Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1989 г. N 4970-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
НОВЫХ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПИРЕТРОИДОВ (ДАНИТОЛ,
ФАСТАК,
ЦИБОЛТ, КАРАТЕ) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Краткая характеристика препаратов
приведена в Методических указаниях N 4344-87. При применении могут находиться в
воздухе в виде аэрозоля.
Принцип метода. Определение основано на хроматографировании анализируемых соединений на неподвижной
фазе SE-30 с ДПР и в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон
локализации препаратов путем обработки раствором нитрата серебра (фастак) или бромфенолового
синего.
Пробы отбирают с концентрированием
(бумажный фильтр "синяя лента" или стеклянный фильтр с пористой
пластинкой).
Метрологическая характеристика метода.
Предел измерения в анализируемом объеме пробы методом ГЖХ 2 нг,
методом ТСХ - 2 мкг. Предел измерения в воздухе (при отборе 40 л воздуха)
методом ГЖХ 0,05 мг/куб. м, методом ТСХ - 0,1 мг/куб. м. Диапазон измеряемых
концентраций методом ГЖХ 0,05 - 0,1 мг/куб. м, методом ТСХ - 0,1 - 0,5 мг/куб.
м. Граница суммарной погрешности измерения: методом ГЖХ - 14,8 - 16,7%, методом
ТСХ - 17,5 - 19,5%.
Избирательность метода. Определению не
мешают наполнители технического препарата.
Реактивы и растворы. Ацетон ч. н-Гексан ч. Безводный сульфат натрия х.ч.
свежепрокаленный. Фильтры бумажные "синяя лента". Аммиак
25-процентный водный. Нитрат серебра х.ч. Лимонная
кислота, 2-процентный раствор. Бромфеноловый синий
(индикатор). Пластинки "Силуфол". Подвижная
фаза гексан - ацетон (4:1).
Проявляющие реагенты:
N 1 - 0,5 г нитрата серебра растворяют в
5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 мл аммиака и доводят объем до 100 мл
ацетоном. Для обработки одной пластинки расходуют 10 мл. После обработки
облучают УФ-светом в течение 30 - 40 мин.;
N 2 - раствор а: 50 мг бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона; раствор б: 0,5 г нитрата серебра растворяют в 20 мл воды и
приливают 60 мл дистиллированной воды. Раствор б
приливают к раствору а и доводят объем раствора до 100 мл ацетоном. На
обработку одной пластинки расходуют 10 мл. После обработки бромфеноловым
реагентом фон пластинки обесцвечивают 2-процентным раствором лимонной кислоты.
Стандартный раствор N 1 (данитола, фастака, циболта, карате), содержащий 100
мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе с
притертой пробкой в 100 мл гексана. Хранят в
холодильнике не дольше 2 мес.
Для ГЖХ. Носитель - хроматон
N-AW с 5% SE-30 (0,16 - 0,20 мм). Азот газообразный особой чистоты. Стандартный
раствор препарата N 2. Для приготовления раствора с концентрацией препарата 2
мкг/мл вносят 2 мл раствора N 1 в мерную колбу на 100 мл и доводят объем до
метки гексаном. Хранят в холодильнике не дольше 2
мес.
Приборы и посуда. Аспиратор для отбора
проб воздуха. Фильтродержатели. Ротационный вакуумный
испаритель для отгонки растворителей. Водяная баня. Колбы: конические на 100
мл; грушевидные; мерные на 50 мл. Воронки химические.
Для ТСХ. Пластинки для хроматографии
"Силуфол". Камера хроматографическая.
Пульверизатор стеклянный.
Для ГЖХ. Хроматограф с ДПР (марки
"Цвет", "Газохром" и др.). Микрошприцы МШ-10 на 10 мкл.
Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм.
Отбор проб. Воздух со скоростью 2 л/мин. аспирируют через помещенный в фильтродержатель
бумажный фильтр "синяя лента" (или стеклянный фильтр Шотта) в течение 20 мин. Отбирают три параллельные пробы.
Пробы хранят в холодильнике не дольше 2 сут.
Ход анализа. Бумажный фильтр, содержащий
аэрозоль, из фильтродержателя переносят в коническую
колбу и заливают 20 мл смеси гексана с ацетоном
(9:1). Пестицид экстрагируют из фильтра в течение 30 мин., экстракцию повторяют
дважды. Объединяют экстракты, сушат безводным сульфатом натрия, сливают в колбу
для отгонки растворителей. Испаряют растворитель до объема 0,2 - 0,3 мл при
температуре не выше 50 °C, а затем досуха на воздухе. Если для поглощения
аэрозоля использовали стеклянный фильтр с пористой пластиной, то поверхность
фильтра дважды смывают ацетоном порциями по 20 мл, тщательно обмывая стенки
фильтра, сливают ацетон через слой сульфата натрия в колбу для отгонки
растворителя, концентрируют до 0,2 - 0,3 мл, а затем испаряют досуха током
воздуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и
проводят определение методом ГЖХ и ТСХ.
Условия
хроматографирования при
использовании метода ГЖХ.
Длина
набивки 0,5 м.
Диаметр колонки 3
мм. Твердый носитель
хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм). Жидкая фаза 5% SE-30.
Температура,
°C: колонки - 220,
испарителя - 240, детектора - 250. Скорость
потока
газа-носителя (азота особой
чистоты) 70 мл/мин. Скорость
движения
диаграммной ленты 240 мм/ч. Объем вводимой пробы 5 мкл.
-12
Рабочая шкала
электрометра 20 x 10 А.
Линейный диапазон
детектирования 2
- 10 нг. Время удерживания приведено в табл. 190.
Таблица 190
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ РАЗДЕЛЕНИЯ
ПРЕПАРАТОВ
┌────────────────────┬───────────────────┬───────────────────────┐
│ Пестицид │ Время удерживания │ Величина R │
│ │ │ f │
│ │ │ (гексан
- ацетон 4:1) │
├────────────────────┼───────────────────┼───────────────────────┤
│Данитол │2
мин. 48 с │0,7 │
│Фастак │5
мин. │0,6 │
│Циболт │5
мин. 18 с │0,4 │
│Карате (2 изомера) │2
мин. │0,7 и 0,6 │
└────────────────────┴───────────────────┴───────────────────────┘
Определение методом ТСХ. Пробу,
сконцентрированную до объема 0,2 - 0,3 мл, количественно наносят при помощи
капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку,
чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5
см от нижнего края пластинки. Колбу с экстрактом 2 - 3 раза смывают диэтиловым эфиром порциями по 0,01 мл, который также
наносят в центр пятна. Справа и слева от пробы наносят серию стандартных
растворов пестицида, содержащих 2, 5, 7 и 10 мкг препарата.
Пластинку с нанесенными растворами
помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30
мин. до хроматографирования налита смесь гексана с ацетоном (4:1). После поднятия фронта подвижного
растворителя на 10 см пластинку вынимают и оставляют на несколько минут на
воздухе для испарения растворителя. Далее пластинку обрабатывают из
пульверизатора раствором нитрата серебра, подсушивают и облучают УФ-светом в
течение 15 - 20 мин. Фастак и карате
проявляются в виде пятен серо-черного цвета. Для обнаружения данитола, циболта, фастака, карате можно использовать
проявляющий реагент N 2. После обработки бромфеноловым
синим и обесцвечивания пластинки раствором лимонной кислоты препараты
проявляются в виде пятен синего цвета.
Обработка результатов анализа.
Количественное определение пестицида проводят по методу абсолютной калибровки.
При определении методом ГЖХ концентрацию
препарата в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:
GV S
2 пр
X = --------,
S V V
ст 1 20
где:
G
- количество препарата
во введенном в хроматограф
стандартном растворе, нг;
S -
площадь пика стандартного раствора препарата, введенного
ст
в хроматограф,
кв. мм;
S -
площадь пика препарата в исследуемом растворе пробы, кв.
пр
мм;
V -
объем экстракта, введенный в хроматограф, мкл;
1
V -
общий объем пробы, мл;
2
V -
объем воздуха, отобранный для анализа
и приведенный к
20
стандартным
условиям, л.
При использовании метода ТСХ количество
препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятен
пробы и стандартного раствора. Строят градуировочный
график зависимости количества препарата (в мкг) от площади. Прямолинейная
зависимость между площадью пятна и содержанием препарата в пятне соблюдается в
интервале 1 - 10 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю
границу диапазона (10 мкг), то для нанесения на пластинку необходимо брать
аликвотную часть экстракта (0,1; 0,2 мл и т.д.) параллельной пробы.
Концентрацию препарата в воздухе (X,
мг/куб. м) вычисляют по формуле:
GV
2
X = -----,
V V
1 20
где:
G
- количество препарата,
найденное в хроматографируемом
объеме пробы, мкг;
V -
объем пробы, взятый для хроматографирования, мл;
1
V -
общий объем пробы, мл;
2
V
- объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к
20
стандартным
условиям, л.
Требования безопасности. Необходимо
соблюдать правила безопасности при работе с органическими растворителями и
токсичными веществами.