Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
21 июня 1987 г. N 4334-87
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТМТД И ПРОДУКТА ЕГО ПРЕВРАЩЕНИЯ
ТМТМ В ВОДЕ, ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУРАХ И РАСТИТЕЛЬНОМ
МАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ
1. Краткая характеристика препаратов
приведена в таблице 1.
Таблица 1
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ДИТИОКАРБАМАТОВ
┌───┬───────────────────────────┬─────────────┬─────┬─────────┬───────────┐
│
N │ Препарат │ Структурная
│Мол. │ T , °C │Раствори- │
│п/п│ │ формула
│масса│ пл │мость │
├───┼───────────────────────────┼─────────────┼─────┼─────────┼───────────┤
│1.
│ТМТД │Не
приводится│240,4│146 - 148│Хлороформ, │
│ │(тетраметилтиурамдисульфид)│ │ │ │ацетон, │
│ │ │ │ │ │н.р.
в воде│
├───┼───────────────────────────┼─────────────┼─────┼─────────┼───────────┤
│2.
│ТМТМ (тетраметилтиомочевина│Не
приводится│130,4│- │Хлороформ,
│
│ │ │ │ │ │н.р.
в воде│
└───┴───────────────────────────┴─────────────┴─────┴─────────┴───────────┘
2. Методика определения ТМТД и продуктов
его превращения в различных средах животного и растительного происхождения.
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на хроматографировании
исследуемых соединений в слое сорбента (силикагель, пластинки силуфол) после извлечения их органическим растворителем из
анализируемой пробы.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Диапазон определяемых концентраций 0,01 -
0,5 мг/кг. Чувствительность метода (ТМТД): вода - 0,01 мг/л, доверительный
интервал среднего 81,3 +/- 7,1%; зерновые, растения - 0,1 - 0,5 мг/кг,
доверительный интервал среднего 74,8 +/- 7,9%.
2.1.3. Избирательность метода
Определению не мешают хлор и
фосфорорганические пестициды, могут мешать азотсодержащие соединения.
2.2. Реактивы, растворы
Хлороформ, х.ч.,
ТУ 6-09-788-76.
Ацетон, ч., ГОСТ 2603-79.
Гидроокись натрия, ч.д.а.,
0,5% водный раствор.
Сульфат натрия безводный, ч.д.а., ГОСТ 4166-76.
Бензол, х.ч.,
ГОСТ 5956-75.
Серная кислота, х.ч.,
ГОСТ 4204-77, 10% раствор.
Нитрат висмута основной, ч.д.а., ГОСТ 4110-75.
Иодид калия, х.ч.,
ГОСТ 4232-74.
Сульфат меди, ч., ГОСТ 4165-78.
Уксусная кислота ледяная, х.ч., ГОСТ 18290-72.
Пластинки "силуфол"
(ЧССР).
Стандартный раствор препарата (готовят
отдельно каждый раствор).
10 мг вещества растворяют в 100 мл
хлороформа. Хранят в холодильнике. Срок хранения до 6 мес.
Проявляющие реактивы: N 1 - реактив Драгендорфа. Основной раствор:
А) - 3,85 г основного нитрата висмута
растворяют в 55 мл дистиллированной воды и прибавляют 25 мл ледяной уксусной
кислоты;
Б) - 8 г иодида калия растворяют в 20 мл
дистиллированной воды.
Растворы А и Б
сливают вместе. Срок хранения в темном месте до 6 месяцев.
Рабочий раствор (для обработки
пластинок). К 7 мл основного раствора прибавляют 50 мл дистиллированной воды и
10 мл ледяной уксусной кислоты. Срок хранения в темном месте до 10 дней.
Проявляющий реактив N 2 - 1% водный
раствор сульфата меди.
2.3. Приборы, посуда
Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.
Колбы конические емкостью 100 мл, ГОСТ
10384-72.
Колбы грушевидные для отгонки
растворителей, ГОСТ 23932-79.
Воронки делительные емкостью 250 мл, ГОСТ
25336-82.
Воронки химические, ГОСТ 8613-75.
Испаритель ротационный для отгонки
растворителей ИР-1М, ТУ 25-11-917-79.
Камера хроматографическая,
ГОСТ 23932-79.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-79.
2.4. Подготовка проб к анализу
Отбор проб производится в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб", утвержденными Зам. Главного
государственного санитарного врача СССР N 2051-79.
Отобранные пробы хранят в холодильнике.
Срок хранения 5 - 7 дней после отбора.
2.5. Проведение определения
2.5.1. Экстракция
Вода. К 200 мл воды прибавляют 30 мл
хлороформа, встряхивают 15 минут в делительной воронке. Экстракцию повторяют
дважды. Объединяют хлороформные экстракты, сушат безводным сульфатом натрия,
концентрируют до объема 0,2 - 0,3 мл и остаток количественно наносят на хроматографическую пластинку.
Зерновые, растительные культуры. К 25 г
пробы прибавляют 2 мл серной кислоты (1:1), перемешивают. Пробу заливают 30 -
40 мл смеси хлороформ-ацетон (2:1), встряхивают 30 минут. Отделяют раствор,
экстракцию повторяют дважды. Объединяют экстракт фильтрат, сушат безводным
сульфатом натрия, концентрируют до объема 0,2 - 0,3 мл.
При анализе проб с величиной pH клеточного сока ниже 4 (томаты, вишня и др.) пробу без
прибавления серной кислоты экстрагируют смесью хлороформ-ацетон (2:1). Далее
поступают так, как описано выше.
2.5.2. Определение методом ТСХ
Пробу, сконцентрированную до объема 0,2 -
0,3 мл, количественно наносят на пластинку "силуфол",
смывая остаток в колбе смесью хлороформ-ацетон (2:1). Рядом наносят 2 - 10 мкг
стандартного раствора препаратов. Пластинку хроматографируют
в системе бензол-ацетон (49:0,5). После того, как фронт растворителя поднимется
на 10 см, пластинку вынимают, высушивают на воздухе. Для обнаружения препаратов
пластинку обрабатывают проявляющими реактивами либо N 1, либо N 2.
При обработке реактивом N 1 (реактив Драгендорфа) препараты обнаруживаются: ТМТД - пятно синего
цвета, ТМТМ - пятно оранжевого цвета на светло-коричневом фоне. Окраска
устойчива в течение 15 - 20 минут.
При обработке реактивом N 2 (раствор
сульфата меди) препараты обнаруживаются: ТМТД - пятно ярко-зеленого цвета, ТМТМ
- пятно красно-черного цвета (окраска быстро исчезает).
Величина Rf
составляет: ТМТД - 0,7, ТМТМ - 0,8.
2.6. Количественное определение
Содержание препарата в пробе вычисляют по
формуле:
A
X = -,
P
где:
X - содержание препарата в пробе, мг/кг
(мг/л);
A - количество препарата, найденное путем
сравнения размера и интенсивности пятен пробы и стандартного раствора, мкг;
P - навеска анализируемой пробы, г (мл).
2.7. Требования безопасности
Выполняются в соответствии с
"Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии,
противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях
(отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР",
N 2455-81 от 20.10.81.
3. Разработчики
ВНИИГИНТОКС, Киев.