Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6220-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
БИФЕНТРИНА (ТАЛСТАРА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
CH CH
3\/ 3 /\\
/\ /
\\
/ \
O ││ │ C H O F
Cl.
C----\
/ \ ││ │ 22 22 2 3
││ \C/
\/\ //\ /\\
││ \\
CH \// \/ \\ М.м. 422.
││ O
2 │ ││ │
C │ ││ │
/ \ CH \ //
F C Cl 3
\//
3
Бифентрин (талстар, бифенат) - (2-метил-/1,1'-бифенил/-3-ил)-метил-
3(2-хлор-3,3,3-трифлуро-1-пропенил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат.
Химически
чистое соединение представляет собой белый
кристаллический
-7
порошок с температурой плавления 51 - 66 °C, давление
пара 1 x 10 Па при
25 °C.
Хорошо растворим в
большинстве органических растворителей
(хлороформ, ацетон,
эфир, хлористый метилен), слабо растворим в гептане,
метаноле, воде.
В воздухе рабочей зоны может находиться в
виде аэрозоля.
ОБУВ талстара в
воздухе рабочей зоны - 0,015 мг/куб. м.
1. Характеристика
метода
Метод основан на использовании
газожидкостной хроматографии с детектором по захвату электронов или
тонкослойной хроматографии.
Отбор проб проводится с концентрированием
на бумажном фильтре "синяя лента".
Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме 0,1 нг
(ГЖХ), 1 мкг (ТСХ).
Нижний предел измерения в воздухе 0,001
мг/куб. м (ГЖХ), 0,01 мг/куб. м (ТСХ) (при отборе 100 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций 0,001 -
0,1 мг/куб. м (ГЖХ), 0,01 - 0,1 мг/куб. м (ТСХ).
Измерению не мешают другие пестициды, в
том числе ДДТ, ГХЦГ, хостаквик, пиретроиды.
Суммарная погрешность не превышает +/-
20,5% (ГЖХ) и +/- 25% (ТСХ).
2. Приборы,
аппаратура, посуда
Хроматограф, снабженный детектором по
захвату электронов (ДЭЗ).
Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.
Ротационный вакуумный испаритель с
набором колб типа ИР-1М (2М), ТУ 25-11-317-74.
Ртутно-кварцевая лампа ПРК-2 или ПРК-4,
ТУ 16-535-280-74.
Фильтродержатель (патроны).
Весы аналитические.
Хроматографическая стеклянная колонка длиною 1 м и внутренним диаметром 3 мм.
Секундомер, ГОСТ 5072-72.
Микропипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1 мл.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, на 1, 2, 5 мл.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.
Колбы конические, ГОСТ 25336-82, на 100
мл.
Воронки химические, ГОСТ 25336-82.
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, емкостью
10 мл с ценой деления 0,1 мл.
Камера хроматографическая,
ГОСТ 25336-82.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82.
Эксикатор, ГОСТ 25336-82.
2.1. Реактивы,
растворы, материалы
Талстар хч.
Хлороформ хч,
ГОСТ 20015-74.
н-Гексан хч, ГОСТ 6-09-3875-78.
Ацетон хч, ГОСТ
2603-79.
Спирт этиловый хч,
ГОСТ 5962-81.
Натрия сульфат безводный ч, ГОСТ 4166-76.
Йод кристаллический чда,
ГОСТ 4139-79.
Крахмал водорастворимый хч, ГОСТ 10163-76, 1-процентный водный раствор.
Фильтры бумажные обеззоленные
"синяя лента", ТУ 6-09-1673-77, предварительно промытые смесью
хлороформ - ацетон (1:1) и высушенные.
Пластинки хроматографические
"Силуфол" UV-254 (ЧССР) размером 15 x 15
см.
Азот особой чистоты газообразный в
баллонах с редуктором, ГОСТ 9293-74.
Хроматон N-AW силанизированный ГМДС с 5% SE-30 (0,16
- 0,20 мм).
Стандартный раствор в ацетоне с
содержанием талстара 100 мкг/мл (N 1); растворы,
содержащие 10, 1, 0,1 мкг/мл, готовят соответствующим разбавлением раствора N
1. Хранят в холодильнике не более 2-х недель.
2.2. Отбор проб
Воздух со скоростью 5 л/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента" в течение 5
минут. (Для определения на уровне чувствительности методики необходимо отобрать
25 л воздуха.)
Пробы анализировать сразу.
2.3. Подготовка к
измерению
2.3.1. Градуировочный
график
Для количественного определения талстара методом ГЖХ строят градуировочный
график. Градуировку прибора осуществляют методом абсолютной калибровки. Для
этого готовят серию стандартных растворов с содержанием 0,1 - 10 мкг/мл в
ацетоне, 1 мкл каждого разведения вводят в
хроматограф. По полученным данным строят градуировочный
график зависимости высоты пика в мм от количества бифентрина (талстара) в нг.
Для определения талстара
с помощью ТСХ применяется метод оценки по размерам пятна. Площадь пятен
известных количеств стандартных растворов измеряют с
помощью прозрачной или промасленной миллиметровой бумаги и строят график
зависимости "площадь пятна - количество" в пределах диапазона
линейности (1 - 10 мкг).
2.3.2. Проведение измерения
Фильтр переносят в коническую колбу и
экстрагируют бифентрин хлороформом трижды по 15 - 20
мл, периодически встряхивая. Объединенные экстракты сушат безводным сульфатом
натрия и концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,1 - 0,2 мл.
Растворитель удаляют на воздухе досуха. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл
ацетона и далее анализируют методами ГЖХ и ТСХ.
Условия
ГЖХ-анализа следующие: хроматограф,
снабженный детектором
постоянной скорости рекомбинации, включают в
соответствии с инструкцией на
следующий режим:
температура термостата колонок - 210 °C; температура
испарителя -
250 °C; температура детектора - 270 °C;
скорость потока
газа-носителя (азота)
- 60 мл/мин.; скорость
диаграммной ленты - 600
-12
мм/час; рабочая шкала электрометра 5 x 10 А; хроматографируемый объем -
1 мкл; линейный диапазон
детектирования 0,1 - 10 нг. Абсолютное время
удерживания на
колонке с SE-30 - 8 минут 45 секунд.
Количественную оценку бифентрина
проводят методом абсолютной калибровки
по градуировочному графику.
На полученной хроматограмме измеряют
интенсивность пиков
и по градуировочному графику определяют количество
бифентрина.
Для определения бифентрина
с помощью ТСХ экстракт после анализа методом
ГЖХ концентрируют
до объема примерно 0,1 - 0,2 мл и количественно наносят
на хроматографическую
пластинку "Силуфол". Справа и слева от
пробы наносят
известные количества стандартных растворов талстара в пределах линейности
детектирования. Хроматографирование проводят
в системе гексан - ацетон в
соотношении
50:1. После поднятия
фронта растворителя на 14 см пластинку
проветривают на
воздухе до полного
удаления растворителя. После
этого
пластинку подвергают
облучению УФ-светом в течение 20 - 25 минут, а
затем
помещают в камеру с парами йода на 5 минут. Далее
пластинки выветривают на
воздухе и проявляют
1-процентным водным раствором
крахмала. Зоны
локализации обнаруживаются в
виде синих пятен на светлом
фоне. Окраска
пятен устойчива в течение 3-х дней. Величина R
составляет 0,40 +/- 0,02.
f
Линейный диапазон
измерения на пластинке составляет
1,0 - 10,0 мкг. Если
содержание
препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона линейности
(10 мкг), то для
нанесения на пластинку необходимо брать аликвотную часть
экстракта.
На полученной хроматограмме
измеряют интенсивность пиков (по окраске и площади) с помощью миллиметровой
бумаги и по калибровочному графику определяют содержание бифентрина.
2.4. Расчет
концентрации
Концентрацию (C, мг/куб. м) бифентрина вычисляют по формуле:
a x V
C = --------,
V x V
1 20
где:
a
- количество бифентрина, найденное
в хроматографируемой пробе по
градуировочному
графику, нг (ГЖХ), или
соотношением со стандартом, мкг
(ТСХ);
V - общий объем анализируемого раствора,
мл;
V - хроматографируемый объем пробы, мкл
(ГЖХ) или мл (ТСХ).
1
При нанесении всей пробы на пластинку V = V ;
1
V -
объем анализируемого воздуха.
20
3. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима
и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах
санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР (N 2455-81 от
20.10.81).