Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6188-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ КВИНКЛОРАКА
(ФАЦЕТА) В РИСОВОЙ СОЛОМЕ, ВОДЕ И ПОЧВЕ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
Квинклорак (фацет) - 3,7-дихлор-8-хинальдиновая кислота.
COOH
Cl │ М.м. 242,1.
\// \ / \\
│
││ │ C H Cl NO .
\\ / \ //\ 10 5 2 2
Cl
Твердое вещество слегка желтоватого цвета.
Т. пл. 269 °C.
Растворимость в 100 г растворителя при 20
°C:
-3
вода - 6,2 x 10 ;
этиловый спирт - 0,2;
ацетонитрил - 0,1;
ацетон - 0,2;
этилацетат - 0,1.
-7 -7
Давление пара при 20
°C < 1 x 10 , mbar
= 0,9 x 10 мм рт.
ст. ЛД для крыс = 2680 мг/кг.
50
МДУ в рисе 0,05 мг/кг.
2. Методика
определения квинклорака в рисовой соломе, почве
и воде методом газожидкостной хроматографии
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении квинклорака из исследуемого образца ацетоном при pH 10 - 11 и затем переэкстракции
хлороформом при pH 2, очистке, концентрировании и
последующем определении методом реакционной хроматографии в виде метилпроизводного.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Таблица
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФАЦЕТА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РИСОВОЙ
СОЛОМЕ
┌──────────────┬─────────────────────────────────────────────────────────┐
│
Исследуемый │ Метод ГЖХ │
│ объект
├────────────┬───────────┬─────────────┬──────────────────┤
│ │ предел
│ среднее │ стандартное │ доверительный │
│ │обнаружения,│
значение │отклонение, %│интервал
среднего,│
│ │мг/кг, мг/л │определения│ │ % │
├──────────────┼────────────┼───────────┼─────────────┼──────────────────┤
│вода │0,005 │85 │+/- 4,5 │+/- 7,5 │
│почва │0,005 │80 │+/- 5,5 │+/- 8,7 │
│рисовая
солома│0,04 │78 │+/- 5,9 │+/- 9,3 │
└──────────────┴────────────┴───────────┴─────────────┴──────────────────┘
2.1.3. Избирательность метода
Условия экстракции, очистки и дальнейшего
газохроматографического определения фацета позволяют избирательно определять
препарат в присутствии пестицидов других групп.
2.2. Реактивы и
материалы
Ацетон, осч, ТУ
6-09-3513-86.
Хлороформ, хч,
ТУ 6-09-42-63-76.
Метанол, хч,
ГОСТ 6995-77.
Едкий натр, хч,
ГОСТ 4328-77.
Кислота серная, хч,
ГОСТ 4204-77.
Гидразингидрат, чда.
Кали едкое, ч,
ГОСТ 9285-78.
Диэтиловый эфир, хч, ГОСТ 6262-79.
Азот в баллоне, особой чистоты, ГОСТ
9293-74.
Неподвижная фаза 3% OV-17 на хроматоне N-AW-DWCS (0,16 - 0,20 мм).
Квинклорак (ВАСФ) - 250 мг/л (эмульсия).
Основной стандартный раствор (ОСР) с
концентрацией 100 мг/мл готовят взятием навески 40 мг (0,0400 г) эмульсии,
содержащей 250 мг/л квинклорака, и растворением в
ацетоне в мерной колбе емкостью 100 мл. Хранят в холодильнике 2 месяца.
Рабочие стандартные растворы с
содержанием 2 мкг/мл, 1 мкг/мл, 0,5 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением
ОСР ацетоном. Хранят в холодильнике.
2.3. Приборы,
аппаратура и посуда
Газовый хроматограф серии
"Цвет" с детектором ДПР.
Колонка стеклянная длиной 1 м, диаметром
3,5 мм.
Ротационный испаритель типа ИР-1М, ТУ
25-11-917-76.
Колбы грушевидные (круглодонные) емкостью
500 мл, 100 мл, 50 мл ОКШ 500-29/50-14, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные емкостью 50, 100 мл, ГОСТ
1770-74.
Пробирки мерные на шлифах емкостью 5 и 10
мл, ГОСТ 1770-74.
Аппарат для встряхивания.
Колбы конические емкостью 500, 250 мл,
ГОСТ 25336-82.
Пипетки на 0,1; 0,2; 1; 5; 10 мл, ГОСТ
1770-74.
Микрошприц на 10 мкл МШ-10, ТУ SE-2.833.024.
Прибор для получения диазометана
(рис. 1 - не приводится):
- колба круглодонная трехгорлая
емкостью 500 мл на шлифах (реакционный сосуд);
- холодильник Либиха на шлифах;
- делительная воронка на шлифах;
- П-образный переходник на шлифах;
- капилляр.
2.4. Подготовка к
определению
2.4.1. Отбор проб
Отбор, хранение и доставка проб
производятся в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб
сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды
для определения микроколичеств пестицидов",
утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, N
2051-79 от 21.08.79.
2.4.2. Подготовка колонки для ГЖХ
Колонку заполняют стандартной фазой (3%
OV-17 на хроматоне N-AW-DMCS), подключив ее к вакууму
водоструйного насоса. Заполненную колонку кондиционируют в термостате колонок в
течение 6 часов без подключения к детектору, продувая азотом (50 мл/мин.) и
постепенно поднимая температуру от 120° до 190°. Затем колонку присоединяют к
детектору.
2.5. Описание
определения
2.5.1. Экстракция
Вода. 200 мл анализируемой пробы помещают в
круглодонную колбу
емкостью 500
мл, прибавляют 100 мл ацетона и экстрагируют на
аппарате для встряхивания
в течение ~ 1 часа. Ацетон упаривают,
остаток экстрагируют
3 x 60 мл хлороформа. Хлороформный экстракт
сушат Na SO и упаривают в вакууме водоструйного насоса до
объема
2
4
(V - 5 - 10 мл),
отбирают 0,5 - 1 мл
(V )
пробы, упаривают
3 2
досуха. К
сухому остатку прибавляют
5 мл эфирного
раствора
диазометана.
Выдерживают 20 мин.
Если реакционная смесь
обесцветится,
прибавляют еще 2 мл эфирного раствора диазометана и
выдерживают 10
мин. Упаривают досуха. Остаток
растворяют в 1 мл
(V ) ацетона и хроматографируют.
4
Рисовая
солома. 10 г измельченной рисовой соломы заливают 100
мл 0,1
N водного раствора NaOH и экстрагируют в течение 1 часа,
затем прибавляют
100 мл ацетона, выдерживают ~= 5 мин., фильтруют.
Из фильтрата
упаривают ацетон в вакууме водоструйного насоса при
температуре бани
~= 50 °C.
Остаток подкисляют 3 мл
концентрированной H
SO и
экстрагируют 3 x 60 мл хлороформом.
2 4
Экстракт сушат Na SO и упаривают в
вакууме водоструйного насоса
2 4
до V
(5 - 10 мл). Отбирают 0,5 - 1 мл
(V ) экстракта и очищают
3 2
его пропусканием
через слой силикагеля
(0,16 - 0,3).
Перед
очисткой через
силикагель пропускают 3 мл смеси
метиловый
спирт:хлороформ (5:95).
Элюируют квинклорак
3 мл смеси метиловый
спирт:хлороформ (40:60).
Элюат
упаривают досуха. Остаток
метилируют, как описано выше, и хроматографируют.
Почва.
50 г увлажненной
пробы почвы заливают 100 мл 0,1 N
водного раствора
NaOH,
экстрагируют в течение
1 часа, затем
прибавляют 200 мл
ацетона, выдерживают ~= 5 мин. Фильтруют через
бумажный фильтр
или центрифугируют в течение 5 - 10 мин. Упаривают
в вакууме
водоструйного насоса ацетоном, остаток подкисляют 3 мл
концентрированной H
SO и
экстрагируют 3 x 60 мл хлороформом.
2 4
Хлороформный экстракт
сушат Na
SO и
упаривают в вакууме
2 4
водоструйного насоса до V
(5 - 10 мл), отбирают 0,5 - 1 мл (V ),
3 2
очищают на колонке с
силикагелем, упаривают и метилируют, как
описано выше, и
затем хроматографируют.
2.5.2. Получение диазометана
Работа с диазометаном
должна проводиться в вытяжном шкафу вследствие его токсичности и раздражающего
действия. При работе использовать индивидуальные средства защиты: перчатки,
очки.
В реактор, снабженный обратным
холодильником, капельной воронкой, газоотводной трубкой и трубкой для подачи
азота (см. рис. 1 - не приводится) помещают 6 г едкого кали, 3 мл метанола и 3
мл гидразингидрата. Через смесь продувают азот с расходом 100 мл/мин. и
прикапывают хлороформ из капельной воронки со скоростью 1 капля за 1 - 2
секунды. Получаемый указанным способом диазометаном
насыщают диэтиловый эфир. После окончания реакции
прекращают подачу хлороформа, отключают азот, остатки в реакционной колбе
заливают водой, тщательно промывают водой все составные части прибора.
2.5.3. Хроматографический
анализ
Газовый хроматограф серии
"Цвет" с детектором ДПР.
Колонка хроматографическая
стеклянная длиной 1 м, диаметром 3,5 мм.
Неподвижная фаза 3% OV-17 на хроматоне N-AW-DMCS.
Температура колонки - 190 °C.
Температура испарителя - 250 °C.
Газ-носитель - азот с расходом 65 - 70
мл/мин.
Расход воздуха -
Вводимый объем - 3 мкл.
-12
Шкала множителя - 20 x 10 .
Скорость диаграммной ленты - 240 мм/час.
Время удерживания - 6,5 мин.
Предел определения - 0,1 нг.
Количественную оценку проводят методом
абсолютной калибровки по сравнению со стандартом квинклорака.
Расчет результатов анализа проводят по
формуле:
C x H x V
x V x V
2 1
3 4
X = ---------------------,
H x V x
P
1 2
где:
C - содержание квинклорака
в стандартном растворе, нг;
Н -
высота пика стандартного раствора, мм;
1
H -
высота пика пробы, мм;
2
V -
объем экстракта, введенный в хроматограф, мкл;
1
V -
объем экстракта, взятый для очистки, мл;
2
V -
объем экстракта для очистки, мл;
3
V -
конечный объем экстракта, мл;
4
P - навеска анализируемой пробы, г, мл.
3. Техника
безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила
безопасности при работе с органическими веществами и токсическими веществами.