Утверждены
Минздравом СССР
14 июля 1988 г. N 4655-88
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПСИНА-М В ПЕРСИКАХ, ФЕЙХОА, ХУРМЕ
И ЗЕЛЕНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны Е.Г. Дауровой, В.М. Григой (НИИЦиГС).
Краткая характеристика препаратов дана в
Методических указаниях N 3164-84.
Принцип метода. Метод основан на
газохроматографическом определении метилтиофаната с
ДПР на неподвижной фазе карбовакс 20 М после
экстракции смесью хлороформ-ацетон и очистке экстракта путем перераспределения
в системе водный этанол-хлороформ.
Метрологическая характеристика метода.
Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 108.
Таблица 108
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
┌────────────────────────────────────────────┬────────────────────────────┐
│ Параметры │ Анализируемый объект │
│ ├─────────────┬──────────────┤
│ │ персики,
│ зеленая │
│ │хурма,
фейхоа│растительность│
├────────────────────────────────────────────┼─────────────┼──────────────┤
│Диапазон
определяемых концентраций, мг/кг │0,02
- 0,12 │0,20 - 0,60 │
│Предел
определения, мг/кг │0,02 │0,20 │
│Предел
обнаружения, мкг │0,5 │1,0 │
│Среднее
значение определений, % │83,1 │73,6 │
│Стандартное
отклонение, % │+/-
4,6 │+/- 7,7 │
│Доверительный интервал среднего (p = 0,95, │+/- 5,7 │+/- 9,4 │
│n
= 5), %
│ │ │
└────────────────────────────────────────────┴─────────────┴──────────────┘
Избирательность метода. Метод специфичен.
Определению метилтиофаната не мешают другие
соединения, применяемые для защиты персика и субтропических культур.
Реактивы и материалы. Хлороформ. Ацетон
особой чистоты. Сульфат натрия безводный, ч.д.а.
Этиловый спирт 60-процентный. Бумага фильтровальная. Вода дистиллированная.
Стандартный раствор метилтиофаната в ацетоне (1
мкг/мл) - срок хранения в холодильнике 2 мес. Азот особой чистоты, газообразный.
Карбовакс 20 М 15-процентный на хроматоне
N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм). Алиезон-L 15-процентный на хроматоне
N-AW-DMCS (0,20 - 0,25 мм). Вата обезжиренная.
Приборы, аппаратура, посуда. Хроматограф
"Цвет-100 М", модель 164 с ДПР. Ротационный вакуумный испаритель.
Колбы: лабораторные конические на 250 мл; круглодонные для отгонки
растворителей на 100 мл. Аппарат для встряхивания. Мерные цилиндры вместимостью
1 и 10 мл. Пробирки на 5 мл с притертыми пробками. Воронки делительные на 150
мл. Микрошприц на 10 мкл.
Колонка спиральная стеклянная размером 100 x 0,3 см.
Ход анализа. Экстракция и очистка
экстрактов. Навеску пробы плодов (25 г) измельчают, заливают 50 мл смеси
растворителей хлороформ-ацетон в объемном соотношении 9:1 и экстрагируют в
течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Экстракт фильтруют в круглодонную
колбу на 250 мл через слой безводного сульфата натрия, нанесенного на вату. В
остаток добавляют 25 мл смеси хлороформ-ацетон (9:1) и встряхивают еще раз в
течение 15 мин. Экстракты объединяют, отгоняют на ротационном испарителе при
температуре 40 °C до объема 0,2 - 0,4 мл и высушивают на воздухе досуха.
Остаток тщательно растворяют в 0,40 - 0,45 мл хлороформа, вносят в колбу 5 мл
охлажденного 60-процентного этилового спирта и перемешивают содержимое. Пробу
фильтруют через смоченный водой фильтр в делительную воронку, а остаток в колбе
последовательно промывают 3 мл 60-процентного этилового спирта, 10 мл
дистиллированной воды, переносят через фильтр в ту же делительную воронку. В
пробу добавляют 12 мл воды, 30 мл хлороформа и интенсивно встряхивают 3 мин.
После разделения фаз (10 мин.) хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом
натрия и переносят его в колбу перегонного аппарата. Пробу концентрируют под
вакуумом до 0,2 - 0,4 мл, а затем на воздухе досуха, добавляют 2 мл ацетона,
перемешивают и вводят в хроматограф аликвоту объемом
2 - 5 мкл.
Пробу измельченной ножницами зеленой
растительности (5 г) заливают 40 мл смеси растворителей хлороформ-ацетон (9:1)
и далее анализ проводят по схеме описанной экстракции из плодов.
Хроматографирование. Условия хроматографирования приведены в
таблице 109.
Таблица 109
УСЛОВИЯ ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ
┌────────────────────────────────────────┬────────────────────────────────┐
│ Параметры │ Фаза │
│ ├────────────────┬───────────────┤
│ │
карбовакс 20 М │ апиезон-L │
│ │ 15-процентный │ 15-процентный │
├────────────────────────────────────────┼────────────────┼───────────────┤
│Расход
азота, мл/мин. │60 │60 │
│Температура,
°C: │ │ │
│ испарителя │220 │220 │
│ термостата колонок │100 │80 │
│ детектора │230 │230 │
│Объем
пробы, мкл │1 - 5 │1 - 5 │
│Время
удерживания, с │130 │91 │
│Линейный
динамический диапазон, нг │0,5 - 3,0 │1,0 - 5,0 │
│ │
-9 │ -9
│
│Рабочая
шкала электрометра, А │4
x 10 │4 x 10 │
└────────────────────────────────────────┴────────────────┴───────────────┘
Обработка результатов анализа.
Количественно пестицид определяют сравнением высот пиков исследуемого вещества
и стандартного раствора. Содержание метилтиофаната
(X, мг/кг) в анализируемой пробе вычисляют по формуле:
AH V
2 2
X = ------,
H V P
1 1
где:
A -
содержание препарата в объеме стандартного раствора, введенном в
хроматограф, нг;
H ,
H - высоты пиков
соответственно стандартного раствора
и
1
2
анализируемой
пробы, мм;
V -
объем аликвоты экстракта, введенный в хроматограф, мкл;
1
V -
конечный объем экстракта пробы, мл;
2
P - навеска анализируемого образца, г.
Требования безопасности. Необходимо
соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими
растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и
сжатыми газами.