Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6206-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ САНМАЙТА В ВОДЕ
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
O
CH
\\
C H ClN OS.
│ 3 --- Cl 19 25
2
H C-C---N/ \\
3 │ \ ___ /\ ---
CH М.м.
364,9.
H C N --- SCH --//
\\ │
3
3 2 \ ___ /--C--CH
--- │
3
CH
3
Санмайт -
4-хлор-2(1,1-диметилэтил-5///4-(1,1-диметилэтил/фенил/метил/тио-3(2H)-пиридазин
- белое кристаллическое вещество с температурой плавления 111 - 112 °C. Легко растворим в ацетоне, хлороформе, растворим в спирте, бензоле, нерастворим в воде. Устойчив при
комнатной температуре. Разлагается при сильном УФ-облучении.
2.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении санмайта из воды гексаном и
дальнейшем хроматографировании препарата (ТСХ, ГЖХ).
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Предел обнаружения, мг/л - 0,005.
Диапазон измеряемых концентраций, мг/л -
0,005 - 0,5.
┌───────┬──────────────┬─────────────┬─────────────┬─────────────────────┐
│
Метод │ Среднее │ Стандартное │Относительное│ Доверительный │
│ │
значение │отклонение, %│
стандартное │интервал среднего, %,│
│ │определения, %│ │отклонение, %│ при n
= 5, P = 0,95 │
├───────┼──────────────┼─────────────┼─────────────┼─────────────────────┤
│ГЖХ │90,8 │6,64 │3,32 │7,31 │
│ТСХ │80,9 │4,97 │2,48 │6,14 │
└───────┴──────────────┴─────────────┴─────────────┴─────────────────────┘
2.1.3. Избирательность метода
Определению не мешают наполнители
технического препарата.
2.2. Реактивы,
растворы, материалы
Ацетон, осч,
9-5 ТУ 6-09-3513-86.
Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.
Натрия сульфат безводный, чда, ГОСТ 4166-76.
Стандартный раствор санмайта,
содержащий 100 мкг/мл вещества.
Стандартный раствор санмайта,
содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной
колбе с притертой пробкой в 100 мл ацетона. Хранят в холодильнике не более
месяца.
Спирт этиловый, 96-процентный, ГОСТ
5962-81.
Универсальная индикаторная бумага, ТУ
6-09-1181-71.
К методу ГЖХ
Носитель для колонки - Хроматон N-AW с 5% SE-30.
Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74, в
баллонах с редуктором.
К методу ТСХ
О-толидин, МРТУ
6-09-6332-75.
Кислота уксусная ледяная, хч, ГОСТ 18270-72.
Калия иодид, хч,
ГОСТ 4232-74.
Калий марганцевокислый,
хч, ГОСТ 20490-75.
Кислота соляная, хч,
ГОСТ 3118-77.
Пластинки "Silufol"
(Хемапол, ЧССР).
Подвижная фаза: ацетон - гексан 1:1.
Проявляющий реактив. Готовят раствор А: 0,2 г о-толидина растворяют в
2 мл уксусной кислоты. Раствор Б - 0,8 г иодида калия
растворяют в 2 мл дистиллированной воды. Растворы А и
Б смешивают и доводят дистиллированной водой до 100 мл.
Раствор для хлорирования. На дно
эксикатора помещают 2 - 3 г перманганата калия и добавляют 10 - 15 мл дистиллированной
воды. Затем сюда же приливают 8 - 10 мл концентрированной соляной кислоты.
2.3. Приборы и
посуда
Ротационный вакуумный испаритель для
отгонки растворителей ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Водяная баня, ТУ 64-1-425-72.
Колбы конические, емкостью 100 мл, ГОСТ
25336-82.
Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82.
Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.
Пипетки на 0,1 мл и 1 мл, ГОСТ 20292-74.
Воронки химические, ГОСТ 25336-82.
Воронки делительные, ГОСТ 25336-82.
К методу ГЖХ
Хроматограф с детектором постоянной
скорости рекомбинации (типа "Цвет", "Газохром"
или др.).
Микрошприц МШ-10, ТУ 283-3-106.
Колонка хроматографическая,
стеклянная, длина 1 м, внутренний диаметр 3 мм.
К методу ТСХ
Камера хроматографическая,
ГОСТ 25336-82.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.
2.4. Подготовка к
определению
2.4.1. Отбор проб
Отбор проб осуществляется в соответствии
с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,
продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом
СССР, N 2051-79 от 21.08.79.
2.5. Проведение
определения
2.5.1. Экстракция и очистка
Пробу анализируемой воды объемом 500 мл (pH воды равен 7 по универсальной индикаторной бумаге)
помещают в делительную воронку на 1000 мл и экстрагируют санмайт
дважды гексаном порциями по 30 мл. Водно-гексановую смесь в воронке встряхивают в течение 5 мин. Для
лучшего расслаивания водной фазы и растворителя в воронку пипеткой вносят 1 мл
96-процентного этилового спирта. Объединенный гексановый
экстракт сушат безводным сульфатом натрия (примерно 1 столовая ложка) и
отгоняют растворитель до объема 0,2 - 0,3 мл.
2.5.2. Определение методом ГЖХ
Остаток растворителя тщательно удаляют в
токе воздуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона и вводят в хроматограф 4 мкл.
Условия хроматографирования
Длина колонки - 1 м.
Диаметр колонки - 3,5 мм.
Твердый носитель Хроматон
N-AW.
Жидкая фаза - 5% SE-30.
Температура колонки - 220 °C.
Температура испарителя - 240 °C.
Температура детектора - 260 °C.
Газ-носитель - азот.
Скорость потока газа-носителя - 60
мл/мин.
Скорость диаграммной ленты - 240 мм/ч.
Объем вводимой пробы - 4 мкл.
Время удерживания - 5 мин.
Нижний предел детектирования - 1 нг.
Количественное определение проводят
методом расчета по соотношениям высота пика - концентрация. Для этого до и
после анализа проб вводят в хроматограф по 4 мкл
стандартного раствора, измеряют высоты пиков и вычисляют среднее арифметическое
из 3-х определений. Если при введении в хроматограф аликвотной части (4 мкл) конечного экстракта его концентрация превышает
линейный диапазон детектирования, пробу разбавляют.
Концентрацию препарата (X) в мг/л воды
вычисляют по формуле:
C x V
x h x V
ст ст пр общ
X = ----------------------,
V x h
x P
пр ст
где:
C
- концентрация санмайта в стандартном
растворе, введенном
ст
в хроматограф,
мкг/мл;
V -
объем пробы стандарта, введенный в хроматограф, мкл;
ст
h -
высота пика пробы, мм;
пр
V
- общий объем пробы, мл;
общ
V -
объем пробы, введенный в хроматограф, мкл;
пр
h -
высота пика стандарта, мм;
ст
P - навеска пробы, мл.
2.5.3. Определение методом ТСХ
Раствор
пробы после упаривания
с помощью капилляра
или
микропипетки количественно
наносят на пластинку "Silufol"
так,
чтобы диаметр
пятна не превышал
1 см. Стенки
колбы смывают
несколькими каплями
растворителя, который наносят в центр пятна.
Рядом с
пробой наносят стандартные растворы, содержащие 1, 2, 5,
10 мкг
препарата, после чего
пластинку помещают в
хроматографическую
камеру. После подъема
фронта смеси
растворителей ацетон:гексан 1:1 на
10 см пластинку вынимают из
камеры, сушат
на воздухе, помещают в эксикатор с раствором для
хлорирования (на
5 мин.). Пластинку
вынимают из эксикатора,
выдерживают на воздухе
до полного выветривания хлора
(больше 1
часа) и опрыскивают проявляющим раствором -
раствором о-толидина.
Препарат
проявляется в виде темно-фиолетового пятна. Нижний предел
обнаружения - 1
мкг. Величина R = 0,58.
f
Концентрацию санмайта
(X) в воде в мг/л вычисляют по формуле:
A
X = -,
P
где:
A - количество санмайта,
найденное в хроматографируемой пробе, мкг;
P - навеска анализируемой пробы, мл.
3. Требования
безопасности
Выполняются в соответствии с
"Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии,
противопожарного режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях,
отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР", N
2255-81 от 20.10.81.