Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6238-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ ИМАЗАПИРА
(АРСЕНАЛА) В ВОДЕ И ПОЧВЕ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
Имазапир (арсенал, чаппер, имидазолинон).
Действующее вещество: 2-(4-изопропил-4-метил-5-оксо-2-имидазолин-2-ил)никотиновая кислота.
Структурная формула:
//\
COOH
//
\/
C H N O .
│
││ N CH 13 15 3 3
\\
/\ //\ 3
\\/
\// \/ М.м. 261,3.
N
│ │\
HN──┐│ CH(CH )
O 3 2
Белый
порошок со слабым запахом уксуса.
Т. пл. 160 - 173 °C.
-7
Давление пара
при 45 °C менее 2 x 10 мм рт. ст. Растворимость в
воде 10 - 15 г/л
при 25 °C. pH 1-процентного
водного раствора
3,0 - 3,5. При 25
°C раствор устойчив
более чем 18 месяцев.
Препарат
ограниченно растворим в органических растворителях. В
почве сохраняется
в зависимости от
климатических условий от 6
месяцев до 2
лет.
Выпускается
в виде водной эмульсии концентрацией 240 г/л и 5%
гранул. Малотоксичен. ЛД
для крыс более 5000 мг/кг, мышей -
50
более 2000
мг/кг. МДК и ПДК
не установлены. Имазапир
является
гербицидом и
арборицидом.
2. Методика
определения имазапира
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении имазапира из воды хлороформом, из почвы буферным раствором
и очистке экстракта между двумя несмешивающимися жидкостями. Конечное
определение проводят методом газожидкостной хроматографии в виде метилового
эфира 2-(4-изопропил-4-метал-5-оксо-2-имидазолин-2-ил)-никотиновой
кислоты.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода приведена в таблице.
Таблица
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ АРСЕНАЛА ГЖХ
┌───────────────────────────────────────────────────┬──────────┬──────────┐
│ Показатели точности измерения │ Почва
│ Вода │
├───────────────────────────────────────────────────┼──────────┼──────────┤
│Среднее
значение определения, %
│86,8 │92,5 │
│Стандартное
отклонение, +/- % │5,9 │1,2 │
│Относительное
стандартное отклонение, +/- % │6,8 │1,3 │
│Доверительный интервал (+/- %) среднего (n = 5, P =│8,4 │3,5 │
│0,95) │ │ │
│Относительная
погрешность измерений (+/- %) │15 │12 │
│Предел
обнаружения (мг/кг, мг/л)
│0,05 │0,01 │
│Диапазон
определяемых концентраций (мг/кг, мг/л)
│0,05 - 0,5│0,01 - 0,5│
│Минимально
детектируемое количество │0,5
нг │0,5
нг │
└───────────────────────────────────────────────────┴──────────┴──────────┘
2.1.3. Избирательность метода
Метод специфичен, другие гербициды,
арборициды (например, велпар, раундап,
глуфосинат аммония, 2,4-Д, гарлон)
определению не мешают.
2.2. Реактивы и
материалы
Аналитический стандарт:
2-(4-изопропил-4-метил-5-оксо-2-имидазолин-2-ил)никотиновая
кислота, выпускается фирмой "Cyanamid"
(США). Содержание основного вещества в препарате 99,1%.
Хлороформ, ГОСТ 20015-74.
Метанол, хч,
ГОСТ 6995-77.
Калий фосфорнокислый однозамещенный, ч, ГОСТ 4198-75.
Натрий фосфорнокислый двузамещенный,
ч, ГОСТ 4172-76.
Вода дистиллированная, ГОСТ 6709-72.
Кислота соляная, хч,
ГОСТ 3118-77, 1 н раствор.
Натрий сернокислый безводный, чда, свежепрокаленный, ГОСТ 4166-76.
Воздух сжатый, ГОСТ 9010-80.
Водород, ГОСТ 3022-88.
Триметиланилин, ч, ТУ 6-09-10-915-73.
Азот высокой чистоты, ТУ 6-16-40-14-88.
Фильтры бумажные беззольные "синяя
лента", ТУ 6-09-1678-77.
Хромосорб-750 (100 - 120 меш) с 3,8%
OV-17.
Основной стандартный раствор имазапира в метаноле с содержанием 100 мкг/мл, хранят в
холодильнике до трех месяцев.
0,2 М раствор гидроокиси триметиланилина в метаноле готовится растворением триметиланилина в свежеперегнанном метаноле.
2.3. Приборы,
аппаратура и посуда
Газовый хроматограф с термоионным
детектором.
Колонка стеклянная длиной 1800 мм,
внутренним диаметром 4 мм.
Микрошприцы на 10 мкл МШ-10М, ТУ 2-833-106.
Весы аналитические ВЛР-200, ТУ
25-06-1131-75.
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М,
ТУ 25-11-917-74.
Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ
25336-82.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Воронки делительные емкостью 500 мл, ГОСТ
25336-82.
Колбы мерные емкостью 25, 50, 100 мл,
ГОСТ 1770-74.
Колбы плоскодонные емкостью 500 мл, ГОСТ
25336-82.
Колбы круглодонные емкостью 500 мл, ГОСТ
25336-82.
Цилиндры мерные емкостью 1000 мл, ГОСТ
1770-74.
Воронки химические, ГОСТ 25336-82.
Стеклянные палочки.
Пробирки на шлифах вместимостью 5 мл,
ГОСТ 1770-74.
pH-метр, ГОСТ 15-150-69.
Линейка измерительная, цена деления 0,1
см, ГОСТ 17435-72.
2.4. Подготовка к
определению
2.4.1. Приготовление рабочих растворов
В мерные колбы на 50 мл помещают по 0,5;
1; 2,5; 5 и 10 мл основного раствора и доводят до метки метанолом. Эти растворы
содержат 1, 2, 5, 10 и 20 мкг/мл имазапира
соответственно.
Растворы имазапира
стабильны при хранении в герметичной упаковке в холодильнике и могут быть
использованы в течение 3 месяцев.
Перед хроматографированием
к 4 мл рабочего стандартного раствора добавляют 20 мкл
0,2 М раствора гидроокиси триметиланилина в метаноле.
2.4.2. Приготовление буферного раствора с
pH 7
Фосфатный
буфер готовят, растворяя
13,6 г одноосновного
фосфата калия
и 14,1 г двуосновного
фосфата натрия в
4 л
дистиллированной воды.
При необходимости раствор
подкисляют или
подщелачивают
растворами H PO и NaOH.
3 4
2.4.3. Приготовление 1,0 н раствора
соляной кислоты
83 мл концентрированной соляной кислоты
помещают в мерную колбу на 1 л и доводят до метки дистиллированной водой.
2.4.4. Подготовка проб
Вода. 200 - 1000 мл воды отфильтровывают
через бумажный фильтр (синяя лента) и помещают в плоскодонную колбу на 500 мл.
Почва. 40 г воздушно-сухой и просеянной
через сито с размером ячеек 1 мм почвы помещают в плоскодонную колбу на 500 мл.
2.5. Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,
продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем
Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 за N 2051-79.
2.6. Проведение
определения
2.6.1. Вода
К пробе воды, подкисленной 1,0 н соляной
кислотой до pH 2,0 +/- 0,1, добавляют 100 мл хлороформа.
Имазапир экстрагируют при тщательном перемешивании на механическом встряхивателе в
течение 2 минут. Содержимое колбы переносят в делительную воронку на 500 мл.
Хлороформный экстракт отделяют и пропускают через слой сернокислого натрия в
круглодонную колбу на 500 мл. Экстракцию повторяют еще дважды. Объединенный
хлороформный экстракт выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при
температуре 40 °C. Колбу обмывают дважды по 50 мл метанолом, каждый раз испаряя
метанол досуха. Сухой остаток растворяют в 4 мл метанола, тщательно обмывая
стенки колбы. 1 мл полученного метанольного раствора
смешивают с 50 мкл 0,2 М раствора гидроокиси триметиланилина в метаноле и хроматографируют.
2.6.2. Почва
К пробе почвы приливают 200 мл фосфатного
буферного раствора. Полученную суспензию тщательно перемешивают на механическом встряхивателе в
течение 30 минут и фильтруют через бумажный складчатый фильтр. К твердому
осадку приливают 100 мл буферного раствора, встряхивают суспензию 5 минут и
отфильтровывают. Объединенный фильтрат подкисляют 1 н соляной кислотой до pH 2,0 +/- 0,1. Из полученного раствора арсенал
экстрагируют 100 мл хлороформа при энергичном перемешивании в течение 2 минут,
после чего содержимое колбы переносят в делительную воронку на 500 мл.
Хлороформный слой отделяют и пропускают через слой сернокислого натрия в
круглодонную колбу на 500 мл. Экстракцию повторяют еще 2 раза. Объединенный
хлороформный экстракт упаривают на вакуумном испарителе при температуре 40 °C.
Колбу обмывают дважды по 50 мл метанола, каждый раз испаряя растворитель
досуха. Сухой остаток растворяют в 4 мл метанола, тщательно обмывая стенки
колбы. Из полученного раствора отбирают 1 мл, прибавляют 50 мкл
0,2 М гидроокиси триметиланилина и хроматографируют.
2.7. Условия хроматографирования
Газохроматографическое определение имазапира проводится на хроматографе с термоионным
детектором при следующих условиях:
Твердый носитель - Хромосорб
750 (100 - 120 меш) с 3,8% OV-17.
Колонка стеклянная 1800 мм с внутренним
диаметром 4 мм.
Скорость газа-носителя (азот высокой
чистоты) - 30 мл/мин., водорода - 3,3 мл/мин., воздуха - 55 мл/мин.
Температура колонки - 230 °C;
испарителя - 250 °C;
детектора - 300 °C.
Скорость протяжки ленты самописца - 0,25
см/мин.
Время удерживания при указанных условиях
- 8,40 +/- 0,40 мин.
Вводимый объем - 1 - 5 мкл.
Линейный диапазон детектирования - 1 -
100 нг.
Минимально детектируемое количество - 0,5
нг.
2.8. Обработка
результатов анализа
Количественное определение проводят
методом соотношения со стандартом по высоте пиков. Расчет концентрации
препарата (X) в почве в мг/кг и воде в мг/л проводят по формуле:
4 x H x C
x V
пр ст 2
X = ------------------,
H x V x
P
ст 1
где:
X - концентрация арсенала в воде (мг/л),
почве (мг/кг);
H -
высота пика рабочей пробы, мм;
пр
C
- количество имазапира в хроматографируемом
объеме
ст
стандартного
раствора, нг;
V -
объем рабочего раствора, мл;
2
V
- объем аликвоты рабочей пробы, вводимой в хроматограф,
1
мкл;
P - масса анализируемой пробы, мл, г;
H -
высота пика стандартного раствора имазапира, мм.
ст
3. Требования
безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила
безопасности при работе с органическими растворителями, токсическими
веществами, концентрированными кислотами.