Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
20 июля 1977 г. N 1743-77
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
К ПОСТАНОВКЕ ИССЛЕДОВАНИЙ ПО ГИГИЕНИЧЕСКОМУ НОРМИРОВАНИЮ
МИКРОБНЫХ ПРЕПАРАТОВ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Методические указания разработаны отделом
гигиены и профессиональных заболеваний ЦНИЛа Рижского
медицинского института.
Для накопления опыта и получения
сопоставимых результатов воздействия микробных препаратов на организм человека
и животных, могущих в дальнейшем быть использованными при разработке критериев
оценки токсичности и опасности этих препаратов, требуется проведение единых
исследований.
В настоящих Методических указаниях
приведена схема постановки исследований по гигиеническому нормированию
микробных препаратов и даны рекомендации по обоснованию их предельно допустимых
концентраций в воздухе рабочей зоны.
Методические указания предназначены для
использования в работе научно-исследовательских организаций гигиенического
профиля и учреждений санитарно-эпидемиологической службы, занимающихся
исследованием, обоснованием и подготовкой гигиенических нормативов различных
веществ в объектах внешней среды.
Токсикологическая оценка микробных
препаратов связана с их гигиеническим нормированием в воздухе рабочей зоны
производственных помещений.
В настоящее время возрастает число
микробных препаратов, увеличивается производство и масштабы их применения, что
может представлять потенциальную опасность неблагоприятного воздействия на
организм людей, занятых как производством указанных препаратов, так и их
применением.
Для борьбы с бактериальными, грибными и
вирусными заболеваниями растений, которые наносят большой урон
сельскохозяйственному производству, наряду с химическими веществами, нередко высокоопасными, широко используются микробные препараты.
Применение последних в этой области очень перспективно, т.к. они обладают
относительно слабой токсичностью в отношении человека и животных и
специфическим действием на возбудителей ряда болезней растений. Вещества,
получаемые при помощи микробиологического синтеза, широко применяются и в
других отраслях народного хозяйства.
ОБЩИЕ УКАЗАНИЯ ПО ГИГИЕНИЧЕСКОМУ
НОРМИРОВАНИЮ МИКРОБНЫХ ПРЕПАРАТОВ
При производстве микробных препаратов работающие имеют контакт главным образом с культурой и
готовым продуктом. Токсикологическая оценка последнего проводится, в основном,
согласно "Методическим указаниям к проведению экспериментальных
исследований для обоснования ПДК вредных веществ в воздухе производственных
помещений" (1969). При санитарном нормировании указанных препаратов нельзя
оперировать такими понятиями, как эмпирическая или структурная формула
вещества, молекулярный вес, точки плавления и кипения и др., а также невозможно
их определение в воздухе химическим способам.
Для обоснования ПДК микробных препаратов
необходимо оценить возможные проявления и выраженность специфического
биологического действия исследуемых веществ, связанных с размножением микроорганизмов
и включением их в аутофлору организма, вариабельность
их свойств в зависимости от климатических условий и состава питательных сред.
Комплекс белков бактериальной клетки при попадании в организм может вызвать его
сенсибилизацию, поэтому в качестве специфических тестов рекомендуется
использовать микробиологические и иммунологические показатели.
ОСНОВНАЯ СХЕМА
ПОСТАНОВКИ ЭКСПЕРИМЕНТА
1. Исследование
штаммов-продуцентов
Для решения вопроса о возможности
использования штамма микроорганизма в качестве продуцента следует определить
его патогенность и вероятность носительства.
Степень патогенности определяется
вирулентностью и выражается количеством микробных тел, вызывающих летальный
эффект.
Ориентировочно патогенным
следует считать такой штамм микроорганизма,
который при внутрибрюшинном введении
вызывает гибель 50%
подопытных
7
животных (крысы,
мыши) в дозе не более 10
микробных тел на одно животное
<*>.
--------------------------------
<*> Указанные величины в качестве
критерия вирулентности обоснованы Е.А. Мельниковой (ВНИИГИНТОКС).
Если гибели животных не наблюдается, то
для достоверности оценки степени патогенности штаммов следует проводить
определение вирулентности и на группе ослабленных животных с использованием
некоторых функциональных и экспериментальных нагрузок: химических (спирт, гексенал и др.), физических (холодовая,
повышенная температура), механических (плаванье и др.) и биологических (голод и
др.).
Патогенные штаммы не допускаются к
использованию в технологическом процессе.
Штаммы-продуценты, обладающие
допустимой вирулентностью, подлежат
дальнейшему
исследованию на возможность
носительства (одноразовое
внутрибрюшинное и
внутрижелудочное введение культуры
продуцента
7 8
соответственно в
дозах 10 и 10 микробных тел на одно животное).
Носительство определяется путем посева (в
течение 30 дней с интервалом в 2 - 3 дня) со строгим соблюдением общепринятых
правил стерильности из следующих биосубстратов:
кожных покровов, слизистых оболочек полости рта и носа, крови, печени, почек,
селезенки.
Прекращать посевы следует после
3-кратного отрицательного результата в указанный период наблюдений.
В случае высевания продуцента в срок
более 30 дней исследуемый штамм также не рекомендуется для использования в
производстве.
2. Исследование
готового сухого микробного препарата
С целью обоснования его ПДК в воздухе
рабочей зоны готовый микробный препарат подлежит экспериментальному
токсикологическому изучению с возможным прогнозированием отдаленных
последствий. Необходимо произвести гигиеническую оценку условий труда,
обследование состояния здоровья работающих, а также разработать методику
определения содержания препарата в воздухе.
Для этого необходимо провести:
2.1. 4-х месячную ингаляционную затравку
белых крыс для оценки препарата на:
а) токсичность - согласно
"Методическим указаниям к проведению экспериментальных исследований для
обоснования ПДК вредных веществ в воздухе производственных помещений"
(1969) с использованием специфических микробиологических и иммунологических тестов,
определяющих порог хронического действия;
б) аллергенность
- согласно методическим указаниям "Постановка исследований по выявлению
сенсибилизирующих свойств и установлению порогов аллергенного действия
промышленных веществ", одобренным Союзной проблемной комиссией
"Научные основы гигиены труда и профпатологии"
(1975).
На основании экспериментальных данных
<*> обосновываются предельно допустимые концентрации, которые выражаются
в единицах микробных тел/куб. м. Одновременно дается перерасчет в мг/куб. м.
--------------------------------
<*> Если наполнитель потенциально
опасен за счет фиброгенного действия, нормирование
проводится согласно "Временным методическим указаниям к обоснованию ПДК
аэрозолей фиброгенного действия" (1965).
Учитывая, что при обосновании величины
коэффициента запаса веществ, обладающих аллергенным действием, и антибиотиков
указанная величина равняется 10, целесообразно и при нормировании микробных
препаратов принять аналогичный коэффициент запаса.
2.2. Гигиеническое изучение условий труда
и состояния здоровья рабочих производства микробных препаратов. При этом
следует обратить особое внимание на:
а) технологический процесс и
продолжительность воздействия пыли (кратковременное, прерывистое, длительное,
непрерывное);
б) агрегатное состояние препарата;
в) активность и длительность его
хранения;
г) количество микробных тел в 1 г
препарата;
д) необходимый наполнитель;
е) содержание пыли, в т.ч.
микробных тел (минимальные и средние данные) на рабочих местах с учетом технологического
процесса и времени года (в каждой точке отбирается не менее 8 - 10 проб).