Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6234-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТЕФЛУБЕНЗУРОНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
Торговое наименование: Номолт.
Фирма: Цианамид (США).
Действующее вещество: тефлубензурон
- 1-(3-5-дихлор-2,4-дифторфенил)-3-(2,6-дифторбензоил)-мочевина.
---F F---Cl
// \\ //
\\
\ ___ /--CONHCONH--\ ___ /F
---F ---Cl
Эмпирическая формула: C H Cl F N O .
14 6 2 4 2 2
Молекулярная масса: 384.
Химически чистое соединение представляет
собой белый кристаллический порошок без особого запаха с температурой плавления
222,5 °C. Хорошо растворим в органических растворителях (хлороформ, ацетон,
бензол и др.), растворимость в воде ограничена (0,02 мг/л). Стабилен
по отношению к действию света и температуре. В воздухе может находиться в виде
аэрозоля.
ОБУВ номолта в
воздухе рабочей зоны не установлен.
Краткая токсикологическая характеристика
Малотоксичен.
Острая оральная токсичность.
ЛД
для крыс и мышей - более 5000 мг/кг.
50
Острая дермальная
токсичность.
ЛД
для крыс - более 2000 мг/кг.
50
Не раздражает кожу и глаза.
Область применения препарата
Номолт используется в качестве регулятора роста насекомых против личинок
чешуекрылых, жесткокрылых и двукрылых. Рекомендован к
применению на яблоне, виноградной лозе, персике, картофеле, сое, рисе, пшенице,
хлопчатнике, кукурузе, овощных культурах.
Изготовляется в виде концентратов
суспензий (50 и 150 г д.в./га) и концентрата эмульсии
(50 г д.в./л).
2. Методика
измерения концентраций тефлубензурона
в воздухе рабочей зоны
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Определение основано на концентрировании аэрозолей тефлубензурона из
воздуха на фильтр "синяя лента" с последующей идентификацией и
количественным определением с помощью газожидкостной (ГЖХ) или тонкослойной
(ТСХ) хроматографии.
2.1.2. Избирательность методики
Определению номолта
в предлагаемых условиях не мешают близкие по структуре и области применения
такие соединения, как ДДТ, ДДД, ДДЕ, ГХЦГ, талстар,
каскад.
2.1.3. Метрологическая характеристика
методики
(n = 25, p = 0,95)
|
Метод
анализа
|
Метрологические
параметры
|
|
предел
обнаруж.,
мг/куб. м
|
диапазон
опред. конц.,
мг/куб. м
|
среднее
значение %
обнаружен.
|
стандартное
отклон., %
|
доверит.,
интервал
средн., %
|
относит.
станд.
откл., %
|
|
ГЖХ
|
0,04
|
0,04 - 0,8
|
98,5
|
+/- 2,78
|
+/- 1,3
|
+/- 2,82
|
|
ТСХ
|
0,04
|
0,04 - 0,4
|
89,6
|
+/- 8,83
|
+/- 3,64
|
+/- 9,92
|
2.2. Реактивы,
растворы, материалы
Тефлубензурон хч.
Хлороформ хч,
ГОСТ 20215-74.
н-Гексан хч, ГОСТ 6-09-3875-78.
Ацетон хч, ГОСТ
2603-79.
Спирт этиловый хч,
ТУ 6-1710-77.
Натрия сульфат безводный ч, ГОСТ 4166-76.
Соляная кислота концентрированная хч, ГОСТ 3118-77, 12-процентный водный раствор (по объему).
Калий марганцовокислый хч, ГОСТ 20490-76, 3-процентный водный раствор.
Калий йодистый хч,
ГОСТ 4232-74, 1-процентный водный раствор.
Крахмал водорастворимый хч, ГОСТ 10163-76, 3-процентный водный раствор.
Фильтры бумажные обеззоленные
"синяя лента", ТУ 6-09-1678-77, предварительно промытые смесью
хлороформ - ацетон (1:1) и высушенные.
Пластинки хроматографические
"Силуфол" UV-254 (ЧССР) размером 15 x 15
см.
Азот особой чистоты газообразный в
баллонах с редуктором, ГОСТ 9293-74.
Хроматон N-AW силанизированный ГМДС с 5% XE-60 (0,16
- 0,20 мм).
2.3. Приборы,
аппаратура, посуда
Хроматограф, снабженный детектором
постоянной скорости рекомбинации.
Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.
Ротационный вакуумный испаритель с
набором колб типа ИР-1М (2М), ТУ 25-11-917-74.
Ртутно-кварцевая лампа ПРК-2 или ПРК-4,
ТУ 16-535-280-74.
Фильтродержатели (патроны).
Весы аналитические.
Хроматографическая колонка стеклянная длиной 2 м и внутренним диаметром 3 мм.
Секундомер, ГОСТ 5072-72.
Микропипетки на 0,1 мл, ГОСТ 20292-74.
Колбы мерные на 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Колбы конические на 100 мл, ГОСТ
20292-82.
Воронки химические, ГОСТ 29932-74.
Цилиндры мерные емкостью 50, 100 мл, ГОСТ
1770-74.
Пробирки мерные емкостью 10 мл с ценой
деления 0,1 мл, ГОСТ 1770-74.
Камера хроматографическая,
ГОСТ 25336-82.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-79.
2.4. Отбор проб
Воздух со скоростью 5 л/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента" в течение 5
минут. (Для определения на уровне чувствительности методики необходимо отобрать
25 л воздуха.) Пробы анализировать сразу.
2.5. Подготовка к
определению
2.5.1. Приготовление проявляющего
реактива для ТСХ-определения
Проявляющий реактив для ТСХ-определения:
хлорирование - йодид калия - крахмал.
Раствор для хлорирования. Смешивают
равные объемы 3% раствора перманганата калия и 12% раствора соляной кислоты.
Готовят перед употреблением в количествах, необходимых для разового
пользования.
Проявляющий реагент: а) 1% раствор
йодистого калия; б) 3% раствор крахмала; перед употреблением смешать растворы
а), б) и этиловый спирт в соотношении 2,5:2,5:1.
2.5.2. Приготовление стандартных
растворов
Стандартный раствор N 1 с содержанием тефлубензурона 100 мкг/мл готовят растворением 10,0 мг
вещества в ацетоне в мерной колбе на 100 мл.
Растворы, содержащие 20, 10, 1 мкг/мл,
готовят соответствующим разбавлением раствора N 1. Хранят в холодильнике не
более месяца.
2.5.3. Построение градуировочного
графика
Для количественного определения тефлубензурона методом ГЖХ строят градуировочный
график методом абсолютной калибровки. Готовят серию стандартных растворов с
содержанием 1 - 20 мкг/мл в ацетоне, 1 мкл каждого
разведения вводят в хроматограф. По полученным данным строят график зависимости
интенсивности пика от количества тефлубензурона.
Для определения тефлубензурона
с помощью ТСХ применяли метод оценки по размерам пятна. Площадь пятен известных
количеств стандартных растворов измеряют с помощью
прозрачной или промасленной миллиметровой бумаги и строят график зависимости
"площадь пятна - количество" в пределах линейности детектирования (1
- 10 мкг).
2.6. Описание
определения
Фильтр переносят в коническую колбу и
экстрагируют тефлубензурон хлороформом трижды по 15 -
20 мл, периодически встряхивая. Объединенные экстракты сушат безводным
сульфатом натрия и концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,1 - 0,2
мл. Растворитель удаляют на воздухе досуха. Сухой остаток в колбе растворяют в
1 мл ацетона и далее анализируют методами ГЖХ и ТСХ.
Условия
ГЖХ-анализа следующие: хроматограф,
снабженный детектором
постоянной скорости рекомбинации, включают в
соответствии с инструкцией на
следующий режим:
температура термостата колонок - 180 °C; температура
испарителя -
230 °C; температура детектора - 190 °C;
скорость потока
газа-носителя (азота)
- 60 мл/мин.; скорость
диаграммной ленты - 600
-12
мм/час, рабочая
шкала электрометра 5 x 10 А; хроматографируемый объем -
1 мкл; нижний предел обнаружения - 1 нг. Абсолютное
время удерживания на
колонке с 5%
XE-60 - 4 минуты 30 секунд.
Количественную оценку тефлубензурона
проводят с помощью калибровочного графика. На полученной
хроматограмме измеряют интенсивность пиков и по
калибровочному графику определяют количество тефлубензурона.
Для определения тефлубензурона
с помощью ТСХ экстракт после анализа методом ГЖХ концентрируют до объема 0,1 -
0,2 мл и количественно наносят на хроматографическую
пластинку "Силуфол". Справа и слева от
пробы наносят известные количества стандартного раствора тефлубензурона
в пределах диапазона линейности.
Хроматографирование проводят
в системе гексан
- ацетон в соотношении
5:3. После поднятия фронта растворителя на 14 см
пластинку проветривают на
воздухе до полного удаления растворителей. После этого
пластинку подвергают
облучению УФ-светом
в течение 30 - 35 минут, а затем
помещают в камеру с
хлорирующей смесью на 3 минуты. После этого оставляют
пластинку на воздухе
до полного
удаления запаха хлора
(около 15 минут)
и обрабатывают из
пульверизатора проявляющим
реагентом (йод-крахмальный реактив).
Зоны
локализации номолта обнаруживаются в
виде синих пятен на светлом фоне.
Величина R
составляет 0,4 +/-
0,02. Линейный диапазон
измерения на
f
пластинке составляет
1,0 - 10,0
мкг. Если содержание препарата в пробе
превышает верхнюю
границу диапазона линейности (10 мкг), то для нанесения
на пластинку
необходимо брать аликвотную часть экстракта.
На полученной хроматограмме
измеряют интенсивность пятен (по окраске и площади) с помощью миллиметровой
бумаги и по калибровочному графику определяют содержание тефлубензурона.
2.7. Обработка
результатов анализа
Концентрацию (C, мг/куб. м) тефлубензурона вычисляют по формуле:
a x V
C = --------,
V x V
1 20
где:
a - количество номолта,
найденное по калибровочному графику, мкг;
V - общий объем анализируемого раствора,
мл;
V - хроматографируемый объем пробы, мл;
1
V -
объем анализируемого воздуха, приведенный к стандартным условиям,
20
л.
3. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима
и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах
санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР (N 2455-81 от
20.10.81).