Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6179-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ N-ОКИСИ-2,6-ЛУТИДИНА
В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ ЛЮЦЕРНЫ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
Торговое название: Люцис.
Люцис - комплекс N-оксида-2,6-лутидина и янтарной кислоты с молибденовокислым аммонием - композиционная смесь в
соотношении 99:1 соответственно.
Производитель препарата: Молдова.
Структурная формула комплекса
N-оксида-2,6-лутидина с янтарной кислотой:
/\\ COOH
/
\\ │
││ │
CH
││ │
│ 2
H C--\
//\ CH
3
\// H C │ 2
N
3 COOH
│
O
М.м. 241,24.
Эмпирическая формула C H NO .
11 15 5
Содержание основного вещества - 99,8%.
Растворимость - легко растворим в воде,
спирте.
Молибденовокислый
аммоний по структурной формуле:
(NH ) Mo O x 4H O М.м. 1236,0.
4 6 7 24
2
Содержание основного вещества - 99,9%.
Растворимость - вода.
ОДК в почве - 0,01 мг/кг, ПДК в воде
водоемов - 0,05 мг/кг, МДУ в продуктах - не допускается.
Люцис рекомендован для применения в качестве
регулятора роста растений путем опрыскивания.
Расход рабочего раствора 300 л/га,
концентрация 0,001%.
Препарат устойчив в течение года при
соблюдении условий хранения.
2. Методика
определения остаточных количеств
люциса в воде, почве, зеленой массе люцерны
методом тонкослойной хроматографии
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на получении
N-окси-2,6-диметилпиридина, экстрагировании последнего бензолом и последующем
определении методом тонкослойной хроматографии.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Минимально детектируемое количество -
0,07 мкг.
Диапазон определяемых концентраций:
вода - 0,0006 - 0,05 мг/л;
почва - 0,01 - 0,3 мг/кг;
люцерна - 0,005 - 0,3 мг/кг.
Среднее значение определения:
вода - 83 - 98%;
почва - 78 - 89%;
люцерна - 90 - 95%.
Граница суммарной погрешности, %:
вода - +/- 11,0;
почва - +/- 14,0;
люцерна - +/- 12,0.
2.2. Реактивы,
растворы и материалы
Бензол, ГОСТ 5955-75.
Бутанол-1, ГОСТ 6006-78.
Гидроксид калия СТЕВ 1439-78 (УССР).
Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.
Соляная кислота, ГОСТ 3118-78.
Уксусная кислота, ГОСТ 61-75.
Этиловый спирт, ГОСТ 5962-67.
Алюминия окись.
Хроматографические пластинки "Силуфол" UV 254, ЧССР,
размер 150 x 150 и 200 x 200 мм.
2.3. Приборы,
посуда и аппаратура
Весы технические.
Весы аналитические 2 кл.,
ГОСТ 19401-74.
Колбы плоскодонные на 250 и 100 мл, ГОСТ
10054-75.
Колбы круглодонные на 250 и 100 мл, ГОСТ
9737-70.
Колбы остродонные
на 50 мл, ГОСТ 23932-79.
Колбы мерные на 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Колбы конические на 50 и 100 мл, ГОСТ
1770-74.
Пипетки мерные 8-2-1; 8-2-2; 8-2-5;
8-2-10, ГОСТ 20292-74.
Микропипетки на 0,1 мл, ГОСТ 20-292-74.
Микрошприц на 10 мкг и 1 мкг МШ-20.
Пробирки конические, градуированные на 5
мл, ГОСТ 1770-74.
Стеклянный фильтр ХУ-1 пор. 41, ГОСТ
20292-74.
Вакуумный насос, ГОСТ 10696-75.
Колонка стеклянная, ГОСТ 23932-79.
Электроплитка, ТУ 92-275-76.
Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ
64-1-1081-33, или аналогичный.
Хроматоскоп.
Камера для хроматографирования,
ГОСТ 10565-75.
Воронки химические, ГОСТ 10396-65.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ
23-11-317-33.
Чашки фарфоровые.
Водоструйный насос, ГОСТ 23932-79.
2.4. Отбор проб
Пробы для анализа отбираются в
соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб
сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды
для определения микроколичеств пестицидов",
утвержденными Зам. Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79 за
N 2051-79.
2.5. Подготовка к
определению
2.5.1. Подготовка пластинок и хроматографической камеры
Подготовить пластинки "Силуфол" UV 254 размером 5 x 10.
Хроматографическую камеру за 1 час до начала хроматографирования
заполнить подвижной фазой до уровня 0,5 - 0,7 см.
2.5.2. Приготовление стандартных
растворов
Стандартные растворы люциса
в этиловом спирте. 0,1 г люциса переносят и
растворяют этиловым спиртом в мерной колбе вместимостью 100 куб. см. Рабочие
растворы готовят разбавлением полученного 0,1% раствора. На хроматограмму наносят: 0,001% (0,01 мг/мл) раствор - 0,1 мл
(1 мкг); 0,01 мл (0,1 мкг), 0,0001% (0,001 мкг/л) раствор - 0,5 мл (0,5 мкг);
0,1 (0,1 мкг); 0,05 мл (0,05 мкг).
Растворы хранятся в холодильнике 5 - 7
дней.
2.6. Проведение
определения
2.6.1. Экстракция и очистка экстрактов
2.6.1.1. Вода
150 - 200 мл воды подщелачивают
гидроксидом калия (натрия) до pH 7,5 - 8. Переносят в
делительную воронку через бумажный фильтр. Смывают колбу и одновременно фильтр
водой (2 раза по 2 мл). Экстрагируют бензолом (3 раза по 10 мл). Фильтруют бензольный раствор через окись алюминия (колонка 50 х 15
мм), промывают колонку 2 мл бензола. Объединяют с фильтратом и упаривают в остродонной колбе до объема 0,2 - 0,3 мл. Остаток
количественно наносят на хроматографическую
пластинку. Рядом наносят такие же объемы стандартных растворов, содержащие 0,05
- 0,2 мкг люциса.
2.6.1.2. Почва
20 - 25 г почвы помещают в коническую
колбу, заливают 50 - 60 мл подщелоченной дистиллированной воды (pH 7,5 - 8,0), встряхивают несколько минут и оставляют на
16 - 18 часов (на ночь). Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр,
промывают почву водой по 10 мл 2 раза, объединяют с экстрактом, переносят в
делительную воронку через воронку с бумажным фильтром, смывая колбу и воронку 2
мл воды, и экстрагируют люцис бензолом (3 раза по 5
мл). Экстракт фильтруют через окись алюминия и переносят в остродонную
колбу. Упаривают до объема 0,2 - 0,3 мл. Остаток количественно наносят на хроматографическую пластинку. Рядом наносят стандартные
растворы.
2.6.1.3. Растения люцерны
20 г образца измельчают, переносят в
коническую колбу и заливают 100 мл подщелоченной воды. Встряхивают в течение 1
часа, фильтруют и проводят определение, как в почве.
2.6.2. Условия хроматографирования
Пластинку
с нанесенными анализируемыми пробами
и стандартными
растворами помещают
в хроматографическую камеру
с подвижной фазой, в
качестве которой служит смесь бутанол-1:уксусная кислота и вода (7:3:1).
Когда растворитель
поднимется на 5 см, пластинку вынимают и помещают на
водяную баню
на 1 час до удаления запаха кислоты, сушат на воздухе. После
удаления растворителя
просматривают пластинку под
хроматоскопом. Люцис
обнаруживается в
виде фиолетового пятна на светлом фоне, R
= 0,48.
f
2.7. Обработка
результатов анализа
Количественное определение люциса проводят сравнением размеров пятен хроматографируемой пробы и стандартных растворов. Для
расчета содержания люциса в анализируемой пробе
выбирают пятно стандарта, наиболее близкое по размерам к пятну пробы.
Содержание препарата в пробе, мг/кг,
рассчитывают по формуле:
A x S x 1000
2
X = -------------,
S x P
1
где:
A - содержание препарата в стандарте, мкг;
S -
площадь пятна стандарта, кв. мм;
1
S -
площадь пятна пробы, кв. мм;
2
P - масса пробы, взятой на анализ, г.
3. Требования
безопасности
Соблюдаются требования безопасности,
рекомендуемые для работы с химическими реактивами и пестицидами.