Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6070-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ИЗАТРИНА В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
O C H O .
H C-C=CH───┤\ ││ 22 26 3
3 │ │ \_C _O_CH ─┬┬─┬┐ _____
CH
H C-│ / 2 ││
││_CH _// \\ М.м. 338,4.
3
3 │/ \ / 2 \ ___ /
CH O ---
3
Изатрин (ресметрин, бензилфурон).
Действующее начало препарата - (+)-цис,транс(2-бензилфурил-4-метил)хризантемат. Полностью растворяется в 10% спирте этиловом с
образованием бесцветной жидкости.
Внешний вид: воскоподобная масса,
соломенно-желтого цвета, с резким запахом. Т. пл. 43 - 46 °C, Т. кип. 180 °C.
Легко гидролизуется при действии кислот и щелочей.
Препарат эффективен в малых дозировках (0,0025 - 0,01% действующего начала) в
борьбе с широким рядом вредителей - инсектицид
контактного действия.
ЛД
для белых крыс при внутрижелудочном введении равна 840
50
мг/кг, при
ингаляционном - 3650 мг/куб. м.
2. Методика
определения
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на экстракции изатрина органическим растворителем, очистке экстракта и
последующем хроматографировании.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Диапазон определяемых концентраций - 0,02
- 0,4% мг/кг.
Предел обнаружения - 1 мкг.
Число параллельных определений - 5.
_
Среднее значение определения (x) - 87%.
Стандартное отклонение (S, %) - +/- 8,5%.
Доверительный интервал определения при p
= 0,95 и n = 5 87 +/- 10,5%.
2.2. Реактивы и
материалы
Изатрин хч.
Бензол хч, ГОСТ
5955-81.
Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.
Ацетон ч, ГОСТ
2603-79.
Фосфорно-молибденовая кислота, ТУ
6-09-3540-78, 5% водный раствор.
Натрий сернокислый безводный, хч, ГОСТ 4166-76.
Систему подвижных растворителей готовят
за 20 минут до хроматографирования: гексан - бензол в соотношении 1:1.
Стандартный раствор изатрина
в хлороформе, содержащий 100 мкг/мл, готовили в мерной колбе из рабочего
раствора.
Рабочий раствор готовят следующим
образом: в мерную колбу (25 или 50 мл) со шлифом наливают 10 - 15 мл
хлороформа, взвешивают, добавляют 1 - 2 капли изатрина,
взвешивают и доводят объем до метки. По разнице весов между вторым и первым
взвешиванием находят навеску пестицида, рассчитывают концентрацию его. Рабочие
и стандартные растворы устойчивы в течение месяца при хранении в темном и
прохладном месте.
2.3. Приборы и
посуда
Камера для хроматографирования,
ГОСТ 25336-82.
Хроматографические пластинки "Силуфол" (ЧССР).
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ
25-11-917-76.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82.
Аппарат для встряхивания, ТУ
25-11-917-79.
Посуда лабораторная, ГОСТ 25336-82.
Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью
100 мл.
Сушильный шкаф.
2.4. Отбор,
хранение и доставка проб
2.4.1. Отбор проб производится в
соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб
сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды
для определения микроколичеств пестицидов",
утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, от
21.08.1979, за N 2051-79.
2.5. Проведение
определения
Навеску 25 - 40 г измельченного
растительного материала помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают
80 мл смеси ацетон - вода в соотношении 1:1 по объему. Экстрагирование проводят
встряхиванием в течение 30 мин. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр.
Экстракцию повторяют еще два раза. Объединяют экстракты и переносят в
делительную воронку. Прибавляют 200 мл дистиллированной воды, перемешивают и реэкстрагируют изатрин дважды по
30 мл гексаном. Объединенный гексановый
экстракт сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном
испарителе при температуре водяной бани 40 °C до объема 0,2 - 0,5 мл.
2.5.1. Условия хроматографирования
Сконцентрированную пробу количественно
наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую
пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на
расстоянии 2 см от нижнего края пластинки. Справа и слева от пробы наносят
стандартные растворы пестицида, содержащие 1, 2, 5, 10 мкг препарата.
Пластинку с
нанесенными растворами помещают
в
хроматографическую
камеру, в которую
за 30 мин.
до
хроматографирования
залита смесь бензол - гексан (1:1 по объему).
После поднятия фронта подвижного растворителя на 10
см пластинку
вынимают и
оставляют на несколько минут на воздухе для испарения
подвижного растворителя.
После этого пластинку обрабатывают из
пульверизатора
раствором фосфорно-молибденовой кислоты и нагревают
в сушильном
шкафу при температуре 60 °C в течение 5 - 7 минут.
Препарат проявляется
в виде пятен синего цвета на желтом фоне.
Величина R = 0,36 +/- 0,05.
f
2.6. Обработка
результатов анализа
Количество препарата в пробе определяют
сравнением интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора.
Измерение площади проводится с помощью
миллиметровой бумаги. Строится калибровочный график зависимости препарата в мкг
от площади пятен. Прямолинейная зависимость между площадью пятна и содержанием
препарата в пробе соблюдается в интервале 1 - 10 мкг. Если содержание препарата
в пробе превышает верхнюю границу диапазона (10 мкг), то для нанесения на
пластинку необходимо брать аликвотную часть пробы (0,1 - 0,2 мл) параллельной
пробы. Содержание препарата в анализируемой пробе рассчитывают по формуле:
A x S
2
X = ------,
P x S
1
где:
X - содержание изатрина
в анализируемой пробе;
A - содержание препарата в стандартном
растворе, мг/кг;
S -
площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;
1
S -
площадь пятна пробы, кв. мм;
2
P - вес пробы, взятой на анализ, г.
3. Требования
безопасности
Соблюдать все требования безопасности,
рекомендованные для работы с летучими органическими растворителями и со
среднетоксичными пестицидами.