Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6077-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ИВИНА И ЕГО КОМПЛЕКСОВ
В ВОДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
Торговое назначение: Ивин (1); потейтин (Ивин-ян) (2); капанин (Ивин-Х); Ивин-П (4), ТУ 88 УССР 192-076-86.
Химические названия:
(1)
N-окись 2,6-лутидина (N -окись 2,6-диметилпиридина).
//\
// \ C H NO.
│
││ 7 9
/\\ /\
H C \\/ CH М.м. 123,15.
3 N
│
O
(2) Комплекс N-окиси 2,6-лутидина с
янтарной кислотой.
//\
// \ C H N .
│
││ 11 15 5
/\\ /\
H C \\/ CH x HO C(CH ) CO H М.м. 241,24.
3 N 3
2 2 2 2
│
O
(3)
- Комплекс N-окиси
2,6-лутидина с хлористоводородной
кислотой.
//\
//
\
C H NOCl.
│ ││ 7 10
/\\
/\
H C \\/
CH
М.м. 159,6.
3
N 3
│ _
OHCl
(4) - Комплекс N-окиси 2,6-лутидина с пиколиновой кислотой.
//\
//
\
C H N O .
│ ││ 13 14 2 3
/\\
/\
H C \\/
CH //\ М.м.
246,27.
3
N 3 //
\
│ │ ││
O /\\
/
HO C \\/
2 N
Химически чистый препарат Ивин
представляет собой бесцветную, прозрачную жидкость со слабым специфическим
запахом. Комплексы Ивина - вещества со специфическим запахом основного вещества
(Ивина). Ивин хорошо растворим в воде, спирте, ацетоне и др. органических
растворителях, гигроскопичен.
Комплексы Ивина растворимы в воде и
спирте (метиловом и этиловом).
Препараты Ивина и его комплексы устойчивы
в течение года при хранении в герметичной посуде при температуре 20 +/- 5 °C и
влажности не более 80%.
Ивин и его комплексы малотоксичны:
Ивин
- ЛД при
пероральном введении 1390 мг/кг
для белых
50
мышей; для крыс
- 1645 мг/кг;
Ивин-Ян - ЛД для мышей при пероральном введении 4550
мг/кг;
50
Ивин-Х - ЛД для мышей при пероральном введении 2450
мг/кг.
50
Ивин и его комплексы предложены как
высокоэффективные регуляторы роста для овощных культур.
2. Методика
определения Ивина, комплексов Ивина в воде
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод включает упаривание анализируемой
пробы досуха в присутствии соляной кислоты на ротационном испарителе, вымывание
препарата этиловым спиртом, упаривание спирта, нейтрализацию сухого остатка,
экстрагирование бензолом и определение ТСХ.
2.1.2. Метрологическая характеристика
Нижний предел обнаружения, мг/л, -
0,0006.
Диапазон определяемых концентраций, мг/л,
- 0,0006 - 0,605.
Среднее значение определения C, %, -
90,1.
Стандартное отклонение S, %, +/- 7,0.
Относительное стандартное отклонение Sr, %, - 2,2.
Доверительный интервал дельта, %, +/- 4
(n = 10).
2.1.3. Избирательность метода
Определению не мешают неорганические и
органические примеси, присутствующие в воде.
2.2. Реактивы,
растворы и материалы
Ивин и его комплексы, ТУ 88 УССР
192-076-86.
Бензол, чда,
ГОСТ 5955-75.
Бутанол-1, чда,
ГОСТ 6006-78.
Гидроксид калия, чда,
ГОСТ 24363-80.
Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.
Соляная кислота, хч,
ГОСТ 3118-77.
Уксусная кислота, чда,
ГОСТ 61-75, ледяная.
Этиловый спирт, ректификат, ГОСТ 5962-67.
Хроматографические пластинки "Силуфол" UV 254
(ЧССР), размер 150 x 150 и 200 x 200 мм.
Стандартные растворы Ивина в бензоле с
содержанием 0,01 и 0,001 мг/мл. Навеску 100 мг Ивина, помещенную в мерную колбу
на 100 мл, растворяют в бензоле. Рабочие растворы готовят разбавлением
полученного 0,1% раствора. На хроматограмму
наносят: 0,001% (0,01 мг/мл) раствор - 0,1 мл (1 мкг); 0,01 мл (0,1 мкг);
0,0001% (0,001 мг/мл) раствор - 0,5 мл (0,5 мкг); 0,1 мл (0,1 мкг); 0,05 мл
(0,05 мкг).
Растворы стабильны в течение месяца при
хранении в плотно закрытой колбе при температуре 20 +/- 5 °C.
2.3. Приборы,
аппаратура и посуда
Хроматоскоп со светофильтром 254 нм, ТУ 64-1-1618-77.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ
25-11-917-74.
Камера для хроматографирования,
ГОСТ 25336-82.
Весы ВЛП-200, МВ 20М, ГОСТ 24104-80.
Водоструйный насос, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью
100 мл и 25 мл.
Колбы круглодонные на шлифе, ГОСТ
25336-82, вместимостью 500 мл.
Колбы остродонные,
ГОСТ 25336-82, вместимостью 50 мл.
Пипетки мерные, ГОСТ 20292-74, на 1, 2, 5
и 10 мл.
Микропипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1 мл.
Микрошприцы МШ-1, МШ-10, ТУ 2-833-106, на 1 мкл и 10 мкл.
Стеклянный фильтр ХУ-1 пор. 41, ГОСТ
25336-82.
2.4. Подготовка к
определению
Подготовить пластинки "Силуфол" UV 254 размером 5 x 10. На расстоянии 1,5 см
от нижнего края пластинки нанести осторожно, стараясь не повредить поверхность
сорбента, линию старта и линию финиша (4 см от старта).
Хроматографическую камеру за 1 час до начала хроматографирования
заполняют подвижной фазой до уровня 0,5 - 0,7 см. Для контроля насыщения парами
элюента в камеру можно опустить полоску фильтровальной бумаги шириной 5 см.
2.5. Отбор проб
Отбор проб проводится в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,
продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем
Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79 за N 2051-79.
Отобранные пробы следует хранить в стеклянной таре в темном месте.
2.6. Проведение
определения
2.6.1. Вода
250 мл отобранной пробы помещают в
круглодонную колбу на 500 мл. К пробе добавляют 0,2 мл HCl
конц. и упаривают досуха на ротационном испарителе.
Из сухого остатка этиловым спиртом <*> вымывают хлористоводородную соль
Ивина (5 мл, 3 мл, 3 мл). Упаривают этиловый спирт досуха, сухой остаток
растворяют в 2 мл дистиллированной воды, нейтрализуют (или разлагают соль
Ивина) водный раствор гидроксидом калия (добавляют 1 - 2 гранулы твердого KOH).
Раствор фильтруют, используя стеклянный фильтр, промывают осадок (одновременно
смывают колбу) бензолом (3 мл, 3 мл). Фильтрат переносят в делительную воронку,
отделяют бензольный раствор, а водный еще дважды (2
мл, 2 мл) подвергают экстракции. Объединяют бензольные
вытяжки, упаривают на роторном испарителе до объема 0,2 - 0,5 мл. Остаток
количественно наносят на хроматографическую
пластинку. На ту же пластинку наносят стандартные растворы от 0,06 - 0,12 мкг
Ивина и проводят хроматографирование в системе
растворителей бутанол-1:уксусная кислота:вода
(7:3:1). В случае получения интенсивного пятна пробы следует пробу разбавить.
После окончания процесса хроматографирования пластинку
извлекают из камеры и сушат на воздухе.
--------------------------------
<*> Делается с целью уменьшения
примесей.
После
удаления растворителя хроматограмму наблюдают
в
ультрафиолетовом свете при
254 нм.
Ивин обнаруживается в виде
темных пятен
на белом фоне, R
= 0,38 +/- 0,2. Минимально
f
открываемое
количество на хроматограммах 0,04 мкг.
2.7. Обработка
результатов
Количественное определение Ивина либо его
комплексов проводят сравнением размеров пятен хроматографируемой
пробы и стандартных растворов. Для расчета содержания Ивина и его комплексов в хроматографируемой пробе выбирают пятно стандарта, наиболее
близкое по размерам к пятну пробы.
Расчет содержания Ивина либо его
комплексов в литре раствора производят по формуле:
E
A = - мг/л,
V
где:
A - содержание Ивина либо его комплекса в
анализируемом растворе, мг/л;
E - содержание Ивина (его комплекса) в
анализируемом бензольном растворе, мкг;
V - объем анализируемой пробы, мл.
3. Требования
безопасности
Весы и хроматоскоп должны быть заземлены.
Работа с органическими растворителями и кислотами только в вытяжном шкафу.