Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1987 г. N 4358-87

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ 1-КАРБАМОИЛ-3(5)-МЕТИЛПИРАЗОЛА

И 3(5)-МЕТИЛПИРАЗОЛА В ВОЗДУХЕ ПРИ ИХ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

Краткая характеристика препарата. 1-Карбамоил-3(5)-метилпиразол (КМП) - ингибитор нитрофикации (см. с. 506, т. 1). В воздухе может находиться в виде аэрозоля. В воздухе рабочей зоны ОБУВ КМП 0,5 мг/куб. м.

3(5)-Метилпиразол (МП) - продукт разложения КМП. Легколетуч, давление пара при 25 °C 27 Па. В воздухе может находиться в виде паров и аэрозоля. В воздухе рабочей зоны ОБУВ МП 0,5 мг/куб. м.

Принцип метода. Определение основано на хроматографировании анализируемых соединений в тонком слое пластинок "Силуфол" с последующим обнаружением зон локализации препаратов путем обработки реактивом Паули после предварительного облучения УФ-светом. Отбор проб проводят с концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента", пенополиуретан эластичный).

Метрологическая характеристика метода. Предел измерения в воздухе МП 0,04 мг/куб. м, КМП - 0,06 мг/куб. м (при отборе 25 л воздуха). Предел определения в анализируемом объеме пробы 1 мкг для МП и 1,5 мкг для КМП. Диапазон измеряемых концентраций МП 0,04 - 0,8 мг/куб. м, КМП - 0,06 - 0,8 мг/куб. м. Среднее значение процента обнаружения 94,5. Доверительный интервал среднего результата при p = 0,95 и n = 5 равен +/- 1,95. Граница суммарной погрешности измерения +/- 17,45% для МП и +/- 18,32% для КМП.

Избирательность метода. Определению не мешают соединения, близкие по структуре и области применения, такие как нитрапирин, 6-хлорпиколиновая кислота, аминотриазол (АТГ).

Реактивы и растворы. 1-Карбамоил-3(5)-метилпиразол х.ч. 3(5)-Метилпиразол х.ч. Хлороформ х.ч. Ацетон х.ч. н-Гексан х.ч. Сульфаниловая кислота безводная ч.д.а. Гидроксид калия х.ч., 10-процентный водный раствор. Гидроксид натрия х.ч., 15-процентный водный раствор. Хлороводородная кислота х.ч. концентрированная. Нитрит натрия х.ч., 10-процентный водный раствор. Перманганат калия х.ч., 3-процентный водный раствор. Йодид калия х.ч., 1-процентный водный раствор. Крахмал растворимый х.ч., 3-процентный водный раствор. Дистиллированная вода. Безводный сульфат натрия х.ч. Пенополиуретан (ППУ) эластичный, бесцветный, очищенный ацетоном (12 ч) и хлороформом (36 - 48 ч в аппарате Сокслета), кусочки размером 3 - 5 мм. Фильтры бумажные обеззоленные "синяя лента", предварительно промытые смесью хлороформ - ацетон - эфир (1:1:1) и высушенные. Подвижная фаза гексан - ацетон (1:1); альтернативная - хлороформ - ацетон (2:1). Стандартные растворы КМП и МП, содержащие 10, 50, 100 мкг/мл.

    Приборы,   аппаратура,   посуда.   Аспирационное   устройство.

Фильтродержатели. Ротационный вакуумный испаритель с набором колб.

Аппарат  Сокслета. Поглотительные трубки гофрированные, стеклянные

длиной 7  -  10 см., наполненные 0,5 г ППУ (кусочки размером 3 - 5

мм).  Воронки  лабораторные.  Колбы:  конические  на  50,  100 мл;

круглодонные    со    шлифом    на    100,   150   мл.   Пластинки

хроматографические  "Силуфол"  УФ     размером  15 x 15 см. Камера

                                 254

хроматографическая. Камера для хлорирования (эксикатор) на 2, 3 л.

Пульверизатор стеклянный. Ртутно-кварцевая лампа ПРК-4 или ПРК-2.

Подготовка к определению. Приготовление проявляющих реагентов. 1. Диазотированная сульфаниловая кислота (реактив Паули). Сульфаниловую кислоту (5 г) растворяют в 25 мл 10-процентного раствора гидроксида калия. Охлажденный раствор смешивают с 25 мл 10-процентного раствора нитрата натрия. Этот раствор по каплям при перемешивании прибавляют к охлажденной льдом хлороводородной кислоте (40 мл хлороводородной кислоты + 20 мл дистиллированной воды). Выпавший осадок отмывают на воронке Бюхнера этиловым спиртом и сушат на фильтре. При хранении в темной склянке в холодильнике соль устойчива 3 мес. Для опрыскивания пластин непосредственно перед употреблением готовят 1,5-процентный раствор диазониевой соли в 15-процентном растворе гидроксида натрия.

2. N-галогенирование - йодкрахмальный реагент. Раствор для хлорирования. Смешивают равные объемы 3-процентного раствора перманганата калия и 12-процентного раствора хлороводородной кислоты, фильтруют через бумажный фильтр, хранят в холодильнике. Смесь готовят непосредственно перед употреблением. Проявляющий реагент а - 1-процентный раствор йодида калия; реагент б - 3-процентный раствор крахмала. Непосредственно перед употреблением смешивают растворы а, б и этиловый спирт в соотношении 2,5:2,5:1. Перед опрыскиванием пластинку на 3 - 5 мин. помещают в эксикатор, содержащий раствор для хлорирования, после чего оставляют на воздухе до удаления паров хлора (около 15 мин.) и обрабатывают проявляющим реагентом.

Отбор проб воздуха. Исследуемый воздух со скоростью 5 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель, и 2 поглотительные трубки с ППУ. Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 6 л воздуха. Пробы необходимо анализировать сразу.

Ход анализа. Фильтр помещают в коническую колбу и заливают 10 - 15 мл хлороформа, закрывают притертой пробкой, встряхивают и оставляют на 30 мин. Из первой и второй поглотительных трубок ППУ помещают в две разные колбы, приливают в каждую 25 мл хлороформа, закрывают пробками и оставляют на 15 мин. при периодическом встряхивании. Экстракт с фильтра и с ППУ обеих поглотительных трубок сливают в колбу ротационного испарителя через слой безводного сульфата натрия. Фильтр и ППУ дважды промывают 5 - 10 мл хлороформа, тщательно отжимая при этом. Объединенные экстракты упаривают на ротационном испарителе при температуре бани не выше 30 °C до объема 0,1 - 0,2 мл. Остаток количественно наносят на хроматографическую пластинку.

    Условия  хроматографирования.  Справа и слева от пробы наносят

на  хроматографическую  пластинку стандартные растворы КМП и МП (в

одну  точку), содержащие 1, 3, 5, 7 и 10 мкг соединений. Пластинку

помещают  в  хроматографическую  камеру  со смесью гексан - ацетон

(1:1).  После  поднятия  фронта  растворителя  на  10 см пластинку

вынимают из камеры и оставляют на воздухе для испарения подвижного

растворителя.  После  этого  пластинку  подвергают  УФ-облучению в

течение  40  -  45  мин.  и обрабатывают из пульверизатора рабочим

раствором реактива Паули (на одну пластинку расходуется 1,5 - 2 мл

реактива). Зоны локализации КМП и МП обнаруживаются в виде красных

пятен  на  белом  фоне.  Окраска  пятен  МП  устойчива  в  течение

нескольких дней, а  КМП  -  5 - 10 мин.  Величина  R    для  КМП -

                                                    f

0,8 +/- 0,02;  для  МП  -  0,5 +/- 0,02.   Альтернативные  условия

хроматографирования:  подвижная  фаза  хлороформ  -  ацетон (2:1),

УФ-облучение в течение 45 мин. Затем пластинку помещают в камеру с

хлорирующей  смесью  на  3  -  5  мин.  и проявляют йодкрахмальным

реагентом.

Обработка результатов анализа. Количество препарата в пробе определяют, сравнивая интенсивность окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора. Линейность детектирования соблюдается для КМП в интервале 1 - 20 мкг, а для МП - 0,5 - 20 мкг. Концентрацию препарата в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:

 

                                  G

                             X = ---,

                                 V

                                  20

 

    где:

    G  -  количество  препарата,  найденное в анализируемом объеме

пробы, мкг;

    V    -  объем  воздуха, отобранный для анализа и приведенный к

     20

стандартным условиям, л.

Требования техники безопасности. Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях.