерную колбу на 100 мл и доводят до
метки этиловым спиртом.
Стандартные растворы: 10 мг
соответствующего пестицида (изомеры ГХЦГ, гептахлор, кельтан, ДДТ, ДДД, ДДЭ, хч)
помещают в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки н-гексаном.
Хранят в склянках с притертыми пробками в холодильнике.
2.3. Приборы и
посуда
Ротационный испаритель любого типа, ТУ
25-11-917-74.
Воронки делительные емкостью 100 и 500
мл, тип VIII, ГОСТ 3613-75.
Колбы мерные емкостью 10, 50 и 100 мл,
ГОСТ 1770-74.
Пипетки емкостью 1, 5 и 10 мл, ГОСТ
20292-74.
Фильтры бумажные, ТУ 6-09-1678-77.
Сито капроновое 100 меш (1600 отверстий
на кв. см).
Пластинки стеклянные 9 х 12 или 12 х 18
см.
Пульверизатор стеклянный для обработки
пластинок, ГОСТ 10391-74.
Камера для опрыскивания пластинок, ТУ
25-11-430-70.
Камера хроматографическая,
ГОСТ 10565-75.
Шкаф сушильный, ТУ 64-1-1411-76.
Газовый хроматограф с детектором по
захвату электронов ("Цвет"-106 и др.).
Водяная баня, ТУ 46-22-603-75.
Электроплитка, ГОСТ 306-76.
Аппарат для измельчения силикагеля любой
марки.
Стеклянный лабораторный холодильник ХПГ,
ГОСТ 9499-70.
Вакуумный водоструйный стеклянный насос,
ГОСТ 10696-75.
Источник ультрафиолетового света, ТУ
3-3-1304-75.
Аппарат для встряхивания любого типа, ТУ
64-1-1081-73.
2.4. Отбор проб и
подготовка к определению
2.4.1. Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,
пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем
Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 за N 2051-79.
2.4.2. Приготовление пластинок для ТСХ с
тонким слоем окиси алюминия. Смешивают 50 г просеянного через сито 100 меш
окиси алюминия, 5 г сернокислого кальция и 75 мл дистиллированной воды. Смесь
размешивают в фарфоровой ступке или аппарате для встряхивания в течение 15
минут. Около 10 г сорбционной массы наливают на стеклянную пластинку (9 х 12
см) или около 20 г на пластинку 13 х 18 см, покачивая
равномерно распределяют по поверхности. Сушат в горизонтальном положении
при комнатной температуре в течение 18 - 20 часов или 20 минут при комнатной
температуре, а затем 45 минут в сушильном шкафу при температуре 110 °С. Хранят
в эксикаторе.
2.4.3. Приготовление пластинок с тонким
слоем силикагеля. 35 г силикагеля КСК, просеянного через сито 100 меш,
смешивают с 2 г сернокислого кальция и 90 мл дистиллированной воды в фарфоровой
ступке или на аппарате для встряхивания в течение 15 мин. Нанесение на
пластинку сорбционной массы проводят так, как описано выше. Порция сорбционной
массы рассчитана на 10 пластинок. Пластинки сушат на воздухе при комнатной
температуре 12 часов и затем активируют в сушильном шкафу при 110 °С в течение 30 минут. Хранят в эксикаторе.
Если пластинки с тонким слоем силикагеля
КСК темнеют после облучения УФ-светом, силикагель
перед измельчением следует очистить от примесей. Для этого силикагель заливают
на 18 - 20 часов водным раствором соляной кислоты (1:1), затем кислоту сливают,
промывают силикагель водой до нейтральной реакции промывных вод, заливают
водным раствором азотной кислоты (1:1) и кипятят в круглодонной колбе в течение
2 - 3 часов. Кислоту сливают, промывают силикагель водой до нейтральной реакции
промывных вод, сушат в сушильном шкафу 4 - 6 часов при 130 °С,
измельчают и просеивают через сито 100 меш.
При использовании для приготовления
пластинок силикагеля ЛС 14 г этого силикагеля смешивают с 38 мл
дистиллированной воды. На одну пластинку наносят 5 - 7 г сорбционной массы и
далее поступают, как описано выше.
При использовании пластинок "Силуфол" (ЧССР) проводят их предварительную промывку
аммиаком. Для этого пластинку помещают в хроматографическую
камеру, на дно которой налит аммиак. После подъема фронта растворителя до конца
пластинки ее вынимают из камеры и сушат на воздухе в вытяжном шкафу до
исчезновения запаха аммиака. Непосредственно перед использованием пластинку
активируют в сушильном шкафу при 65 °С в течение 4
минут.
2.5. Определение
хлорорганических пестицидов методами
газожидкостной и тонкослойной хроматографии
Пробу воды (250 мл) помещают в
делительную воронку и извлекают хлорорганические пестициды тремя порциями н-гексана (3 х 30 мл). Продолжительность одной операции
экстрагирования 3 минуты. К объединенному гексановому
экстракту приливают 10 мл серной кислоты, насыщенной безводным сернокислым
натрием, и осторожно несколько раз встряхивают. Кислотный слой отбрасывают.
Обработку гексанового слоя кислотой повторяют до тех
пор, пока кислота не станет бесцветной. Очищенный гексановый
экстракт промывают несколькими порциями (около 10 мл) дистиллированной воды до
нейтральной реакции промывных вод, сушат безводным сернокислым натрием (10 - 15
г) и удаляют растворитель на ротационном испарителе до объема 0,3 - 0,5 мл, а
затем досуха на воздухе. Сухой остаток растворяют в 1 мл н-гексана
и вводят в хроматограф 3 - 5 мкл.
При необходимости
определения пестицидов в пробах на уровне 0,01 - 1,0 мкг/л и ниже пробу воды (5
- 10 л) пропускают со скоростью 80 - 100 мл/мин. через колонку, подготовленную
следующим образом: 20 г сополимера стирола с 2% дивинилбензола, предварительно
отмытого бензолом от продуктов, не вошедших в реакцию сополимеризации,
и набухшего в бензоле, переносят с водой в стеклянную колонку (длина 40 см, внутренний диаметр 2,15 см) с краном на
конце. Для набухания сополимер помещают в делительную воронку на 250 мл и
заливают избытком бензола на 1,5 - 2 часа. Высота слоя сополимера в колонке -
21 см, количество бензола, связанное сополимером, - 44 - 46 мл. Сверху и снизу
слой сополимера ограничивают тампонами из стекловаты. После
окончания пропускания воды оставшуюся воду в колонке отсасывают с помощью
вакуумного водоструйного насоса, затем на 40 - 60 минут заливают чистым
бензолом и собирают 100 мл бензольного элюата, содержащего концентрируемые пестициды, со скоростью
2 мл/мин. С полученным бензольным элюатом
поступают так, как это описано выше.
Условия хроматографирования (хроматограф
Цвет-106 с детектором
по
захвату электронов
с постоянной скоростью
рекомбинации): стеклянная
спиральная колонка
(длина 1 м,
внутренний диаметр 3 мм), заполненная
хроматоном N, 0,16 - 0,20 мм, промытым кислотой и силанизированным ДМХС с
5% SE-30 (или
хромосорбом
100/120 меш, промытым
кислотой и
силанизированным ДМХС
с 3% OV-17;
скорость газа-носителя (азот
особой
чистоты) через
колонку - 60 мл/мин.,
скорость поддувочного
газа (азот
особой чистоты)
- 150 мл/мин.; температура термостата
колонок, детектора и
испарителя -
190, 230, 210 °С соответственно; шкала
электрометра - 20 х
-12
10 А; скорость
диаграммной ленты потенциометра - 240
мм/час. Параметры
удерживания хлорорганических пестицидов
приведены в таблице
3.
Количественное определение
анализируемых соединений проводят
по методу
абсолютной
калибровки из двух параллельных определений.
Таблица 3
ПАРАМЕТРЫ УДЕРЖИВАНИЯ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ
┌──────────┬─────────────────────────────────────────────────────┐
│Соединение│ Неподвижная фаза │
│ ├──────────────────────────┬──────────────────────────┤
│ │ SЕ-30 │ OV-17 │
│ ├────────────┬─────────────┼────────────┬─────────────┤
│ │ Абсолютное │Относительное│
Абсолютное │Относительное│
│ │удерживание,│
удерживание │удерживание,│ удерживание │
│ │ с
│ │ с │ │
├──────────┼────────────┼─────────────┼────────────┼─────────────┤
│Альфа-ГХЦГ│96 │0,46 │64,0 │0,48 │
│Гамма-ГХЦГ│130 │0,62 │85,0 │0,64 │
│Гептахлор │169
│0,80 │108,0 │0,81 │
│Альдрин │210 │1,00 │133,0 │1,00 │
│<*> │ │ │ │ │
│Кельтан │294 │1,4 │188,0 │1,41 │
│ДДЭ │473 │2,25 │307,0 │2,31 │
│ДДД │651 │3,10 │538,0 │4,04 │
│ДДТ │840 │4,00 │585,0 │4,40 │
└──────────┴────────────┴─────────────┴────────────┴─────────────┘
--------------------------------
<*> Внутренний стандарт.
После
проведения определения методом
газожидкостной хроматографии
оставшуюся часть
экстракта пробы наносят на хроматографическую
пластинку на
расстоянии 1,5 см от ее края с помощью шприца или
микропипетки в одну точку
так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Справа
и слева от пробы наносят
стандарты анализируемых
соединений в количестве
1, 2, 4
мкг. Затем
пластинку помещают в камеру для хроматографирования,
в которую за 30 минут
до проведения
хроматографирования налит
подвижный растворитель. При
использовании
пластинок с тонким
слоем окиси алюминия
или силикагеля
хроматографирование
проводят в н-гексане или
смеси н-гексана и ацетона
(6:1) (для
соединений, у которых
величина R в гексане
ниже 0,3). При
f
использовании
пластинок "Силуфол" в качестве
подвижного растворителя
используют 1%
раствор ацетона в н-гексане. После того,
как фронт
растворителя поднимется
на 10 см, пластинку извлекают из камеры, отмечают
границу фронта
растворителя и сушат
на воздухе в вытяжном шкафу. Затем
пластинку
обрабатывают проявляющим реактивом и подвергают действию УФ-света
в течение 10 -
15 минут.
Пластинки
следует располагать на
расстоянии 20 см
от источника
УФ-света. При использовании проявляющих
реактивов N 1
и N 2
хлорорганические пестициды обнаруживаются на хроматограммах
в виде
серо-черных пятен на белом фоне, при использовании
проявляющего реактива N
3 - в виде
коричневых пятен на желтом фоне. Величины R
приведены в таблице
f
4.
Таблица 4
ВЕЛИЧИНЫ R ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ
f
┌──────────┬──────────────────────────────────────────────────────────────┐
│Соединение│ Подвижный
растворитель │
│ ├────────────────────────┬────────────────────────┬────────────┤
│ │ Гексан │ Гексан
- ацетон (6:1) │ 1% р-р
│
│ │ │ │ ацетона в │
│ │ │ │ гексане │
│ ├────────┬───────┬───────┼────────┬───────┬───────┼────────────┤
│ │ окись │силика-│Силуфол│
окись │силика-│Силуфол│ Силуфол │
│ │алюминия│гель │
│алюминия│гель │
│ │
├──────────┼────────┼───────┼───────┼────────┼───────┼───────┼────────────┤
│Альфа-ГХЦГ│0,45 │0,34 │0,20
│ │0,55 │0,30
│0,24 │
│Гамма-ГХЦГ│0,34 │0,20 │0,11
│0,52 │0,28 │0,21
│0,15 │
│Гептахлор │0,76
│0,65 │0,42 │0,85 │0,70 │0,60
│0,46 │
│Альдрин │0,83 │0,69 │0,58
│1,0 │0,95 │0,73
│0,62 │
│Кельтан │0,05 │0,03 │0,0
│0,40 │0,30 │0,15
│0,04 │
│ДДЭ │0,78 │0,66 │0,48
│0,87 │0,74 │0,66
│0,52 │
│ДДД │0,30 │0,40 │0,16
│0,62 │0,50 │0,32
│0,20 │
│ДДТ │0,61 │0,50 │0,27
│0,75 │0,63 │0,80
│0,31 │
└──────────┴────────┴───────┴───────┴────────┴───────┴───────┴────────────┘
2.6. Обработка
результатов анализа
Оценку содержания хлорорганических
пестицидов в пробе при определении с помощью газожидкостной хроматографии
проводят по следующей формуле:
100 х А х Н х V
2 2
Х =
-----------------,
Н х V х
V х R
1 1
где:
X - содержание препарата в пробе, мг/л;
А
- количество стандарта
соответствующего препарата, введенное
в
хроматограф, мг;
Н
и Н -
высоты пиков препаратов
на хроматограммах стандартного
1
2
раствора и пробы
соответственно, мм;
V -
объем экстракта пробы, введенный в хроматограф, мкл;
1
V -
общий объем экстракта пробы, мкл;
2
V - объем пробы, л;
R - степень определения, найденная
предварительно, %.
Оценку содержания хлорорганических
пестицидов в пробе при определении с помощью тонкослойной хроматографии
проводят путем визуального сравнения размера пятен и интенсивности пятен,
интенсивности их окраски со стандартами. Количественное определение может быть
проведено с использованием денситометра ВИАН-170.
Содержание хлорорганических пестицидов в
пробе рассчитывают по следующей формуле:
100 х А
Х = -------,
Р х R
где:
Х - содержание препарата в пробе, мг/л;
А - количество препарата, найденное путем
сравнения со стандартом или посредством денситометрирования,
мкг;
Р - объем анализируемой пробы, мл;
R - степень определения, найденная
предварительно, %.
3. ТРЕБОВАНИЯ
БЕЗОПАСНОСТИ
Соблюдаются обычные требования по технике
безопасности, необходимые при работе с органическими растворителями, кислотами
и щелочами.
4. Настоящие Методические указания
подготовлены на основании разработок В.Д. Чмиля и
З.Ф. Юрковой (ВНИИГИНТОКС, Киев), а также на
основании уточнения и унификации Методических указаний, утвержденных Минздравом
СССР ранее:
- Определение ДДТ, ДДЭ, ДДД, альдрина, дильдрина, гептахлора, кельтана, метоксихлора, эфирсульфоната и
других ядохимикатов в воде, продуктах питания, кормах и биологических средах
хроматографией в тонком слое. N 1112-73 от 30.07.73;
- Определение остаточных количеств хлорорганических пестицидов в присутствии полихлорированных бифенилов в
воде методом газожидкостной хроматографии с детектором по захвату электронов. N
1540-76 от 20.12.76;
- Методические указания по определению
хлорорганических пестицидов в воде, продуктах питания, кормах и табачных
изделиях хроматографией в тонком слое. N 2142-80 от 28.01.1980.
5. Методические указания апробированы:
филиал ВНИИГИНТОКСа (Бунатян
Ю.А., Геворгян А.А.).