Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1987 г. N 4379-87
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ГЛИФОСАТА, ГЛИФОСИНА И ГЛИЦИНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая
характеристика
препаратов. Глифосат -
N-фосфонометилглицин.
Брутто-формула C H O PN. Молекулярная масса
3 8 5
169,1. Синоним
- раундап. Белое кристаллическое вещество. Т.
пл.
230 °C (с разложением).
Нелетуч,
нерастворим в органических
растворителях, плохо
растворим в воде. В воздухе может находиться
в виде аэрозоля.
ПДК в воздухе рабочей зоны 3,0 мг/куб. м.
Глифосин - бис-фосфонометилглицин.
Брутто-формула C H NO P .
4
11 8 2
Молекулярная
масса 263,096. Белое кристаллическое вещество. Т. пл.
208 - 210 °C (с разложением). Нелетуч,
нерастворим в органических
растворителях. Плохо
растворим в воде. В воздухе может находиться
в виде аэрозоля.
ПДК в воздухе рабочей зоны не установлена.
Глицин
- аминоуксусная кислота.
Брутто-формула C H NO .
2 5 2
Молекулярная масса
75,07. Белое кристаллическое вещество. Т. пл.
233 °C (с разложением). Малолетуч,
плохо растворим в органических
растворителях.
Растворимость в воде
235 г на 100 г. Возможный
метаболит глифосина, глифосата. В воздухе может находиться в виде
аэрозоля. ПДК в
воздухе рабочей зоны не установлена.
Принцип метода. Метод
основан на определении препаратов методом ТСХ (пластинки "Силуфол") с использованием в качестве подвижной фазы
смеси этанол - вода - водный аммиак (22:20:0,25) для определения глифосата и глицина, смеси изопропанол
- вода - водный аммиак (6:6:1) - для глифосина с
последующим обнаружением зон локализации глифосата и
глицина нингидриновым реактивом, глифосина
- о-толидиновым реактивом после реакции
N-галогенирования.
Метрологическая характеристика метода.
Нижний предел измерения в анализируемом объеме раствора, мкг: глифосата - 0,5; глифосина - 1,0;
глицина - 0,25. Нижний предел измерения в воздухе (при отборе 200 л воздуха),
мг/куб. м: глифосата - 0,25; глифосина
- 0,50; глицина - 0,125. Диапазон измеряемых концентраций, мг/куб. м: глифосата - 0,25 - 2,5; глифосина
- 0,50 - 5,0; глицина - 0,125 - 1,25. Граница суммарной погрешности измерения
не превышает +/- 20%.
Избирательность метода. Определению не
мешают соединения, применяющиеся в производстве, фосфор- и азотсодержащие
гербициды, а также исследуемые соединения.
Реактивы,
растворы, материалы. Глифосат 99,5-процентный.
Глифосин
99,5-процентный. Глицин х.ч. Этиловый спирт
96-процентный.
Изопропиловый спирт ч. Бутиловый спирт
нормальный.
Водный аммиак ч.д.а. Ледяная уксусная
кислота. Хлороводородная
кислота х.ч. Нингидрин ч.д.а. о-Толидин ч.
Йодид калия.
Перманганат калия.
Фильтры аэрозольные АФА-ВП-20 или
АФА-ХП-20.
Пластинки "Силуфол" УФ .
254
Подвижная фаза N 1 (для хроматографирования глифосата и
глицина): смешивают этанол, воду, аммиак водный в соотношении 22:20:0,25;
подвижная фаза N 2 (для хроматографирования глифосина): смешивают изопропанол,
воду, аммиак водный в соотношении 6:6:1.
Проявляющий реагент N 1 (нингидриновый): 0,3 г нингидрина
растворяют в 100 мл н-бутанола и приливают 3 мл ледяной уксусной кислоты.
Реактив устойчив в течение 2 недель. Проявляющий реагент N 2 (хлор): получают в
хроматографической камере смешиванием 1 - 2 г калия
перманганата с 10 - 15 мл концентрированной хлороводородной
кислоты непосредственно перед употреблением. Проявляющий реагент N 3 (о-толидиновый): 0,160 г о-толидина
растворяют в 30 мл ледяной уксусной кислоты, добавляют 1 г йодида калия и
доливают водой до 500 мл. Устойчив при хранении в
темном месте в течение 2 недель.
Стандартный раствор N 1 смеси глифосата и глицина концентрации 1000 мкг/мл (для глифосата) и 500 мкг/мл (для глицина) готовят, растворяя
навески 0,0500 г глифосата и 0,0250 г глицина в 50 мл
водно-этанольной смеси (1:1). Раствор устойчив в
течение недели. Стандартный раствор N 2 глифосина
концентрации 1000 мкг/мл готовят, растворяя навеску 0,0500 г в 50 мл водно-этанольной смеси (1:1). Раствор устойчив в течение месяца.
Приборы, посуда. Аспирационное
устройство. Фильтродержатель. Камеры хроматографические стеклянные. Пульверизаторы стеклянные. Микрошприцы. Микропипетки вместимостью 0,1 мл. Колбы
мерные, цилиндры, мензурки. Пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл. Пробирки градуированные с притертыми пробками вместимостью 5
мл. Стаканы химические вместимостью 50 мл. Лампа ПРК-4.
Условия отбора проб воздуха. Воздух со
скоростью 7 - 10 л/мин. аспирируют через аэрозольный
фильтр, помещенный в фильтродержатель. Для анализа
отбирают 200 л воздуха. Срок хранения проб - неделя.
Ход анализа. Подготовка проб. Аэрозольный
фильтр извлекают из фильтродержателя, помещают в
химический стакан, заливают 2,5 мл водно-этаноловой смеси (1:1) и выдерживают 1
ч, периодически встряхивая или помешивая стеклянной палочкой. Экстракт сливают
в градуированную пробирку. Экстракцию с фильтра повторяют 2,5 мл водно-этанольной смеси (1:1), выдерживая 1 ч при встряхивании и
помешивании. Второй экстракт объединяют с первым. Доводят объем в пробирке
точно до 5 мл водно-этанольной смеси (1:1), тщательно
перемешивают.
Условия хроматографирования.
По 0,05 мл полученного раствора наносят на хроматографические
пластинки N 1 и 2. На те же пластинки наносят
стандартные растворы по схеме: раствор для стандартных пятен глифосата и глицина - в 5 градуированных пробирок с помощью
микрошприца или микропипетки вносят 0,05; 0,10; 0,20;
0,30; 0,50 мл стандартного раствора N 1 и доводят объем в каждой пробирке точно
до 5 мл водно-этанольной смесью (1:1); раствор для
стандартных пятен глифосина - в 5 градуированных
пробирок вносят 0,10; 0,20; 0,50; 0,75; 1,0 мл стандартного раствора N 2 и
доводят объем в каждой пробирке точно до 5 мл водно-этанольной
смесью (1:1), раствор для стандартных пятен глифосина
- в 5 градуированных пробирок вносят 0,10; 0,20; 0,50; 0,75; 1,0 мл
стандартного раствора N 2 и доводят объем в каждой пробирке точно до 5 мл
водно-этанольной смесью (1:1).
На линию стандарта пластинки N 1 наносят
по 0,05 мл растворов из пробирок, приготовленных из стандартного раствора N 1,
что соответствует 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 5,0 мкг глифосата
и 0,25; 0,50; 1,0; 1,5; 2,5 мкг глицина.
На линию стандарта пластинки N 2 наносят
по 0,05 мл растворов из пробирок, приготовленных из стандартного раствора N 2,
что соответствует 1,0; 2,0; 5,0; 7,5; 10 мкг глифосина.
Пластинку N 1 помещают в хроматографическую камеру с подвижной фазой N 1, пластинку
N 2 - с подвижной фазой N 2. После хроматографирования
пластинки вынимают из камер, подсушивают в сушильном шкафу при температуре 40 -
50 °C.
Пластинку
N 1 обрабатывают
проявляющим реагентом N
1 с
последующим нагреванием
в сушильном шкафу при температуре
110 -
120 °C. Глифосат и глицин обнаруживают в виде розовых пятен с R
f
0,60 и 0,50
соответственно. Окраска пятен устойчива.
Пластинку N 2 помещают на 20 мин. под
источник УФ-облучения, а
затем на
5 мин. -
в пары проявляющего реагента N 2
(хлора) и
оставляют в
вытяжном шкафу до полного исчезновения запаха хлора.
Далее пластинку
орошают проявляющим реагентом
N 3. Глифосин
обнаруживают в виде
синих пятен на белом фоне с R 0,62.
Окраска
f
пятен устойчива.
Количество глифосата,
глифосина и глицина определяют, сравнивая
интенсивность окраски и площадь пятен проб со стандартными,
интенсивность окраски и площадь которых наиболее близки к пробам.
Обработка результатов анализа.
Концентрацию глифосата, глицина и глифосина
(X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:
GS V
1 2
X = -------,
S V V
2 1 20
где:
G - количество
вещества в стандарте,
наиболее близко
подходящем к пробе, мкг;
S ,
S - площади пятен соответственно
пробы и стандарта, кв.
1
2
мм;
V -
общий объем раствора пробы, мл;
2
V -
объем раствора пробы, взятый для хроматографирования,
мл;
1
V
- объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный
к
20
стандартным
условиям, л.
Требования безопасности. Соблюдать все
необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях.