Утверждены
Минздравом СССР
14 июля 1988 г. N 4675-88
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ БАЗУДИНА И ГЕТЕРОФОСА В ПОЧВЕ И ТАБАКЕ
МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая характеристика препарата гетерофоса приведена в Унифицированной методике. Препарат
применяют в качестве почвенного нематоцида и
инсектицида. Краткая характеристика базудина
приведена в Унифицированной методике.
Принцип метода. Метод основан на экстракции
гетерофоса и базудина из
анализируемой пробы почвы смесью ацетона с 0,05 н водным раствором хлорида
кальция (1:1), из проб табака смесью ацетона с водой (1:1), очистке экстрактов
путем переэкстракции и осаждения восков и пигментов с
последующим определением на газожидкостном хроматографе с ТИД.
Метрологическая характеристика метода.
Диапазон определяемых концентраций: базудина - 0,4 -
1,0 мкг, гетерофоса - 2,0 - 5,0 мкг
в пробе. Минимально детектируемое количество базудина
1 нг, гетерофоса - 2,5 нг. Остальные параметры приведены в таблице 27.
Таблица 27
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ
ГЕТЕРОФОСА
И БАЗУДИНА В ПОЧВЕ И ТАБАКЕ МЕТОДОМ ГЖХ
┌─────────┬───────┬──────────┬────────┬───────┬───────┬─────────────┬──────────┐
│Пестицид │Объект │Внесенное │Среднее
│Стан- │Относи-│Доверительный│Предел │
│ │анализа│количество│значение│дартное│тельное│ интервал
│определе- │
│ │ │анализиру-│опреде-
│откло- │стан- │среднего при │ния, мг/кг│
│ │ │емого │ления, %│нение, │дартное│ p = 0,95,
│ │
│ │ │пестицида,│ │+/- % │откло- │n
= 5, +/- % │ │
│ │ │мкг │ │ │нение │ │ │
├─────────┼───────┼──────────┼────────┼───────┼───────┼─────────────┼──────────┤
│Базудин │Почва
│0,4 │85,8 │3,76 │1,72
│4,42 │0,008 │
│ │ │0,75 │88,4 │2,78 │1,24
│3,18 │ │
│ │ │1,0 │93,6 │2,41 │1,07
│2,74 │ │
│ │Табак │0,4 │76,5 │4,52 │2,01
│5,16 │0,016 │
│ │ │0,75 │82,8 │2,52 │1,12
│2,87 │ │
│ │ │1,0 │83,0 │2,45 │1,09
│2,80 │ │
│Гетерофос│Почва │2,0 │86,2 │3,90 │1,74
│4,47 │0,04 │
│ │ │3,75 │89,7 │3,24 │1,44
│3,70 │ │
│ │ │5,0 │94,5 │2,56 │1,14
│2,92 │ │
│ │Табак │2,0 │80,5 │4,86 │2,16
│5,55 │0,08 │
│ │ │3,75 │85,2 │6,06 │2,70
│6,93 │ │
│ │ │5,0 │89,3 │5,52 │2,46
│6,32 │ │
└─────────┴───────┴──────────┴────────┴───────┴───────┴─────────────┴──────────┘
Избирательность метода. Метод селективен. Гетерофос и базудин взаимному определению не мешают. ФОП (метафос, карбофос, фозалон, фосфамид, хлорофос) и
гербициды (атразин, симазин,
пропазин) определению не мешают.
Реактивы и растворы. Ацетон особой
чистоты. Гексан х.ч. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Кислота ортофосфорная ч. Хлорид аммония х.ч. Хлорид кальция х.ч. Азот
особой чистоты (в баллонах с редуктором). Водород электролитический
(системы СГС-2). Хроматон N-супер (0,125 - 0,160 мм)
с 5% ПЭГА. Хроматон N-супер (0,125 - 0,160 мм) с 5%
XE-60. Гетерофос х.ч. Базудин х.ч.
Стандартные растворы смеси гетерофоса и базудина с
содержанием: а) гетерофоса 10, базудина
4 мкг/мл (в ацетоне); б) гетерофоса 2,5, базудина 1 мкг/мл (в ацетоне).
Осаждающий раствор: 5 г хлорида аммония
растворяют в 100 мл дистиллированной воды, смешивают с 10 мл 85-процентной
ортофосфорной кислоты и доводят водой до 1 л.
Приборы и посуда. Хроматограф
"Цвет-106" с ТИД. Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный
испаритель. Воронки делительные. Колбы: конические и круглодонные нормального
шлифа; остродонные; мерные на 100 мл. Микрошприц на 10 мкл. Электромельница. Колонки хроматографические
стеклянные длиной 100 мм с внутренним диаметром 3 мм. Холодильник бытовой.
Секундомер. Бумажные фильтры. Водоструйный насос КМ
1230.
Подготовка к определению. Подготовка хроматографических колонок и их кондиционирование.
Стеклянные колонки моют хромовой смесью, ополаскивают водой, промывают
ацетоном, а затем хлороформом и гексаном. Колонку
просушивают и заполняют сорбентом, используя водоструйный насос. Заполненную
колонку кондиционируют (не подключая к детектору) 20 ч при 200 °C (ПЭГА) и 250
°C (XE-60).
Ход анализа. Экстракция и очистка
экстрактов. Пробу почвы (50 г) помещают в коническую колбу с пришлифованной
пробкой, заливают 100 мл смеси ацетона с 0,05 н хлоридом кальция (1:1) и
встряхивают 30 мин. Экстракцию повторяют еще раз. Объединенные экстракты фильтруют
через бумажный фильтр и переносят в делительную воронку. Пестициды переэкстрагируют в гексан трижды
порциями по 40 мл, каждый раз встряхивая 2 - 3 мин. Гексановые
экстракты объединяют, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема
0,2 - 0,3 мл при 45 - 50 °C и досуха упаривают в токе холодного воздуха. Сухой
остаток растворяют в 1 - 3 мл ацетона и хроматографируют.
Пробу табака (25 г)
помещают в коническую колбу с пришлифованной пробкой, заливают 80 мл смеси
ацетон - вода (1:1) и экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 30
мин. Экстракцию повторяют еще дважды той же смесью порциями по 60 мл,
встряхивают соответственно 30 и 20 мин. Экстракты фильтруют через бумажный
фильтр.
Из объединенных водно-ацетоновых
экстрактов пестициды переэкстрагируют в гексан (трижды порциями по 40 мл), каждый раз встряхивая 2
- 3 мин. Гексановые фракции объединяют, сушат
безводным сульфатом натрия и концентрируют до объема 0,2 - 0,3 мл при 45 - 50
°C. Остатки растворителя удаляют в токе воздуха.
Сухой остаток растворяют в 5 мл ацетона,
прибавляют 25 мл осаждающего раствора и помещают колбу на 1 ч в холодильник при
температуре минус 10 - 12 °C. Содержимое колбы отфильтровывают от восков и
пигментов через бумажный фильтр. Из водно-ацетонового фильтрата пестициды
экстрагируют гексаном трижды по 2 - 3 мин. порциями
по 20 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат
безводным сульфатом натрия и концентрируют при 45 - 50 °C до объема 0,2 - 0,3
мл. Последние порции растворителя удаляют в токе воздуха.
Сухой остаток растворяют в 1 - 5 мл
ацетона и используют для определения. В колонку вводят 2 - 3 мкл полученного раствора.
Условия
хроматографирования. Хроматограф
"Цвет-106" с ТИД.
-12
Рабочая шкала электрометра 100 x 10 А. Скорость движения ленты
самописца 200 мм/ч. Колонка стеклянная длиной 100 см с внутренним
диаметром 3
мм. Носитель - хроматон N-супер (0,125 - 0,160 мм).
Неподвижная фаза
- 5% ПЭГА. Температура колонки 185 °C, испарителя
225 °C.
Скорость газа-носителя (азота)
70 мл/мин. Скорость
водорода 17
- 18 мл/мин.,
воздуха - 160
мл/мин. Минимально
детектируемое количество
гетерофоса
2,5 нг, базудина - 1 нг.
Линейный диапазон детектирования гетерофоса
2,5 - 25 нг, базудина
- 1 - 10 нг. Время
удерживания базудина - 1 мин. 15 с, гетерофоса
- 2 мин. 25 с.
В качестве
альтернативной можно использовать стеклянную колонку длиной 100 см с внутренним
диаметром 3 мм, заполненную хроматоном N-супер с 5%
XE-60.
Условия хроматографирования
те же, что и для колонки с ПЭГА (полиэтиленгликольадипинат).
При этом время удерживания базудина - 1 мин. 3 с, гетерофоса - 2 мин. 6 с.
Обработка результатов анализа.
Количественное определение проводят методом соотношения со стандартами по
высоте пиков. Содержание пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее
значение из двух параллельных определений. Количество пестицида в анализируемой
пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:
100CH V V
1 ст 2
X = ----------------,
H V P (100 - W)
ст 1
где:
C - концентрация стандартного раствора
пестицида, мкг/мл;
H ,
H - высота
хроматографического пика
соответственно
1
ст
исследуемого и
стандартного растворов, мм;
V -
объем пробы, введенный в хроматограф, мкл;
1
V
- объем пробы
стандартного раствора, введенный
в
ст
хроматограф, мкл;
V -
общий объем исследуемого раствора, мл;
2
P - навеска исследуемого образца табака, г;
W - влажность анализируемой пробы, %.
Требования безопасности. Необходимо
выполнять правила безопасности, рекомендуемые для работы с органическими
растворителями, пестицидами и сжатыми газами.