Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1987 г. N 4337-87
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПСИНА-М И БМК ПРИ СОВМЕСТНОМ
ПРИСУТСТВИИ В ПЕРСИКАХ, ФЕЙХОА И ХУРМЕ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны В.М. Григой, Е.Г. Дауровой (НИИЦиГС).
Краткая характеристика препаратов дана в
Методических указаниях N 3164-84. Топсин-М,
топсин-НФ-44. В процессе метаболизма и при гидролизе образуется биологически
активное соединение - системный фунгицид БМК, метил-N-(2-бензимидазолил)-карбамат.
Принцип метода. Метод основан на
определении метилтиофаната и БМК методом ТСХ после
извлечения из растительного материала раствором азотной кислоты (pH 1) и очистке экстракта путем перераспределения в системе
вода-хлороформ и в тонком слое силикагеля.
Метрологическая характеристика метода.
Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 107. Метод
специфичен. Определению метилтиофаната в БМК не
мешают другие пестициды, применяемые в сельском хозяйстве для защиты персика и
субтропических культур.
Таблица 107
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТИЛТИОФАНАТА И БМК
┌──────────────────────┬──────────────┬───────────────────────────────────┐
│ Параметры │
Пестицид │ Анализируемый объект │
│ │ ├───────────┬───────────┬───────────┤
│ │ │ персики
│ фейхоа │
хурма │
├──────────────────────┼──────────────┼───────────┼───────────┼───────────┤
│Диапазон
определяемых │Метилтиофанат
│0,04 - 0,20│0,03 - 0,20│0,04 - 0,20│
│концентраций,
мг/кг │БМК │0,06 - 0,20│0,05 - 0,20│0,05
- 0,20│
│Предел
обнаружения, │Метилтиофанат
│2,0 │0,9 │2,0 │
│мкг │БМК │1,5 │1,4 │1,5 │
│Предел
определения, │Метилтиофанат
│0,04 │0,03 │0,03 │
│мг/кг │БМК │0,06 │0,05 │0,05 │
│Среднее
значение │Метилтиофанат
│83,0 │85,8 │84,1 │
│определения,
% │БМК │85,1 │87,1 │86,8 │
│Стандартное │Метилтиофанат
│+/- 9,0 │+/- 8,2 │+/- 8,4 │
│отклонение,
% │БМК │+/- 8,8 │+/- 8,1 │+/- 8,4 │
│Доверительный
интервал│Метилтиофанат │+/- 9,5 │+/- 7,8 │+/- 8,0 │
│среднего (p = 0,95, │БМК │+/- 9,3 │+/- 7,7 │+/- 8,0 │
│n
= 6), % │ │ │ │ │
└──────────────────────┴──────────────┴───────────┴───────────┴───────────┘
Реактивы и материалы. Азотная кислота ч.
Вода дистиллированная. Вата обезжиренная гигроскопическая. Ацетон особой
чистоты. Аммиак водный ч.д.а. Хлороформ. Бромфеноловый
синий ч.д.а. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Этилацетат ч. Азотнокислое серебро, ч.д.а., 1-процентный водный раствор. Ледяная
уксусная кислота х.ч. Этиловый спирт. Бумага
фильтровальная. Стандартные растворы метилтиофаната и
БМК в хлороформе (100 мкг/мл). Срок хранения в холодильнике 2 мес. Проявляющий
реагент: 50 мл 1-процентного водного раствора азотнокислого серебра смешивают с
50 мл 0,05-процентного раствора бромфенолового синего
в ацетоне. Хранят в холодильнике в течение месяца.
Приборы,
аппаратура, посуда. Колбы: лабораторные конические на 250 мл;
круглодонные для
отгонки растворителей на 100 мл. Аппарат для встряхивания.
Воронки делительные
на 150 мл. Мерные цилиндры на 50
и 100 мл. Пластинки
"Силуфол"
УФ или "Силуфол". Камера для хроматографирования.
Испаритель
254
ротационный. Воронки
химические на 150
мл. Камера для
опрыскивания
хроматографических пластинок. Пульверизатор стеклянный.
Ход анализа. Экстракция и очистка
экстрактов. Навеску пробы 25 г тщательно измельчают, заливают 40 мл водного
раствора азотной кислоты (pH 1) и экстрагируют в
течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Пробу выдерживают в течение 20
мин. при минус 4 °C и экстракт фильтруют через обезжиренную
вату в делительную воронку. Остаток промывают 20 мл охлажденного водного
раствора азотной кислоты. Экстракты объединяют, подщелачивают 10-процентным
раствором водного аммиака до pH 7, добавляют в пробу
40 мл хлороформа и встряхивают 3 мин. После разделения фаз (10 мин.)
хлороформный слой переносят через безводный сульфат натрия в колбу для отгонки
растворителя на 100 мл и отгоняют при температуре 40 °C до 0,4 - 0,5 мл.
Определение пестицидов методом ТСХ. Пробу
наносят на хроматографическую
пластинку "Силуфол" УФ
или "Силуфол". Слева
от пробы наносят стандартные
254
растворы метилтиофаната и БМК
и хроматографируют в системе растворителей
хлороформ-этилацетат-ледяная
уксусная кислота в объемном соотношении 5:5:1.
Величина R метилтиофаната
0,51 + 0,03;
R БМК 0,37 +/- 0,02. Можно
f f
использовать систему
диэтиловый
эфир-гексан
(5:1). Величина R
f
метилтиофаната 0,40
+/- 0,03; R БМК
0,12 +/- 0,3. После высушивания
f
пластинки нагревают
в течение 10
мин. при 70 °C, затем
обрабатывают
проявляющим
реагентом. Фон пластинки обесцвечивают 2,5-процентным раствором
уксусной
кислоты. Линейность детектирования метилтиофаната
сохраняется в
пределе 0,3 - 5,0
мкг, БМК - 1,0 - 5,0 мкг. Метилтиофанат проявляется в
виде сиреневых пятен на желтом фоне, БМК - в виде синих
пятен. Обнаружение
пестицидов можно
проводить в УФ-свете при использовании пластинок
"Силуфол"
УФ . Зоны локализации
проявляются в виде сиреневых пятен. Нижние
пределы
254
обнаружения
составляют 1,0 мкг для обоих пестицидов.
Обработка результатов анализа.
Количественно метилтиофанат и БМК определяют путем
сравнения интенсивности окраски и размеров площади пятен исследуемого вещества
в пробе и стандартного раствора. Содержание анализируемого соединения в плодах
(X, мг/кг) вычисляют по формуле:
100 AS
2
X = -------,
S P
1
где:
A - количество фунгицидов в стандартном
растворе, мкг;
S ,
S - площади
пятен соответственно стандартного раствора и пробы,
1
2
кв. мм;
P - масса исследуемой пробы, г.
Требования безопасности. Соблюдать общие
правила по технике безопасности, необходимые при работе с химическими
реактивами и пестицидами.