Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6178-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ N-ОКИСИ-2,6-ЛУТИДИНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ
И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
Торговое название: Люцис.
Люцис - композиционная смесь комплекса N-окиси-2,6-лутидина и янтарной
кислоты с молибденовокислым аммонием в соотношении
99:1 соответственно.
Производитель: Молдова.
Структурная формула комплекса
N-оксида-2,6-лутидина с янтарной кислотой:
/\\ COOH
/
\\ │
││ │
CH
││ │
│ 2
М.м. 241,24.
H C--\
//\ CH
3
\// CH │ 2
N
3 COOH
│
O
Эмпирическая формула: C H NO .
11 15 5
Содержание основного вещества - 99,8%.
Растворимость - легко растворим в воде,
спирте.
Молибденовый аммоний по структурной формуле:
(NH ) Mo O x 4H O. М.м. 1236,0.
4 6 7 24
2
Эмпирическая формула: H N O Mo .
32 6 28 7
Содержание основного вещества - 99,9%.
Растворимость - вода.
ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,8 мг/куб.
м.
Препарат люцис
- новый регулятор роста растений.
Рекомендован для применения по
вегетирующим культурам на люцерне при норме расхода 3 г/га.
2. Методика
измерения концентраций люциса
в воздухе рабочей зоны методами газожидкостной
и тонкослойной хроматографии
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на отборе проб воздуха с
концентрированием на бумажный фильтр "синяя лента", извлечении
препарата с фильтра подщелоченной дистиллированной водой и получении
N-окси-2,6-диметилпиридина, экстрагировании последнего бензолом и последующем
определении газожидкостной или тонкослойной хроматографией.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
|
N
|
Метод
определения
|
Диапазон
определяемых
концентраций,
мг/куб. м
|
Предел
обнаружения,
мг/куб. м
|
Среднее
значение
определения, %
|
Граница
суммарной
погрешности, %
|
|
1.
|
ГЖХ
|
0,002 - 0,02
|
0,002
|
85
|
+/- 10%
|
|
2.
|
ТСХ
|
0,05 - 0,5
|
0,05
|
80
|
+/- 14%
|
2.2. Реактивы и
материалы
Люцис, 99,9-процентный препарат.
Гидроксид натрия хч,
ГОСТ 4328-77.
Натрия сульфат безводный хч, ГОСТ 4166-76.
Бензол, ГОСТ 5955-81.
Азот газообразный, ГОСТ 9283-74, в
баллоне с редуктором.
Ацетон ч, ГОСТ
2603-79.
Уксусная кислота, ГОСТ 18290-72.
Иод кристаллический чда, ГОСТ 4139-79.
Крахмал, ГОСТ 10163-76.
Аммиак 25-процентный, ГОСТ 3760-74.
Фильтры бумажные обеззоленные
"синяя лента", диаметр 5,5 - 6,0, ТУ 6-09-1678-77.
2.3. Посуда и
приборы
Газовый хроматограф с детектором
постоянной скорости рекомбинации.
Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.
Весы аналитические ВЛА-200М.
Фильтродержатели.
Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ
25-11-917-74.
Холодильник бытовой.
Шкаф электрический сушильный, ТУ
64-1-1411-72.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ
10396-75.
Колбы грушевидные, вместимостью 50 - 100
мл (для отгонки растворителя), ГОСТ 10394-72.
Холодильник, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные, цилиндры, мензурки,
пробирки, ГОСТ 1770-74.
Воронки лабораторные, диаметр 50 мм, ГОСТ
8613-75.
Пипетки на 1; 5; 10 мл, ГОСТ 20292-74.
Воронки делительные на 250 мл, ГОСТ
8613-75.
Микропипетки на 0,1; 0,2; ГОСТ 20292-74.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.
Скальпель.
Камера для хроматографирования,
ГОСТ 10565-75.
Камера для опрыскивания пластинок, ТУ
25-11-430-70.
Колба с тубусом, ГОСТ 25336-82.
Воронка Бюхнера,
ГОСТ 9147-80.
Секундомер, ГОСТ 5072-79.
Лампа ртутно-кварцевая ПРК-4, ТУ
16-536-280-74.
2.4. Отбор проб
Воздух со скоростью 2 - 5 л/мин. аспирируют через бумажный фильтр "синяя лента", закрепленный
в фильтродержателе. Продолжительность отбора пробы -
30 мин. Длительность хранения проб в стеклянной таре в затемненном от света
месте не более 5-ти суток.
2.5. Подготовка к
определению
2.5.1. Приготовление стандартного
раствора N-окси-2,6-диметилпиридина
В делительную воронку помещают 100 мл
дистиллированной воды, прибавляют 50 мг препарата люцис,
подщелачивают до pH 8 - 9 и экстрагируют полученный
раствор бензолом трижды по 25 - 30 мл. Экстракты объединяют и фильтруют через б/в сульфат натрия в колбу для отгонки растворителя.
Растворитель отгоняют до исчезновения запаха бензола. Затем 10 мг полученного
остатка N-окси-2,6-диметилпиридина помещают в мерную колбу на 100 мл, доводят
ацетоном до метки. Получают раствор с концентрацией 100 мгк/мл.
Годен к употреблению в течение 30 дней.
Рабочие растворы препарата с
концентрацией 2,5; 5,0; 10,0 мкг/мл готовят в градуированных пробирках с
пришлифованной пробкой вместимостью 10 мл соответствующим разбавлением ацетоном
стандартного раствора. Хранят рабочие растворы в холодильнике. Годны к употреблению в течение 30 дней.
2.5.2. Приготовление растворов,
проявляющих реактивов, пластинок
2.5.2.1. Раствор иода
в хлороформе
2,0 г кристаллического иода растворяют в 5 мл хлороформа, затем доводят объем
жидкости до 100 мл хлороформом. Раствор хранят в холодильнике в затемненном
месте.
2.5.2.2. Раствор крахмала
1,0 г крахмала растворяют в 100 мл
дистиллированной воды, доводят до кипения, охлаждают, используют
свежеприготовленный раствор.
2.5.2.3. Подготовка пластин "Силуфол"
Пластину "Силуфол"
помещают в хроматографическую камеру, содержащую
смесь растворителей ацетон 25% - аммиак в соотношении 7:3 (об./об.).
Глубина погружения пластинки в
растворитель составляет 0,5 см.
После подъема фронта растворителя до
верхнего конца пластинки ее вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до
испарения растворителей. После этого пластинка готова к употреблению. Хранят
подготовленные пластинки в эксикаторе над слоем осушителя.
2.6. Проведение
определения
2.6.1. Подготовка пробы к анализу
Бумажный фильтр, содержащий люцис, из фильтродержателя
переносят в делительную воронку и заливают 15 - 20 мл дистиллированной воды.
Экстрагируют препарат из фильтра в течение 10 - 15 мин., периодически
перемешивая содержимое емкости. Экстракцию повторяют дважды свежими порциями
дистиллированной воды. Объединенный экстракт помещают в делительную воронку,
подщелачивают до pH 8 - 9 и трижды экстрагируют
бензолом по 25 - 30 мл. Объединенный экстракт фильтруют через безводный сульфат
натрия и упаривают на ротационном испарителе при температуре 60 °C до объема
1,0 - 1,5 мл. Остаток растворителя испаряют в токе сжатого воздуха. Сухой
остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона.
2.6.2. Условия хроматографирования
2.6.2.1. Газохроматографический метод
Детектор постоянной скорости
рекомбинации.
Колонка стеклянная - 1000 x 3 мм.
Твердый носитель - Хромосорб-750.
Жидкая фаза - 3% OV-17.
Температура термостата колонки - 175 °C;
детектора - 180 °C;
испарителя - 200 °C.
Газ-носитель - азот особой чистоты.
Скорость движения диаграммной ленты - 240
мм/час.
Скорость потока азота через колонку - 60
мл/мин.;
детектор - 150
мл/мин.
-12
Рабочая шкала электрометра - 20 x 10 А.
Время удерживания люциса
- 12 мин. 40 сек.
Объем вводимой пробы - 3 - 5 мкл.
2.6.2.2. Метод тонкослойной хроматографии
0,2
мл полученного раствора
наносят микропипеткой на
очищенную
пластинку "Силуфол". Рядом
с пробой наносят по 0,2 мл каждого рабочего
раствора N-окси-2,6-диметилпиридина, что соответствует содержанию в пятне
0,5; 1,0; 2,0
мкг препарата. Пластинку
помещают в хроматографическую
камеру, куда
за 10 - 15 мин. до хроматографирования
наливают смесь
растворителей
бензол - уксусная кислота (1:1,5) в таком
количестве, чтобы
глубина погружения
пластинки в растворитель
составляла 0,5 мл. После
подъема фронта
растворителя от линии
старта на высоту
10 мл
хроматографирование прекращают. Пластинку выдерживают в
вытяжном шкафу до
испарения растворителей
и подвергают УФ-облучению в
течение 10 мин.
После чего
пластинку орошают 2%
раствором иода в
хлороформе, затем
высушивают на
воздухе и проявляют
1% водным раствором крахмала. Препарат
проявляется в
виде синих пятен на белом фоне
с величиной R =
0,6 +/-
f
0,02. Минимально
детектируемое количество - 1 мкг.
2.7. Обработка
результатов анализа
2.7.1. Газохроматографический метод
Для количественного анализа измеряют
площади пиков проб и стандартных растворов. Содержание люциса
в воздухе рабочей зоны рассчитывают по формуле:
G x S x V x
2,1
пр 1
X =
------------------,
S x V x V
ст
20
где:
X - содержание препарата люцис в воздухе рабочей зоны, мг/куб. м;
G - содержание люциса
в стандарте, мкг;
S -
площадь пика анализируемой пробы, кв. мм;
пр
V -
общий объем пробы, мл;
1
S -
площадь пика стандартного раствора, кв. мм;
ст
V - объем хроматографируемой
пробы, мл;
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
20
условиям;
2,1 - коэффициент пересчета на люцис.
2.7.2. Тонкослойная хроматография
G x V x 2,1
X = -----------,
V x 0,2
20
где:
X - концентрация люциса
в воздухе рабочей зоны, мг/куб. м;
G - количество препарата в пятне пробы,
определенное путем сравнения со стандартами, мкг;
V - окончательный объем экстракта пробы,
мл;
0,2 - объем экстракта пробы, нанесенной
на пластинку, мл;
V
- объем пробы
воздуха, отобранный для анализа и приведенный к
20
нормальным
условиям, л;
2,1 - коэффициент пересчета на люцис.
3. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима
и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах),
санитарно-эпидемиологических учреждениях системы МЗ СССР (N 2455-81 от 20.10.81).