Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
12 декабря 1988 г. N 4742-88
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЕНАМИНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Методические
указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий
промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных
веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов
Министерства здравоохранения СССР и других заинтересованных министерств и
ведомств.
Методические
указания разрабатываются и утверждаются с целью обеспечения контроля
соответствия физических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны их
предельно допустимым концентрациям (ПДК) - санитарно-гигиеническим нормативам,
утверждаемым Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности
внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости
использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния
вредных веществ на состояние здоровья работающих и др.
Методические указания подготовлены в
соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические
требования к воздуху рабочей зоны" и ГОСТ 12.1.016-79 "ССБТ. Воздух
рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных
веществ" и одобрены Проблемной комиссией "Научные основы гигиены
труда и профессиональной патологии". Методические указания являются
обязательными при осуществлении вышеуказанного контроля.
O
//
C H
N-CO-NH-C = C--C
6 11
│ │ \
H C CH O
H М.м. 308,41.
2 \ / 2 4 9
CH
2
Енамин (2-/3-циклогексилуреидо/-циклопентен-1,2-карбоксибутан-1)
- белое кристаллическое вещество, Т. пл. 108 - 109 °C. Растворим в ацетоне,
толуоле, хлороформе, бутаноле.
В воздухе находится в виде аэрозоля.
Енамин относится к классу малотоксичных соединений.
ПДК вещества в воздухе - 1,0 мг/куб. м.
Характеристика
метода
Метод основан на хроматографическом
выделении енамина в тонком слое сорбента с
последующим проявлением хроматограмм спиртовым
раствором йода.
Отбор проб проводится с концентрированием
на фильтр АФА-ВП-20.
Нижний предел измерения вещества в
анализируемом объеме - 1 мкг.
Нижний предел измерения вещества в
воздухе - 0,5 мг/куб. м (при отборе 200 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций в
воздухе - от 0,1 до 5,0 мг/куб. м.
Измерению не мешают полупродукты
производства ленацила (кетоэфир, циклогексилмочевина,
дибутиладипинат, мочевина, циклогексиламин,
аммиак).
Суммарная погрешность измерения не
превышает +/- 25%.
Время выполнения измерения, включая отбор
проб, - около 60 минут.
Приборы,
аппаратура, посуда
Аспирационное устройство.
Стаканы химические, ТУ 25-11-944-74,
вместимостью 50 мл.
Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ
25-11-917-74.
Камера хроматографическая
типа СЦ, ГОСТ 25336-82Е.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.
Микрошприц МШ-10, ГОСТ 8043-75, вместимостью 10 мкл.
Микропипетка, ГОСТ 20202-77, вместимостью
0,1 мл.
Колбы мерные, цилиндры, мензурки, ГОСТ
1770-74.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, различной
вместимости.
Колбы грушевидные для отгонки
растворителя, ГОСТ 10394-72, вместимостью 100 мл.
Реактивы, растворы
и материалы
Енамин, 99,5-процентный.
Этиловый спирт, ГОСТ 18300-72,
технический, ректификат.
н-Гексан, ТУ 6-09-3375-78,
ч.
Ацетон, ГОСТ 2603-79, чда.
Йод, ГОСТ 4159-79, чда.
Подвижный растворитель: н-гексан - ацетон (5:3) по объему. Готовят за 30 минут до хроматографирования.
Проявляющий реактив: 0,1 н спиртовой
раствор йода. Раствор готовят перед употреблением.
Пластинки для тонкослойной хроматографии
"Силуфол" размером 150 x 150 мм (ЧССР).
Стандартный раствор енамина
N 1 с концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1 г енамина
в ацетоне в мерной колбе вместимостью 100 мл.
Стандартные растворы енамина
с содержанием 100 мкг/мл и 10 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением
стандартного раствора N 1 ацетоном. Растворы устойчивы в течение недели.
Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтр. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать
40 л воздуха.
Проведение
измерения
Фильтр с отобранной пробой переносят в
химический стакан и экстрагируют ацетоном порциями по 10 мл 3 раза.
Продолжительность каждой экстракции - 5 минут при периодическом помешивании.
Экстракты собирают в отгонной колбе. Растворитель испаряют досуха сначала на
ротационном испарителе, а затем в токе воздуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл
ацетона.
На хроматографической
пластинке "Силуфол" на расстоянии 15 мм от
края намечают линию старта. На середину линии старта с помощью микрошприца или микропипетки наносят 0,1 мл раствора пробы.
Справа и слева от пятна пробы на расстоянии 15 мм друг от друга наносят
стандартные пятна с содержанием 1, 5, 10, 20, 30, 50 мкг енамина.
Диаметр пятна не должен превышать 10 - 12 мм.
Пластинку
помещают в наклонном положении в хроматографическую
камеру с подвижной фазой,
налитой в таком
количестве, чтобы
пластинка погружалась
в растворитель не
более чем на 0,5 см.
Хроматограмму
развивают на высоту
10 см, вынимают из камеры,
подсушивают на
воздухе в вытяжном
шкафу, обрабатывают из
пульверизатора проявляющим реактивом. При наличии в пробе енамина
на хроматограмме проявляется
четкое желто-коричневое пятно на
одном уровне со
стандартными пятнами.
Значение R енамина
0,8.
f
Окраска пятен
устойчива 4 часа.
Для количественной оценки енамина измеряют планиметром или с помощью прозрачной
миллиметровой бумаги площади пятен пробы и стандартного раствора,
соответствующего ему по интенсивности окраски.
Для количественного измерения енамина на хроматограммах может
быть использован денситометр или другой сканирующий прибор при светофильтре с
длиной волны 436 нм.
Обработка
результатов и расчет концентрации
При использовании планиметра количество
вещества (M) (в мкг) в анализируемом объеме пробы находят по формуле:
m x S
X
M = ------,
S
st
где:
m - содержание енамина на пятне
стандарта, мкг;
S -
площадь пятна пробы, кв. мм;
X
S -
площадь пятна стандарта, кв. мм.
st
При использовании денситометра содержание
енамина в анализируемом объеме находят по отношению
интегральных значений содержаний вещества в пробах и "свидетелях".
Концентрацию вещества в воздухе в мг/куб.
м (C) вычисляют по формуле:
а x в
C = -----,
б x V
где:
а - содержание вещества, найденное в
анализируемом объеме пробы, мкг;
в - общий объем пробы, мл;
б - объем пробы, взятый для анализа, мл;
V - объем воздуха, отобранный для анализа
и приведенный к стандартным условиям, л (см.
Приложение 1).
Приложение 1
Приведение объема воздуха к температуре
20 °C и давлению 760 мм рт. ст. проводят по следующей формуле:
V x (273 + 20) x P
t
20 = -------------------,
(273 + t°) x 101,33
где:
V -
объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
P -
барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт.
ст.);
t° - температура воздуха в месте отбора
пробы, °C.
Для удобства расчета 20 следует
пользоваться таблицей коэффициентов (Приложение 2). Для приведения объема
воздуха к температуре 20 °C и давлению 760 мм рт. ст. надо умножить на
соответствующий коэффициент.
Приложение 2
КОЭФФИЦИЕНТ K ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА
К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ
┌────┬─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┐
│ °C │ Давление P, кПа/мм рт. ст. │
│ ├──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬───────┬───────┬───────┬───────┤
│ │97,33/│97,86/│98,4/
│98,93/│99,46/│ 100/ │100,53/│101,06/│101,33/│101,86/│
│ │
730 │ 734 │ 738
│ 742 │ 746 │ 750
│ 754 │
758 │ 760 │ 764 │
├────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼───────┼───────┼───────┼───────┤
│-30 │1,1582│1,1646│1,1709│1,1772│1,1836│1,1899│1,1963
│1,2026 │1,2058 │1,2122 │
│-26 │1,1393│1,1456│1,1519│1,1581│1,1644│1,1705│1,1768
│1,1831 │1,1862 │1,1925 │
│-22 │1,1212│1,1274│1,1336│1,1396│1,1458│1,1519│1,1581
│1,1643 │1,1673 │1,1735 │
│-18 │1,1036│1,1097│1,1158│1,1218│1,1278│1,1338│1,1399
│1,1400 │1,1490 │1,1551 │
│-14 │1,0866│1,0926│1,0986│1,1045│1,1105│1,1164│1,1224
│1,1284 │1,1313 │1,1373 │
│-10 │1,0701│1,0760│1,0819│1,0877│1,0986│1,0994│1,1053
│1,1112 │1,1141 │1,1200 │
│-6 │1,0540│1,0599│1,0657│1,0714│1,0772│1,0829│1,0887
│1,0945 │1,0974 │1,1032 │
│-2 │1,0385│1,0442│1,0499│1,0556│1,0613│1,0669│1,0726
│1,0784 │1,0812 │1,0869 │
│0 │1,0309│1,0366│1,0423│1,0477│1,0535│1,0591│1,0648
│1,0705 │1,0733 │1,0789 │
│+2 │1,0234│1,0291│1,0347│1,0402│1,0459│1,0514│1,0571
│1,0627 │1,0655 │1,0712 │
│+6 │1,0087│1,0143│1,0198│1,0253│1,0309│1,0363│1,0419
│1,0475 │1,0502 │1,0557 │
│+10 │0,9944│0,9999│1,0054│1,0108│1,0162│1,0216│1,0272
│1,0326 │1,0353 │1,0407 │
│+14 │0,9806│0,9860│0,9914│0,9967│1,0027│1,0074│1,0128
│1,0183 │1,0209 │1,0263 │
│+18 │0,9671│0,9725│0,9778│0,9880│0,9884│0,9936│0,9989
│1,0043 │1,0069 │1,0122 │
│+20 │0,9605│0,9658│0,9711│0,9783│0,9816│0,9868│0,9921
│0,9974 │1,0000 │1,0053 │
│+22 │0,9539│0,9592│0,9645│0,9696│0,9749│0,9800│0,9853
│0,9906 │0,9932 │0,9985 │
│+24 │0,9475│0,9527│0,9579│0,9631│0,9683│0,9735│0,9787
│0,9839 │0,9865 │0,9917 │
│+26 │0,9412│0,9464│0,9516│0,9566│0,9618│0,9669│0,9721
│0,9773 │0,9799 │0,9851 │
│+28 │0,9349│0,9401│0,9453│0,9503│0,9555│0,9605│0,9657
│0,9708 │0,9734 │0,9785 │
│+30 │0,9288│0,9339│0,9891│0,9440│0,9432│0,9542│0,9594
│0,9645 │0,9670 │0,9723 │
│+34 │0,9167│0,9218│0,9268│0,9318│0,9368│0,9418│0,9468
│0,9519 │0,9544 │0,9595 │
│+38 │0,9049│0,9099│0,9149│0,9198│0,9248│0,9297│0,9347
│0,9397 │0,9421 │0,9471 │
└────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴───────┴───────┴───────┴───────┘