Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6147-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДИФЕНОКОНАЗОЛА
(СКОРА) В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ, ПОЧВЕ,
ВОДЕ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
Дифеноконазол (скор) -
1-{2-/(4-хлорфенокси)-2-хлорфенил-(4-метил-1,3-диоксолан-2-ил)-метил/}-1H-1,2,4-триазол.
Cl
_____ _____/ N──┐
//
\\ // \\
/ ──┤
C H Cl N O .
Cl-\ ___ /-O-\
___ /-C-CH -N │ 19 17 2 3 3
--- ---
/ \ 2 \ __│
O O \--N М.м.
406,27.
└───┘_CH
3
Белое кристаллическое вещество. Растворим
в гексане, ацетоне, хлороформе, ацетонитриле,
метаноле.
Препарат используется в качестве
инсектицида для обработки овощных и садовых культур.
ПДК в воде водоемов 0,02 мг/л.
2. Методика
определения скора
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении скора из анализируемой пробы органическими растворителями,
очистке экстрактов путем распределения между несмешивающимися жидкостями или
очистке с помощью сорбента. Определение остаточных количеств скора
проводят методом ГЖХ.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
┌────────┬──────────────┬─────────────┬────────────┬─────────────┬─────────────┐
│Анализи-│
Диапазон │ Размах
│ Среднее │Относительное│Доверительный│
│руемый │
измеряемых │варьирования,│ значение
│ стандарт. │ интервал, % │
│объект │концентраций,
│ % │определения,│
отклонение, │ │
│ │
мг/кг, мг/л │ │ %
│ +/- % │ │
├────────┼──────────────┼─────────────┼────────────┼─────────────┼─────────────┤
│Яблоки │0,04
- 0,4 │67 - 72 │70
│2,7 │+/- 2,4 │
│Сахарная│0,04 - 0,4 │65 - 70 │68 │3,1 │+/- 2,6 │
│свекла │ │ │ │ │ │
│Вода │0,002
- 0,02 │63 - 75 │72 │3,3 │+/- 3,0 │
│Почва │0,02
- 0,2 │67 - 70 │68 │2,1 │+/- 2,6 │
└────────┴──────────────┴─────────────┴────────────┴─────────────┴─────────────┘
2.1.3. Определению не мешают наполнители
технического препарата.
2.2. Реактивы и
растворы
Ацетон, ч, ГОСТ
2603-79.
Метанол, хч,
ГОСТ 6995-77.
Дистиллированная вода.
Сульфат натрия безводный, чда, ГОСТ 4166-76.
Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.
Диэтиловый эфир, хч, ГОСТ 6265-74.
Фильтры бумажные "синяя лента",
ТУ 6-09-1678-77.
Азот особой чистоты газообразный, ГОСТ
9293-74.
Хроматон N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30.
Водород газообразный из баллона с
редуктором, ГОСТ 3022-60.
Окись алюминия II степени активности, ч, ГОСТ 8136-85.
Силикагель КСК, ГОСТ 3956-76.
Стандартный раствор дифеноконазола,
содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мл препарата в мерной
колбе с притертой пробкой. Хранят в холодильнике в течение 6 месяцев.
2.3. Приборы и
посуда
Газовый хроматограф с термоионным
детектором или детектором постоянной скорости рекомбинации электронов
("Цвет" и др.).
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ
25-11-917-77.
Аппарат для встряхивания, ТУ
64-21-1081-73.
Делительные воронки, ГОСТ 25336-82.
Воронки химические, ГОСТ 25336-82.
Колбы конические емкостью 250 - 500 мл,
ГОСТ 25336-82.
Колбы грушевидные для отгонки
растворителей, ГОСТ 25336-82.
Посуда мерная, ГОСТ 1770-74.
Микрошприц МШ-10, ТУ 2-833-106.
2.4. Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,
пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем
Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 за N 2051-79.
Хранят пробы в морозильной камере (при -12 - -20 °C).
2.5. Проведение
определения
2.5.1. Экстракция и очистка экстрактов
На анализ берут 50 г пробы (сахарная
свекла, корнеплоды, ботва, яблоки), 100 г просеянной почвы. Пробу помещают в
коническую колбу, заливают 200 мл смеси метанол - вода (1:1) или ацетон - вода
(1:1). Встряхивают 1 час. Экстракцию повторяют дважды.
Экстракты фильтруют, объединяют и
переносят в делительную воронку, дифеноконазол реэкстрагируют трижды по 30 мл хлороформа. Объединенный
органический растворитель сушат безводным сульфатом натрия, упаривают на
ротационном испарителе досуха при t = 50 °C. Сухой остаток растворяют в 1 мл
ацетона и 3 мкл вводят в хроматограф с термоионным
детектором.
Для лучшей очистки проб сконцентрированный
экстракт переносят в бюкс,
заполненный 5 г окиси алюминия и силикагеля марки КСК (1:1). Колбу смывают
несколько раз хлороформом и также переносят в бюкс.
Затем растворитель выпаривают, поставив бюкс на электрическую
грелку и помешивая содержимое бюкса стеклянной палочкой. После того как
хлороформ улетучится, сорбент из бюкса
переносят в стеклянную колонку, в узкий конец которой помещают тампон из ваты.
Для элюирования скора
через колонку пропускают 10 мл смеси гексан - эфир в
соотношении 4:1. Объединенный экстракт фильтруют через сернокислый натрий в
грушевидную колбочку и выпаривают на ротационном испарителе. Сухой остаток
растворяют в 1 мл ацетона и аликвотную часть раствора вводят в хроматограф с
термоионным детектором или детектором постоянной скорости рекомбинации
электронов.
Вода. 1000 мл воды помещают в делительную
воронку. Дифеноконазол экстрагируют хлороформом 3 x
50 мл при энергичном встряхивании. Пропускают экстракт через слой сульфата
натрия и упаривают досуха при температуре бани 50 °C. Остаток растворяют в 1 мл
ацетона и вводят аликвотную часть раствора в хроматограф (ТИД, ДПР).
Условия хроматографирования
с термоионным детектором
Колонка стеклянная 1000 x 3 мм.
Носитель - хроматон
N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30.
Температура колонки - 250 °C для ТИД.
Температура испарителя - 270 °C.
Расходы: азота - 30 мл/мин., водорода -
10 мл/мин., воздуха - 150 мл/мин.
Вводимый объем - 3 мкл.
-10
Рабочая шкала электрометра - 64 x 10 .
Скорость протяжки ленты самописца - 240
мм/час.
Время удерживания при данных условиях - 5
мин. 2 с.
Минимально детектируемое количество - 10 нг.
Условия хроматографирования
с детектором по захвату электронов
Детектор постоянной скорости рекомбинации
электронов.
Колонка 1000 x 3 мм.
Носитель - хроматон
N-AW-DWCS (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30.
Температура колонки - 260 °C.
Температура испарителя - 270 °C.
Температура детектора - 270 °C.
Расходы газа-носителя азота - 65 мл/мин.
Вводимый объем - 3 - 5 мкл.
-12
Рабочая шкала электрометра - 20 x 10 .
Шкала ленты самописца - 240 мм/час.
Время удерживания скора - 4 мин. 36 с.
Минимально детектируемое количество - 10 нг.
2.6. Обработка
результатов анализа
Содержание скора
в пробе рассчитывают по формуле:
C x V x
H x V
ст 1 2
3
X = ------------------,
V x H x
M
2 1
где:
X - количество препарата в пробе, мг/кг;
C -
концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
ст
V -
объем стандарта, введенного в хроматограф, мкл;
1
V -
объем анализируемой пробы, введенный в хроматограф, мкл;
2
V -
общий объем анализируемой пробы, мл;
3
H -
высота пика стандарта, мм;
1
H -
высота пика анализируемой пробы, мм;
2
M - вес пробы, взятой для анализа, г.
3. Техника
безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила
безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими
веществами.