Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6186-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТИТУСА
В ПОЧВЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, ВОДЕ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
Титус - N-((1,6-диметоксипиримидин-2ил)аминокарбонил)-3-(этилсульфонил)-2-пиридинсульфамид
- применяется как гербицид в посевах ячменя.
SO CH CH
// \ / 2 2 3
│ ││ C H S N O .
│ ││ OCH 14 17 2 5 7
\\ / \ N --/ 3
N
SO NHCONH--// \\ М.м. 431.
2 \ __ /
N -- \
OCH
3
1. Характеристика
препарата
Титус представляет собой белое кристаллическое вещество, не имеющее запаха,
растворимое в хлороформе, хлористом метилене, ацетоне, ацетонитриле.
2. Методика
определения титуса в почве, зеленой массе
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении титуса из проб исследуемых объектов смесью буферного
раствора pH 7 и метанола, очистке и концентрировании
экстрактов с последующим определением методом газожидкостной хроматографии с
электронозахватным детектором.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
ПРЕДЕЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
┌───────┬────────────┬────────────┬─────────────┬─────────────┬────────────────┐
│Объект │
Предел │ Среднее
│ Стандартное │Относительное│ Доверительный │
│ │обнаружения,│ значение
│ отклонение, │ стандартное │ интервал
│
│ │мг/кг,
мг/л │определения,│
% │отклонение, %│среднего,
%, при│
│ │ │ %
│ │ │ n = 5, P = 0,95│
├───────┼────────────┼────────────┼─────────────┼─────────────┼────────────────┤
│Почва │0,03 │79,2 │79,2 +/- 1,95│5,1 │6,3 │
│Зеленая│ │ │ │ │ │
│масса │0,09 │63,8 │63,8 +/- 1,9 │4,9 │7,3 │
│Вода │0,001 │88,4 │88,4 +/- 0,6 │1,24 │1,4 │
└───────┴────────────┴────────────┴─────────────┴─────────────┴────────────────┘
3. Реактивы,
растворы, материалы
Титус.
Метиловый спирт, хч,
ГОСТ 6995-77.
Буферный раствор (калий фосфорнокислый двузамещенный 1 М) pH 7.
Фосфорная кислота, хч,
ГОСТ 2156-76.
Метилен хлорид, ч,
ТУ 6-09-3716-74.
Хлороформ, ГОСТ 20015-74.
Ацетон, осч,
9-5 ТУ 6-09-3513-86.
Трифторуксусный ангидрид, ТУ
6-09-4135-75.
Пиридин, ч, ГОСТ
13647-78.
Хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм) с 5% XE-60.
Приготовление смеси
для экстракции (25%
метанола, 75%
буферного
раствора pH 7): к 150 мл 1 М K HPO прибавить
1350 мл
2 4
дистиллированной воды,
довести pH раствора
до 7 с
помощью
концентрированной фосфорной
кислоты (2 - 2,5 мл) (pH проверить на
pH-метре).
Затем прибавить 500 мл метанола и тщательно перемешать.
Конечное pH смеси должно быть 7,5.
Основной стандартный раствор титуса, содержащий 100 мкг/мл, готовят растворением 10 мг
препарата в мерной колбе на 100 мл в хлороформе.
Раствор хранят в холодильнике не более
месяца. Рабочие растворы титуса 2 - 10 мкг/мл. Хранят
растворы в холодильнике не более 5 дней.
4. Приборы и посуда
Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.
Воронки химические, ГОСТ 8613-75.
Колбы конические, 50, 100 мл, ГОСТ
25336-82.
Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82.
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М,
ТУ 25-11-917-74.
Хроматограф с детектором постоянной
скорости рекомбинации (тип "Цвет", "Газохром"
или др.).
Микрошприцы на 10 мкл, ТУ 2-833-106.
Колонки стеклянные хроматографические,
длина 1 м, d = 3 мм.
5. Отбор проб
Отбор проб проводится в соответствии с "Унифицированными
правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и
объектов окружающей среды для определения микроколичеств
пестицидов", утвержденными Минздравом СССР за N 2051-79 от 21 августа 1979
г. Пробы хранят в морозильной камере (-14 - 20 °C).
6. Проведение
определения
Экстракция и очистка экстрактов
Почва, зеленая масса. 50 г почвы (10 г
измельченного растительного материала) помещают в коническую колбу, заливают 70
- 100 мл экстракционной смеси и встряхивают 1 час. Фильтрат сливают. Повторяют
экстракцию дважды с 70 мл смеси в течение 15 мин. Объединенные экстракты
переносят в делительную воронку и проводят экстракцию препарата 3 раза по 50 мл
метиленхлоридом (хлороформом). Отделяют метиленхлорид и упаривают досуха при температуре бани не
выше 40 °C.
Вода. Пробу воды (1 л) помещают в
делительную воронку, доводят pH до 7,5 и экстрагируют
препарат по 50 мл метиленхлоридом, каждый раз
встряхивая воронку 3 - 5 мин. Объединяют метиленхлоридный
экстракт и упаривают при температуре бани не выше 40 °C до объема 0,2 - 0,3 мл.
Определение методом ГЖХ
Удаляют остаток растворителя на воздухе.
К сухому остатку пробы приливают 50 мкл
трифторуксусного ангидрида и 10 мкл пиридина.
Выдерживают приготовленный раствор в течение 30 мин. при комнатной температуре,
после чего добавляют 1 мл хлороформа и 5 мл дистиллированной воды, интенсивно
встряхивают в течение 2 мин. После разделения фаз хлороформную фазу упаривают
досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона. После чего 4 мкл ацетонового раствора вводят в хроматограф.
Параллельно проводят аналогичную подготовку
стандартного раствора титуса (5 мкг и 3 мкг) и
контрольную пробу. Расчеты выполняют по сравнению пиков фторпроизводного
титуса в стандартном растворе и в пробе.
Условия хроматографирования
Хроматограф с ДПР.
Колонка стеклянная, длина 1 м, d = 3 мм.
Носитель - хроматон
N-AW (0,16 - 0,20 мм).
Неподвижная фаза - 5% XE-60.
Температура испарителя - 250 °C;
детектора - 250 °C;
колонки - 180 °C.
Скорость газа-носителя - 55 мл/мин. (через
колонку);
- 150 мл/мин. (на поддувку).
Вводимый объем - 4 мкл.
Время удерживания фторпроизводного титуса - первый пик 7 мин. 48 с;
второй пик - 27 мин.
Минимально детектируемое количество - 9 нг.
Содержание титуса
в пробе рассчитывают по формуле:
C x S
x V x V
ст пр ст 0
X = --------------------,
S x V
x M
ст пр
где:
X - количество препарата в пробе, мг/кг,
мг/л;
C -
содержание вещества в стандарте, мкг/мл;
ст
V
- объем стандарта,
вводимого в колонку
газового
ст
хроматографа, мкл;
V
- объем анализируемой пробы, введенный в колонку газового
пр
хроматографа, мкл;
V -
общий объем анализируемой пробы, мл;
0
S -
площадь пика анализируемой пробы, кв. мм;
пр
S -
площадь пика стандарта, кв. мм;
ст
M - масса или объем пробы, взятой для
анализа, г, мл.
7. Техника
безопасности
Выполняются в соответствии с
"Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии,
противоэпидемического режима в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР", N 2255-81 от
20.10.81.