Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1989 г. N 5008-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МАВРИКА В ВОДЕ, ПЛОДОВЫХ И ОВОЩНЫХ КУЛЬТУРАХ
МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны Д.Б. Гиренко
(ВНИИГИНТОКС).
Краткая
характеристика препарата. Маврик -
(R)-3-метил-2-
(4-трифторметил-2-хлорфениламино)-бутановой кислоты
(R,S)-3-фенокси-альфа-
цианобензиловый эфир.
Брутто-формула C H ClF N O . Молекулярная масса
26
22 3 2 3
503.
Общепринятое название - флувалинат. Вязкая жидкость
желтоватого цвета.
Растворим в
органических растворителях, практически нерастворим в
воде.
Принцип метода. Метод основан на определении
маврика газожидкостной и тонкослойной хроматографией
после извлечения его из исследуемой пробы органическим растворителем, очистке
от коэкстрактивных веществ в системе
жидкость-жидкость.
Метрологическая характеристика метода.
Диапазон определяемых концентраций 0,005 - 0,1 мг/кг (мг/л). Остальные
параметры приведены в таблице 68.
Таблица 68
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЯ МАВРИКА
(p = 0,95, n = 5)
┌───────────────┬──────────────────┬─────────────┬───────────────┐
│
Анализируемый │ Среднее значение │
Стандартное │ Доверительный │
│ объект
│ определения при │ отклонение, │ интервал
│
│ │ n = 15, % │ %
│ среднего, % │
├───────────────┴──────────────────┴─────────────┴───────────────┤
│ ГЖХ │
│
│
│Вода │85,6 │+/- 2,3 │+/- 2,8 │
│Яблоки │76,0 │+/- 5,5 │+/- 6,6 │
│Картофель │79,7 │+/- 2,1 │+/- 2,5 │
│
│
│ ТСХ │
│ │
│Вода │83,8 │+/- 2,6 │+/- 3,1 │
│Яблоки │75,4 │+/- 2,4 │+/- 2,9 │
│Картофель │78,8 │+/- 5,8 │+/- 7,0 │
└───────────────┴──────────────────┴─────────────┴───────────────┘
Избирательность метода. В условиях
определения методом ГЖХ могут мешать препараты из группы синтетических пиретроидов, при определении методом ТСХ мешают препараты,
обнаруживаемые с помощью аммиаката серебра.
Реактивы и растворы. Для экстракции.
Ацетон х.ч. н-Гексан ч.
Сульфат натрия ч.
Для ГЖХ. Неподвижная фаза 5% SE-30 на хроматоне N-AW (0,16 - 0,20 мм). Азот газообразный особой
чистоты. Стандартный раствор маврика (5 мкг/мл).
Хранят в холодильнике не более 5 дней.
Для
ТСХ. Серебра нитрат х.ч. Пластинки "Силуфол".
Подвижная фаза -
гексан-ацетон (4:1). Проявляющий реагент - раствор
аммиаката серебра. 0,5 г
AgNO растворяют в 5
мл дистиллированной воды, прибавляют 7 - 10 мл аммиака
3
(22,5%) и
доводят объем раствора до 200 мл ацетоном. Основной
раствор
маврика (200 мкг/мл) в
ацетоне. Хранят в
холодильнике не более 2 мес.
Водный раствор
йода 0,1 - 0,2-процентный.
Приборы и посуда. Посуда мерная (колбы
конические, пипетки, цилиндры и др.). Воронки делительные и конические. Колбы
грушевидные, круглодонные на 25; 50 и 250 мл. Аппарат для встряхивания. Лампа
ртутно-кварцевая. Камера хроматографическая.
Пульверизаторы стеклянные. Ротационный вакуумный испаритель. Хроматограф
"Цвет" или другой марки, снабженный ДПР. Микрошприц
на 10 мкл. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним
диаметром 3 мм, заполненная носителем на высоту 0,5 - 0,6 м.
Ход анализа. Экстракция и очистка
экстрактов. Пробу воды (500 мл) помещают в делительную воронку и экстрагируют маврик дважды н-гексаном порциями
по 30 мл. Объединенные гексановые экстракты сушат
безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе при
температуре бани 40 °C до объема 0,3 - 0,5 мл. Досуха отгоняют на воздухе.
Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют.
Навеску 25 г растительного материала (яблок,
картофеля) помещают в коническую колбу, приливают 50 мл смеси ацетон-вода (7:3)
и встряхивают 30 мин. Экстракцию повторяют дважды, объединяют ацетоно-водные экстракты, фильтруют и переносят в
делительную воронку, прибавляют 300 мл дистиллированной воды, хорошо
перемешивают и экстрагируют маврик дважды гексаном порциями по 30 мл. Объединенные гексановые экстракты сушат безводным сульфатом натрия,
концентрируют на ротационном испарителе. Сухой остаток в колбе растворяют в 1
мл ацетона и далее хроматографируют.
Условия хроматографирования.
При определении маврика методом ГЖХ используют
стеклянную колонку длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм, заполненную
носителем на 0,5 - 0,6 м.
Носитель
хроматон
N-AW (0,16 - 0,20 мм) с 5%
SE-30. Скорость потока
-12
газа-носителя (азота)
50 мл/мин. Шкала электрометра
20 x 10
А.
Температура (°C):
колонки - 220,
испарителя - 240,
детектора - 240.
Вводимый объем 5 мкл. Время удерживания
12 мин. 36 с. Линейный диапазон
детектирования 5
- 50 нг. Минимально детектируемое количество 5 нг.
Метод тонкослойной хроматографии. Пробу,
сконцентрированную до объема
0,1 - 0,2
мл, количественно наносят на пластинку "Силуфол". Параллельно
наносят серию
стандартных растворов с
содержанием маврика 5; 10; 15 мкг.
Хроматографируют
в смеси растворителей гексан-ацетон (4:1).
После
высушивания пластинку
обрабатывают водным раствором
йода (0,1 - 0,2%),
высушивают на
воздухе, затем помещают в сушильный шкаф
на 10 мин. при
температуре 100 °C.
После охлаждения обрабатывают
пластинку раствором
аммиаката серебра и облучают УФ-светом.
Маврик обнаруживается в виде пятна
серо-черного
цвета. Величина R составляет 0,45 +/-
0,05.
f
Обработка результатов анализа. Для
количественного определения измеряют площадь основного пика в пробе и
стандартного раствора (при условии, что пики близки по величине и определение
ведется в диапазоне линейности детектора).
При использовании метода ГЖХ содержание
препарата в пробе (X, мг/кг, мг/л) рассчитывают по формуле:
C
V S
ст 2 пр
X = --------,
S V P
ст 1
где:
C -
количество препарата во введенном в хроматограф
стандартном
ст
растворе, нг;
S -
площадь пика исследуемого раствора, кв. мм;
пр
S -
площадь пика стандартного
раствора препарата, введенного
в
ст
хроматограф, кв.
мм;
V -
объем экстракта, введенный в хроматограф, мкл;
1
V -
общий объем экстракта после упаривания, мл;
2
P - масса (объем) анализируемой пробы, г (мл).
При использовании
метода ТСХ содержание маврика
в пробе (X, мг/кг,
мг/л) вычисляют
по формуле:
A
X = -,
P
где:
A - количество препарата, найденное на
пластинке в пробе, мкг;
P - навеска пробы, г,
л.
Требования безопасности. Необходимо
соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями
и токсичными веществами.