Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1989 г. N 5037-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ КОРБЕЛЯ В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТЕНИЯХ ПШЕНИЦЫ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая
характеристика препарата. Корбель - 4-[3(4-
(1,1-диметилэтил)-фенил)]-[2-метил]пропил-2,6цис-диметил-морфолин.
Брутто-формула C
H NO. Молекулярная
масса 303,5. Общепринятое
20 33
название - фенпропиморф. Агрегатное состояние
- жидкое.
Выпускается в
виде концентрата эмульсии
желтоватого цвета со
слабым ароматическим запахом. Плотность 0,943 при 20
°C, довольно
легко воспламеняется, горюч.
Содержание действующего вещества
составляет 750
г/л. Растворим
во многих органических
растворителях,
плохо растворим в
воде. Стабилен в воде, слабых
растворах кислот и щелочей до 24 ч.
Применяется для борьбы с болезнями на
озимой и яровой пшенице, яровом ячмене. МДУ в ФРГ на зерновых 0,5 мг/кг. Срок
ожидания - 35 дней.
Принцип метода. Метод основан на
извлечении корбеля из растительной пробы, почвы или
воды экстракцией: из воды - органическим растворителем, из почвы и растений -
смесью вода - ацетон (20:1) или подкисленной водой с pH
2 - 3. Переэкстракцию проводят хлороформом или смесью
гексан - ацетон (4:1). Определение проводят методом
ТСХ.
Метрологическая характеристика метода
приведена в таблице 147.
Таблица 147
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА (P = 0,95,
N = 5)
┌───────────┬─────────────┬────────────┬─────────┬───────────┬────────────┐
│Анализируе-│ Диапазон
│ Предел │Среднее │Стандартное│Доверитель-
│
│мый объект │определяемых │обнаружения,│значение │отклонение,│ный интер- │
│ │концентраций,│ мг/кг
или │определе-│ %
│вал, % │
│ │ мкг
│ мг/л │ния,
% │ │ │
├───────────┼─────────────┼────────────┼─────────┼───────────┼────────────┤
│Вода │10 - 50 │0,04 │86 │+/- 5,8 │+/- 7,2 │
│Почва │10 - 100 │0,1 │82 │+/- 5,3 │+/- 13,3 │
│Растения │10 - 100 │0,2 │72 │+/- 7,5 │+/- 9,4 │
└───────────┴─────────────┴────────────┴─────────┴───────────┴────────────┘
Реактивы
и растворы. Ацетон
особой чистоты. Вода
дистиллированная. Хлороформ
х.ч.
н-Гексан
х.ч.
Этанол
96-процентный, ректиф. Бромфеноловый синий,
водорастворимый
индикатор, ч.д.а. Лимонная кислота ч.д.а.,
1-процентный раствор.
Конго красный.
Нитрат серебра ч.д.а. Сульфат натрия безводный х.ч.
Уксусная кислота
ч.д.а., 5-процентный раствор. Пластинки "Силуфол"
УФ . Стандартный
раствор корбеля (0,1
мг/мл в этаноле или
254
ацетоне). Проявляющий
реагент: N 1 - 0,4-процентный раствор конго
красного в
50-процентном этаноле; N 2 -
0,4-процентный раствор
бромфенолового синего в ацетоне
и 3-процентный водный раствор
нитрата серебра
в соотношении 1:1.
Приборы и посуда. Аппарат для
встряхивания. Колбы: круглодонные на 250 мл; мерные на 100 мл. Холодильник
стеклянный для отгонки растворителя. Баня водяная или ротационный испаритель.
Воронки химические и делительные на 500 мл. Цилиндры мерные. Пульверизатор
стеклянный. Камера для хроматографирования
(эксикатор). Капиллярные пипетки для нанесения проб. Микропипетки на 0,1 мл
конические; плоскодонные на 250 мл. Компрессорная установка УК-40-2.
Ход анализа. Экстракция. Пробу воды (250
мл) помещают в делительную воронку и трижды экстрагируют хлороформом или смесью
гексана с ацетоном в соотношении 4:1 порциями по 100,
50, 50 мл в течение 5 мин. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом
натрия (15 г), концентрируют на водяной бане или ротационном испарителе до 0,3
- 0,5 мл.
Навеску воздушно-сухой почвы (100 г) или
измельченных растений
(50 г)
помещают в колбу
для экстракции, приливают
100 мл
водно-ацетоновой смеси
(20:1) или дистиллированной воды,
подкисленной хлороводородной
кислотой до pH 2 - 3, и экстрагируют
корбель на аппарате
для встряхивания в
течение 30 мин. Затем
экстракт фильтруют,
экстракцию повторяют дважды.
Объединенный
экстракт
помещают в делительную воронку на 500 мл. Если экстракцию
проводят подкисленной
водой, то в экстракт добавляют несколько
капель 1
н раствора KOH
до pH 8
- 9, добавляют 100 мл смеси
гексан - ацетон
(4:1) или хлороформа и
встряхивают в течение 3
мин. Переэкстракцию таким
же объемом растворителя повторяют еще
дважды. Экстракт
собирают в круглодонную колбу через воронку с 15%
безводного сульфата натрия. Растворитель отгоняют на
водяной бане
или ротационном
испарителе
до объема 0,5 мл. Остаток наносят на
тонкий слой
пластинок "Силуфол" УФ . Справа от пятна исследуемой
254
пробы наносят стандарт с известной концентрацией корбеля. Диаметр
нанесенного
пятна не должен превышать 1 - 1,5 см.
Хроматографирование. Пластинку с нанесенными пробами помещают
в хроматографическую камеру
с системой растворителей гексан
-
ацетон (1:1)
или гексан -
ацетон - 0,5
н уксусная кислота
(1:2:0,1). Когда
фронт растворителя поднимется до 10 см, пластинку
вынимают и
оставляют на несколько
минут на воздухе до полного
испарения подвижного растворителя. Пластинку
опрыскивают одним из
проявляющих реагентов.
После опрыскивания пластинку помещают под
источник УФ-света - лампу
ПРК-4. На светло-сером фоне проявляются
малиновые пятна корбеля с R
0,87. Для большей контрастности
f
пластинку можно
оросить 1-процентным раствором лимонной кислоты,
после чего
на сине-сером фоне
четко проявятся малиновые пятна
корбеля. После опрыскивания бромфеноловым реагентом
и обработки
5-процентным
раствором уксусной кислоты на желтом фоне пластинки
проявляются
пятна корбеля синего цвета.
Обработка
результатов анализа. Количественное определение
проводят путем
сравнения интенсивности окраски и
размеров пятен
пробы и
стандартных растворов. Содержание препаратов в пробе
(X,
мг/кг)
рассчитывают по формуле:
A
X = -,
P
где:
A - найденное количество корбеля в пробе, мкг;
P - навеска пробы, г.
Требования безопасности. Необходимо
соблюдать меры безопасности, принятые для работы с легковоспламеняющимися
жидкостями и ядовитыми веществами.